离断胃迷走神经对门静脉高压胃病大鼠胃泌素水平的影响

舒畅，徐进宇*，朱家胜

（1.无锡市人民医院急诊中心，江苏 无锡 214000；2.皖南医学院弋矶山医院胃肠外科）

门静脉高压症是由门静脉系统血流受阻和（或）血流量增加，导致门静脉及其属支静脉压升高所形成的综合征［1］。而门静脉高压胃病 （portal hypertensive gastropathy，PHG）是指门静脉高压症引起的胃黏膜病变，有肝硬化病史的患者容易发生，也可见于上消化道出血者、曾经有过断流手术史者、胃食管静脉曲张套扎术后二次出血者。传统的断流术是目前治疗PHG的主要术式之一，但切断了迷走神经主干，术后存在胃排空障碍，胃潴留发生率为14%～40%［2］。胃泌素主要是由胃窦及十二脂肠细胞分泌的一种多肽，是最强的促胃酸分泌激素。有研究表明胃肠激素可能参与了肝硬化PHG患者胃黏膜病变的形成［3］，血浆胃泌素水平与PHG的发生发展有相关性［4］。目前学者对单纯切除迷走神经后，血清胃泌素水平的升高及PHG中高胃泌素血症的相关性有所了解［5］，但是在PHG中，切断胃迷走神经后是否引起或加重高胃泌素血症尚属于起步阶段。本研究旨在分析PHG、高胃泌素血症、胃迷走神经这三者存在的相关性，分析PHG中离断胃迷走神经后胃泌素水平的变化，推断出治疗PHG中离断迷走神经的作用，从而为断流术中是否保留胃迷走神经，防止高胃泌素血症的加重提供新思路或新方法。

1 材料与方法

1.1 实验动物 普通级健康雄性SD大鼠40只，实验动物许可证号：SCXK（苏）2003-0001，体重 （220±15）g，由南京市青龙山动物繁殖中心提供，在本院动物实验室适应性喂养10 d，饲料为苏州双狮公司生产的全价颗料饲料。

1.2 主要设备和仪器 MK-3酶标仪 （伊曼国际贸易 （上海）有限公司），GSX型大视野棱镜式手术放大镜 （天津市医用光学仪器厂），病理图文管理系统4.10（北航图像中心），电子天平及分析天平 （上海仪器厂），生物信号采集系统2.0（安徽正华生物仪器设备有限公司），GT16-3高速离心机 （北京时代北利离心机有限公司），电热恒温水槽 （上海跃进医疗器械厂），YP600压力换能器（振华教学仪器有限公司），RM-6240BD多道生理记录仪器 （北京鑫骉腾达仪器设备有限公司），TGL-16G台式高速冷冻离心机 （长沙湘仪离心机仪器有限公司），-70℃超低温冰箱 （MDF-192）（日本三洋）。

1.3 主要试剂 大鼠胃泌素ELISA试剂盒48T、大鼠胃泌素ELISA试剂盒96T（德国IBL公司），4%多聚甲醛、戊巴比妥、PBS缓冲液由本院动物实验中心提供。

1.4 方法

1.4.1 实验动物分组 将SD大鼠随机分为假手术组 （SHAM组）、门静脉高压胃病组 （PHG组）、单纯胃迷走神经离断术组 （VO组）和门静脉高压胃病迷走神经离断组 （PHGVO组），各10只。

1.4.2 动物模型建立 PHG组：实验大鼠术前晚开始禁食，当天禁水，腹腔注射0.3%戊巴比妥钠1 ml/100 g麻醉。自剑突向下作腹部正中切口长约3 cm，向左拉开空肠及回肠，即可暴露门静脉主干，从脾静脉汇入门静脉上方将门静脉主干与周围疏松组织分离，达门静脉左右分支分叉处。用10号钝头直针，直径为0.889 mm［6］，平行置于门静脉主干旁，从门静脉下穿过2根5-0丝线，将门静脉在左、右门静脉分叉的下方和脾静脉汇入的上方分别与钝头指针在一起结扎，后轻旋转抽出针头，缩窄后门静脉直径同该指针相一致。逐层关腹，即完成部分门静脉结扎。VO组：方法同PHG组，但不予结扎，下一步在手术显微镜下，显露大鼠胃底和胃体部，于胃小弯处暴露前后迷走神经分支即Lartarjet神经，沿前后迷走神经分支处向上寻找胃迷走神经干，并用多道生理记录仪测定证实为胃迷走神经后，选择在胃迷走神经干中点处行离断术，然后关腹［7］。SHAM组：同上述手术方法，进腹后仅游离门静脉和胃迷走神经干，不予结扎和离断后关腹。PHGVO组：在PHG模型制作成功后，行同VO组模型制作方法，离断胃迷走神经。模型制备术中VO组因麻醉死亡1只，PHGVO组因血管破裂死亡1只。建模术后3周各组大鼠数量：SHAM组10只、VO组9只、PHG组10只、PHGVO组9只。

1.4.3 门静脉压力测定及血清和胃组织胃泌素的检测 4组大鼠在建模术后3周分别在第3、7、14天，每组随机取3只分3批处死。门静脉压力测定：大鼠腹腔注射0.3%戊巴比妥钠1 ml/100 g麻醉成功后，沿原切口进腹，用22G静脉留置针于距门静脉主干3 cm处肠系膜上静脉穿刺至门静脉主干后固定，接充以肝素生理盐水的压力换能器及多道生理记录仪，门静脉压力大于1.57 kPa为门静脉高压形成。血清及胃组织中胃泌素水平测定采用去蛋白法双抗体两步夹心酶联免疫吸附法测定。

1.5 统计学方法 采用SPSS 18.0软件进行统计学分析，计量资料以均数±标准差表示，多组均数间比较采用方差分析，组内两两比较采用q检验，检验水准α＝0.05，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

PHG组和PHGVO组的门静脉压力均显著高于SHAM组和VO组 （P＜0.05），SHAM组与VO组、PHG组与PHGVO组门静脉压力比较差异均无统计学意义 （P＞0.05）；PHGVO组的血清和胃组织胃泌素水平均明显高于其他组 （P＜0.05），PHG组和VO组血清和胃组织胃泌素水平均明显高于SHAM组 （P＜0.05），而PHG组与VO组血清和胃组织胃泌素水平差异均无统计学意义 （P＞0.05）。 见表 1。

表1 4组大鼠门静脉压力、血清及胃组织中胃泌素水平 （±s）

表1 4组大鼠门静脉压力、血清及胃组织中胃泌素水平 （±s）

注： 与 SHAM 组比较，1）P＜0.05； 与 VO 组比较，2）P＜0.05； 与 PHG 组比较，3）P＜0.05

组别 n 门静脉压力 （kPa） 血清胃泌素水平 （ng/L） 胃组织胃泌素水平 （ng/L）SHAM 组 10 1.19±0.07 13.21±2.16 17.83±2.38 VO 组 9 1.21±0.11 38.93±3.431） 39.88±2.991）PHG 组 10 1.82±0.471）2） 39.13±2.571） 41.53±3.031）PHGVO 组 9 1.79±0.511）2） 43.70±2.641）2）3） 48.63±3.041）2）3）

3 讨论

PHG是门静脉高压症的并发症之一，而高胃泌素血症是一种综合征，包括许多不同性质的疾病，可引起幽门括约肌和Oddi括约肌松弛，使胆汁、胰液反流入胃，从而损伤胃黏膜。胃泌素与迷走神经关系密切，本研究结果显示，胃迷走神经离断组 （VO组），血清及胃组织的胃泌素水平均高于对照组，可能是因为迷走神经离断后刺激血清及胃组织中胃泌素升高［8］，刺激胃酸增多造成胃黏膜的损伤。

本研究结果也显示出PHG与血清胃泌素含量有明显的相关性，即PHG组血清、胃组织胃泌素水平明显高于SHAM组，这提示通过胃泌素的水平反映出PHG的严重程度，而这种机制的产生可能与多种因素有关［9］： （1）胃泌素主要由肝脏灭活，肝功能障碍时影响胃泌素的灭活以致壁细胞泌酸增多，同时胃泌素不通过肝脏直接进入血循环，形成高胃泌素血症，PHG时胃壁细胞变性坏死，其泌酸能力以及对胃泌素的反应性受到影响，这些均可刺激胃泌素分泌增加； （2）胃泌素具有扩张血管的作用，胃泌素水平的显著升高，使大量血液从胃黏膜小动脉进入小静脉，参与并加重了PHG的形成。本研究显示PHG大鼠中血清及胃组织中胃泌素水平显著增加，提示胃泌素与PHG相辅相成的关系，并起到促进作用。

本研究显示PHGVO组大鼠，血清及胃组织中胃泌素水平均高于其他组，这说明PHG中离断胃迷走神经并不能使胃泌素水平下降或者保持不变，而使血清及组织中胃泌素水平更高，加重高胃泌素血症。这种机制可能为：PHG患者因PHG产生的门体分流使胃泌素不通过肝脏而直接进入血液循环，使胃泌素水平逐渐升高［10］，胃迷走神经切除后，胃酸含量的相对下降导致胃窦部pH值的增加，减弱了胃酸对胃窦部G细胞释放胃泌素的抑制作用并且离断抑制胃泌素分泌的神经纤维，从而加速了胃泌素的释放［11］，这两者从机制上相互影响并没有相互制约而是可能起到一种协同作用，增加了胃泌素水平的升高，通过PHGVO组血清及胃组织中胃泌素水平的测定已证实了这一点。胃迷走神经是否保留，在PHG的治疗中起到关键的作用，临床上提出保留胃迷走神经可防止胃泌素水平的升高，本研究为PHG手术术式提出崭新的思路。