ERCC1蛋白表达在胃癌患者病理诊断中的应用效果研究

2020-03-11福建医科大学附属泉州市第一医院病理科福建泉州362000

吉林医学 2020年3期

陈婷 (福建医科大学附属泉州市第一医院病理科，福建泉州 362000)

胃癌是源于胃黏膜上皮的恶性肿瘤，在我国各种恶性肿瘤中发病率居首位，好发于50岁以上人群中，且男性发病率略高于女性[1]。胃癌病因复杂，普遍认为与饮食结构改变、工作压力增加及幽门螺杆菌感染等有关，且半数患者发生在胃窦部、胃大弯等[2]。胃癌患者发病早期临床症状缺乏典型性，部分患者可伴有上腹不适、嗳气等，多数患者确诊时已经是中期、晚期，错过了最佳诊疗时机。ERCC1蛋白是一种高度保守的DNA核酸内切酶，是核苷酸切除修复过程中的关键核心部件之一，但是在胃癌患者病理诊断中的应用研究较少[3]。因此，本文采用随机对照方法进行研究，探讨ERCC1蛋白在胃癌患者病理诊断中的应用效果，现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料：选择2015年6月～2018年4月治疗的胃癌患者60例作为对象，设为观察组，术中取病灶组织与癌旁组织(距离病灶距离>5 mm)，男34例，女26例，年龄39～73岁，平均(56.81±4.69)岁；肿瘤大小1～9 cm，平均(4.51±0.74)cm；分化程度：高分化23例，中分化20例，低分化17例；肿瘤分期：Ⅰ～Ⅱ期35例，Ⅲ～Ⅳ期25例；淋巴结转移：是16例，否44例。选择正常胃部组织34例，设为对照组，男19例，女15例，年龄40～74岁，平均(57.22±4.84)岁。两组临床资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法：采用免疫组织化学法测定不同组织中ERCC1蛋白阳性率。①检测方法：分别取观察组病灶组织、癌旁组织及对照组组织，加入蒸馏水与浓度为30.0%H2O2，常温下加入内源性酶并进行10 min灭火，PBS连续进行3次洗涤。将最终获得的切片放置在0.01M枸橼酸盐缓冲液中，加入生理盐水控制溶液pH最终为6。电炉加热直到煮沸，5 min间隔后再次煮沸，常温下冷却。采用PBS2次洗涤，每次5 min，最后加入5%BSA封闭液并加入加入兔抗人ERCC1蛋白抗体(1∶100)，兔抗人ERCC1蛋白一抗，一滴。滴加完毕后进行3次PBS洗涤；在1 ml底物中加入兔抗人ERCC1蛋白二抗一滴，混合后常温下显色，苏木素复染后封片，倒置显微镜下观察细胞数量，每份标本测定三次，取平均值[4]；②判断方法：参考奥尔雷德评分标准分别从细胞的阳性数量(阳性细胞数≤25.0%0分，26%～50.0%1分，51%～75%2分，>75%3分)、染色强度(不着色0分，黄色1分，棕黄色2分，黄褐色3分)完成免疫组化染色评分，总分16分，阳性率越高。ERCC1蛋白在不同病理中的表达：统计并记录观察组年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤分期、分化程度、淋巴结转移等资料，分析ERCC1蛋白在不同胃癌患者病理中的表达[5]。

2 结果

2.1两组ERCC1蛋白阳性率比较:观察组癌旁组织与对照组ERCC1蛋白阳性率差异无统计学意义(P>0.05)；观察组病灶组织ERCC1蛋白阳性率，均高于癌旁组织及对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1及图1。

2.2ERCC1蛋白在不同病理中的表达：观察组胃癌组织中ERCC1蛋白阳性率与性别、年龄差异无统计学意义(P>0.05)；观察组胃癌组织中ERCC1蛋白阳性率与肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分期及分化程度，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表1 两组ERCC1蛋白阳性率比较[例(%)]

注：与对照组比较，①P<0.05；与癌旁组织比较，②P<0.05

注：A图为胃癌组织免疫组化结果；B图为癌旁组织免疫组化结果；C图为对照组免疫组化结果。图1 两组不同病灶组织中ERCC1蛋白阳性率(×200)

3 讨论

胃癌是全球范围常见的恶性肿瘤之一，是引起肿瘤相关死亡的第二大原因。近年来，随着医疗技术的不断发展，胃癌的诊断、治疗获得了长足的进步，但是远期效果较差，多数患者确诊时已经是中期、晚期，错过最佳治疗时机[6]。临床研究表明：核苷酸切除修复(NER)途径是修复DNA损伤的途径之一，而切除修复较差互补基因1(ERCC1)则是该途径重要分子之一。从大的角度来说，ERCC1蛋白位于染色体19q13-2中，含有10个外显子，该蛋白单独存在时并不稳定，能识别、切除损伤DNA链5'端作用。同时，ERCC1亦可参与双链断裂修复途径修复链间交联。国内学者研究表明：ERCC1在修复损伤DNA、维持遗传信息完整性中发挥了重要的作用。而在恶性肿瘤中ERCC1表达水平能反映肿瘤内DNA损伤修复能力。本研究中，观察组病灶组织ERCC1蛋白阳性率，均高于癌旁组织及对照组(P<0.05)；观察组胃癌组织中ERCC1蛋白阳性率与肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分期及分化程度具有统计学意义(P<0.05)，说明ERCC1蛋白在胃癌组织中呈高表达，能参与疾病的发生、发展，加强ERCC1蛋白测定能为临床病理诊断提供依据和参考。