酶联免疫吸附法血清免疫性抗体检测在女性不孕症诊断中的应用价值

张宏威

（河南省南阳市第一人民医院 检验科，河南 南阳 473000）

不孕不育为生殖医学重点研究项目，相关研究显示，我国已婚夫妇中有10%～15%存在不孕不育，其中与免疫性抗体相关的占40%左右，而女性不孕占25%～36%［1-2］。目前，国内报道的多种免疫性抗体与女性不孕症密切相关［3］。本研究通过对本院100 例女性不孕症患者进行血清免疫性抗体检测，分析抗滋养层抗体（anti-trophozoite antibodies, ATAb）、 抗 精 子 抗 体 （anti-sperm antibodies,ASAb）、抗人绒毛膜促性腺激素抗体（antihuman chorionic gonadotropin antibodies,AhCGAb）、抗子宫内膜抗体（anti-endometrial antibodies,AEmAb）、抗透明带抗体（anti-zona pellucida antibodies,AZpAb）5 种血清免疫性抗体在女性不孕症的诊断价值，旨在为临床诊治女性免疫性抗体相关不孕症患者提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

经本院伦理委员会审批通过，选取本院100 例女性不孕症患者作为不孕组（2017 年2 月至2018 年12 月），年龄 23～34 岁，平均（27.68±2.29）岁；不孕时间2.5～9.0 年，平均（5.26±1.27）年；体重指数 （body mass index, BMI）：21.5～27.7 kg/m2，平均（23.43±0.95）kg/m2；月经周期 27～33 d，平均（29.39±1.08）d。另选同期健康体检女性75 例作为健康对照组，年龄22～35 岁，平均（28.13±2.57） 岁；BMI：21.8～28.1 kg/m2，平均 （23.69±0.91） kg/m2；月经周期 28～33 d，平均 （30.10±0.97）d。两组基线资料（BMI、月经周期、年龄）比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 选例标准

1.2.1 纳入 不孕组患者均为婚后夫妇同居2 年以上，未采取避孕措施而未能怀孕者，非男方原因导致的不孕；健康对照组体检结果均为正常；均无免疫疾病临床表现；所有研究对象均知晓本研究，已签署同意书。

1.2.2 排除 精神疾病患者；恶性肿瘤患者；有明确免疫性疾病表现者；血液系统疾病患者；严重心、脑、肝、肾功能障碍者；传染性疾病患者。

1.3 方法

两组均抽取晨起空腹静脉血3 mL，采用无菌试管盛装，置于医用离心机上，半径8 cm，以3 000 r/min 转速离心处理10min，取血清，置于-20℃冷藏室内待检，于采血后7 d 内完成检测，采用酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA） 法 测 定 血 清 ATAb、 ASAb、 AhCGAb、AEmAb、AZpAb 水平，酶联免疫酶标仪、相关试剂购自北京普赞生物技术有限公司，检测由专业人员严格按照试剂盒说明书进行。

1.4 诊断标准

分析血清 ATAb、ASAb、AhCGAb、AEmAb、AZpAb 在分析仪扫描 450 nm 波长的吸光度（optical density, OD），以OD＞1 为阳性判定标准，联合检测以任一结果为阳性则判定为阳性。

1.5 观察指标

① 两 组 血 清 ATAb、 ASAb、 AhCGAb、AEmAb、AZpAb 的阳性率；②血清ATAb、ASAb、AhCGAb、AEmAb、AZpAb 单独及联合检测女性不孕症的免疫性抗体阳性检出率。

1.6 统计学方法

数据处理采用SPSS 22.0 软件，计数资料以百分率（%）表示，采用χ2检验；P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组5 种血清免疫性抗体的阳性率对比

不 孕 组 血 清 ATAb、 ASAb、 AhCGAb、AEmAb、AZpAb 的阳性率均较健康对照组高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.2 免疫性抗体阳性检出率对比

血 清 ATAb、 ASAb、 AhCGAb、 AEmAb、AZpAb 联合检测女性不孕症的免疫性抗体阳性检出率（42.00%）高于各项血清免疫性抗体单独检测 （26.00%、 28.00%、 22.00%、 23.00%、21.00%），差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表1 两组5 种血清免疫性抗体的阳性率对比 例（%）

表2 免疫性抗体阳性检出率对比 （n=100）

3 讨论

目前，女性不孕症为妇科常见疾病之一，导致女性不孕症因素较多，如卵巢功能异常、内分泌紊乱、子宫生理解剖结构及功能异常等，随着临床对女性不孕症研究的深入发现，女性生殖免疫性抗体也是引起不孕的重要因素之一［4-5］。

近年来，我国女性不孕症患者人数逐渐增加，女性生殖免疫性抗体导致的不孕也越来越受临床关注。女性生殖免疫性抗体主要通过影响精子活性、受精卵着床、精卵结合、卵巢排卵、胎盘和胚胎发育等途径影响女性妊娠，影响上述生殖作用 的 抗 体 为 ATAb、 ASAb、 AhCGAb、 AEmAb、AZpAb 及抗卵巢抗体（antiovarian antibodies,AOAb）［6］。其中 ATAb 能增强吞噬细胞对配子、胚胎的毒性作用，从而导致胎盘发育障碍，是引起流产的重要原因之一。ASAb 能刺激精子发生凝集反应，降低精子活力，导致精子存活能力、穿透力受损，影响精子在女性生殖道内的运输及与卵子结合，进而影响妊娠。AhCGAb 可导致配子停止发育，或引起习惯性流产。AEmAb 可损伤子宫内膜腺体功能，从而影响受精卵着床及胚胎发育。AZpAb 可与透明带结合，从而影响精子与卵泡之间的信号传递。此外，相关研究指出，AOAb 可造成临床细胞免疫损伤，引起不孕症患者雌激素水平降低，影响卵泡正常发育，致使患者排卵数、排卵率明显降低，从而导致不孕，但其在女性不孕症患者中的阳性率仅为6.11%，占比较低［7］。因此，本研究未对血清AOAb 在女性不孕症诊断方面的价值进行探讨。本研究结果中，不孕组血清ATAb、ASAb、AhCGAb、AEmAb、AZpAb 的阳性率均显著高于健康对照组（P＜0.05），与相关研究［8］结果一致，且5 种血清免疫性抗体联合检测女性不孕症的阳性检出率显著高于各项血清免疫性抗体单独检测（P＜0.05）。可见，免疫性抗体是导致女性不孕症的重要原因之一，联合检测女性不 孕 症 患 者 血 清 ATAb、 ASAb、 AhCGAb、AEmAb、AZpAb，能显著提高免疫性抗体阳性检出率。

综上可知，免疫性抗体是导致女性不孕症的重要原因之一，采用血清ATAb、ASAb、AhCGAb、AEmAb、AZpAb 联合检测女性不孕症患者，能显著提高免疫性抗体阳性检出率，可为临床诊治女性不孕症提供指导，具有较高应用价值。