冠心病患者血清Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L水平变化与冠脉病变程度的关系

2020-04-01梁善福孙运陈丰毅程帅

中国现代医药杂志 2020年2期

梁善福孙运陈丰毅程帅

冠心病（coronary heart disease，CHD）患者并发症的发生率较高，远期心血管恶性临床结局的恶化较为明显[1]。部分地区的研究发现，CHD 的发病率和致残率均呈上升趋势[2]。血清学细胞因子检测具有经济和便捷的特点，对CHD 的病情评估有一定的参考价值，有助于指导CHD 患者的整体性治疗及临床预后随访工作。血清中胱抑素C（Cys-C）能够通过诱导氧化应激性反应，加剧氧化自由基的浸润程度，进而促进心肌细胞的损伤[3]；I 型胶原羧基末端肽（ICTP）是心力衰竭相关标志物，在心肌细胞顺应性改变的过程中，其浓度可明显上升[4]；基质金属蛋白酶2（MMP2）是金属蛋白酶家族成员，能够通过诱导炎症性因子的激活，加剧对冠状动脉的损伤[5]；可溶性CD40L（sCD40L）是趋化相关因子，能够通过诱导下游趋化因子的富集，最终促进CHD的病情进展[6]。为了解血清Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 的表达及其与CHD 患者病情的关系，从而为临床CHD 的诊疗提供参考，本研究选取我院确诊的148 例CHD 患者及健康对照者为研究对象，统计分析了Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 的表达及其与冠状动脉病变的关系。

1 材料与方法

1.1 临床资料选取我院确诊的148 例CHD 患者作为CHD 组，70 例健康者作为对照组。CHD 组男80 例，女68 例，患者年龄46～79 岁，平均（63.6± 11.4）岁；其中急性心肌梗死组（AMI 组）33 例，稳定型心绞痛组（SAP 组）68 例，不稳定型心绞痛组（UAP组）47 例；冠脉造影结果：单支病变73 例，双支病变39 例，三支病变36 例；合并疾病：高血压87 例，糖尿病41 例，血脂异常57 例；吸烟49 例。对照组男38 例，女32 例，年龄44～79 岁，平均（62.0±9.8）岁，吸烟23 例。两组研究对象的年龄、性别、吸烟率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。

诊断及入选标准：①CHD 患者的诊断参考中华医学会制定的诊断标准[7]；②患者年龄≤79 岁；③经冠脉造影发现至少一支血管的狭窄程度＞50%；④对照组为体检志愿者，体检结果健康；⑤本研究符合《赫尔辛基宣言》相关医学伦理规定，经我院医学伦理委员会批准。

排除标准：①血液系统疾病患者；②恶性肿瘤；③心脏瓣膜病；④感染性疾病；⑤心肌炎、心功能（NYHA）分级≥Ⅱ级。

1.2 指标检测方法采用一次性静脉血采集器采集肘部静脉血5ml 后自然放置，取上清液体进行检测。采用贝克曼库尔特公司UniCel DxI 800 免疫发光仪器进行Cys-C、ICTP 的检测，配套试剂盒购自北京九强生物公司。

采用ELISA 法进行MMP2、sCD40L 的检测，采用十字交叉的方法进行抗原浓度的测定，采用碳酸盐缓冲液进行抗原稀释，加入96 孔的酶标板中，盖好酶标板盖后置于4℃冰箱过夜，蒸馏水冲洗3 次，每次5min，轻轻叩击酶标板甩干。每孔中加入5%的脱脂牛奶200μl，置于4℃冰箱过夜，蒸馏水冲洗3 次，每次5min，加入稀释好的抗体（购自Abcum 公司，批号：20083845，浓度1∶800），蒸馏水冲洗3 次，每次5min，每孔中加入100μl 的底物，显色后在酶标仪上进行吸光度的检测。

1.3 冠脉评分标准冠脉评分采用Gensini 法进行：①根据狭窄程度评分：狭窄程度＜25%记为1 分，25%～49%为2 分，50%～74% 为4 分，75%～90% 为8 分，91%～99%为16 分，100%为32 分；②根据病变部位评分：左主干5 分，左前降支或回旋支2.5分，左前降支中段1.5 分，左前降支远段1.0 分，左回旋支中、远段1.0 分，右冠状动脉1.0 分，小分支0.5 分。两类积分求和，即为总分。总分≤24 分为轻度狭窄，25～49 分为中度狭窄，≥50 分为重度狭窄。

1.4 统计学方法采用SPSS 21.0 软件对数据进行统计学处理，符合正态分布的计量资料采用±s表示，两组间分析采用t检验；计数资料采用χ2检验；相关性分析采用Pearson 线性相关分析法；P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 CHD 组与对照组血清Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 水平比较CHD 组患者血清Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 水平高于对照组（P<0.05），见表1。

表1 CHD 组与对照组血清Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L水平比较（±s）

sCD40L（μg/L）CHD 组 148 1.14±0.38 4.82±0.70 2.37±0.81 4.48±1.30对照组 70 0.55±0.17 3.67±0.52 1.30±0.56 2.16±0.63 t 12.405 12.235 9.976 14.153 P 0.000 0.000 0.000 0.000组别 n Cys-C（mg/L）ICTP（ng/ml）MMP2（ng/ml）

2.2 不同类型CHD 患者血清Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 水平比较SAP 组、UAP 组及AMI 组患者血清Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 水平组间呈逐渐升高的趋势，组间两两比较差异均具有统计学意义（P<0.05），见表2。

表2 不同类型CHD 患者血清Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 水平比较（±s）

sCD40L（μg/L）SAP 组 68 0.75±0.35 4.10±0.63 1.56±0.71 2.71±0.88 UAP 组 47 1.20±0.32 4.94±0.68 2.28±0.74 4.63±1.21 AMI 组 33 1.52±0.27 5.40±0.55 3.42±0.63 5.39±1.01 F 25.591 18.442 23.006 34.183 P 0.000 0.000 0.000 0.000组别 n Cys-C（mg/L）ICTP（ng/ml）MMP2（ng/ml）

2.3 不同冠脉病变支数CHD 患者血清Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 水平、Gensini 评分比较单支、双支及三支冠脉病变的CHD 患者血清Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 水平及Gensini 评分组间呈逐渐升高的趋势，组间两两比较差异均具有统计学意义（P<0.05），见表3。

表3 不同冠脉病变支数CHD 患者血清Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 水平、Gensini 评分比较（±s）

Gensini评分单支 73 0.73±0.34 3.98±0.56 1.49±0.80 2.65±0.95 9.4±3.0双支 39 1.19±0.30 4.87±0.61 2.12±0.71 4.80±1.17 20.6±5.2三支 36 1.65±0.31 5.70±0.68 3.80±0.70 5.53±0.97 35.1±8.4 F 27.118 22.304 28.002 39.186 44.880 P 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000支数 n Cys-C（mg/L）病变ICTP（ng/ml）MMP2（ng/ml）sCD40L（μg/L）

2.4 CHD 患者血清Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L水平与Gensini 评分的相关性CHD 患者血清Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 水平与Gensini 评分均呈显著正相关（P<0.05），见表4。

表4 相关性分析结果

3 讨论

冠状动脉内皮细胞损伤或者长期的炎症反应激活，能够显著促进冠状动脉内皮下平滑肌细胞痉挛，促进冠状动脉狭窄，最终导致心肌细胞的缺血缺氧性损伤[8]。流行病学统计分析发现，CHD 的发病率为0.5%～2.7%，甚至更高，在长期精神压力较大或者有不良饮食习惯的群体中，CHD 的发病率持续上升[9，10]。心脏超声虽然能够评估CHD 患者的心功能，但其对于CHD 患者冠状动脉病变或者狭窄程度并无评估价值；冠状动脉介入造影检查，能够在CHD 的病情评估过程中发挥重要作用，但冠状动脉介入造影检查的费用较高，属于创伤性检查，因此患者对其接受程度较低。血清学指标能够发挥其定量化和检测便捷的特点，在心血管系统疾病的诊疗过程中具有重要的参考价值。本研究探讨了血清Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 水平变化与CHD 患者冠状动脉狭窄评分的关系。

在Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 的相关基础领域研究中，发现Cys-C 主要参与胱抑素或者半胱氨酸的代谢平衡过程，能够通过提高下游游离氧自由基的富集程度，加剧对心肌细胞膜的侵袭；ICTP 是羧基末端结构，能够反映心肌细胞的储备功能，在心力衰竭或者心脏顺应性改变的过程中，机械性的刺激能够显著促进ICTP 的释放[11]；MMP2 是金属蛋白酶家族成员，其对心肌细胞间质成分的分解，能够促进心肌细胞的纤维化[12]；sCD40L 还能够影响补体成分及自身免疫性损伤过程，加剧CHD 患者的病情进展[13]。

通过对血清中Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L的表达分析研究可以发现，在CHD 患者血清中，Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 的水平明显上升，与对照组相比，有统计学差异，提示Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 均能够影响CHD 的病情进展，涉及多重生理病理机制，同时还涉及炎症信号通路的激活和心肌细胞的重塑性病理改变。焦云娣等[14]也认为，在CHD 患者血清中，Cys-C 的表达水平或者表达幅度明显上升，在远期心肌梗死发生率较高或者发生心力衰竭的患者中，血清Cys-C的表达水平可上升3～4 倍。急性心肌梗死组（AMI组）、稳定型心绞痛组（SAP 组）和不稳定型心绞痛组（UAP 组）中是不同类型的冠心病患者，在不同亚组患者中，可以发现SAP 组、UAP 组及AMI 组患者的血清Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 水平具有逐渐上升的趋势，提示相关细胞因子与CHD 患者的病情程度密切相关，之所以在AMI 患者中相关指标的上升幅度最高，考虑可能由于AMI 患者心肌细胞的缺血程度较为严重，心肌细胞的坏死及因此诱导的炎症反应程度较高，进而持续促进了Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 的释放[15]。Gensini 评分是评估CHD 患者冠状动脉损伤程度的指标，在血管病变数量较多或者Gensini 评分较高的患者中，Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 的表达水平可明显上升，进一步提示Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 的表达与CHD 患者冠状动脉病变的关系，临床上对于需要评估冠状动脉病变程度的患者，在冠状动脉介入造影的基础上，必要时可以通过检测Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L，进而评估CHD 的整体病情。

综上所述，在CHD 患者血清中，Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 的表达水平明显上升，同时Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 的表达与CHD 患者的病情程度及冠状动脉损伤程度密切相关。本研究的局限性在于未探讨Cys-C、ICTP、MMP2、sCD40L 与CHD 患者生存指标的关系，有待于进一步研究。