结核感染T淋巴细胞γ-干扰素释放试验（TB-IGRAs）的临床研究进展

陈 华

（广西中医药大学附属瑞康医院，广西 南宁 530011）

γ-干扰素体外释放（TB-IGRA）定量实验，主要是经过检测特异性IFN-γ释放诊断结核病，判断机体是否感染结核分歧杆菌的体外诊断方式[1]。基本原理在于，受检对象采集全血后，加入结核分歧杆菌特有的T细胞抗原刺激，在37℃体外培养16-24h后，检测T细胞产生的IFN-γ的情况[2]。如果T细胞由于结核分歧杆菌特异抗原的刺激，从而提高IFN-γ产量，并达到一定阀值，可认为患者感染了结核分歧杆菌[3]。虽然目前TB-IGRAS检测试验不能区分活动性结核或潜伏性结核，仍无法预测潜伏性结核发展，是否为活动性结核风险，但阳性情况对可用于结核感染的诊断，阴性结果用于排除结核杆菌感染，具有重要意义。本文综述TBIGRAS检测情况，从而分析对致病性结核分枝杆菌潜在感染进行诊断。

1 早期结核病诊断

当前国内结核病的主要诊断方式在于常规细菌学检查和结核菌素皮试，常规细菌学检查检出率低、检测周期长。而皮试无法区分卡介苗（BCG）接种出现的免疫应答反应，与致病性结核分歧杆菌感染产生的反应，造成结核病在诊断上较为困难。结核分歧感染患者后，会出现抗原特异性致敏T细胞，在出现结核分歧杆菌抗原刺激后，会造成T细胞活化繁殖，有效释放出γ-干扰素。李小月[4]等学者在研究中指出，肺结核组、肺外结核组、非结核组中γ-干扰素释放试验阳性率分别为86.4%、61.1%和30.4%，抗结核抗体检测试验阳性率分别为59.1%、27.8%和31.4%，γ-干扰素释放试验有较高的灵敏度，尤其有利于肺外结核的早期诊断。

2 TB-IGRA原理

TB-IGRA原理是以RD1编码的结核特异性抗原，能够刺激检测机体内的致敏T淋巴细胞，从而释放干扰素[5]。与皮试实验的结果不同，这类蛋白在结核分歧杆菌及致病性牛分枝杆菌中特异表达，在卡介苗和大多数非结核分枝杆菌中不表达。可看出TB-IGRA检测结核分枝杆菌具有较高的敏感度和特异性。目前国外发达国家已经开始广泛使用新的结核病实验室诊断方法，γ-干扰素体外释放对于结核分歧杆菌感染，尤其是潜伏感染的诊断具有较强的特异性。γ-干扰素体外释放，主要经过特异性抗原刺激血液淋巴细胞，从而检测细胞因子，诊断结核病的敏感度与特异性可高达90%以上。

3 TB-IGRA的优势

TB-IGRA对结核分歧杆菌诊断具有一定意义，其中IGRA所用刺激抗原为原有结核分歧杆菌特有抗原，而非结核分歧杆菌提取物，特异性高[6]。且在诊断期间，不会受到BCG接种与非结核分歧杆菌的干扰，同时不会受到结核病症状的其他致病菌的影响。其次IGRA灵敏度较高，会对细菌学检查阳性结核病患者检出率较高，对菌阴及其他结核病患者，也有较高的检出率，而菌阴极其他结核病患者是诊断期间的难点[7]。

4 IGRA在LTBI在诊断中的应用

4.1 人口流行基线调查中的应用

在全国结核病流行病学调查期间，在部分国家鉴别与诊断、预防高风险患者发展成为活动性结核病，已经成为有效、成熟的结核病控制策略[8]。在发达国家，结核病发病率已经下降到较低的水平，治疗LTBI是结合病控制的一个重要组成部分，因为部分人群代表一个较大的可能，发展成为活动性结核病储存。但在多个结核病高负担国家中，预防性治疗并不被临床推荐。在我国，预防性治疗LTBI仅限于密切接触肺结核患者，或其他需要使用免疫抑制剂的患者。在结核并高负担国家中，有反复暴露的结核分歧杆菌感染，部分患者重复暴露与在此感染。姜慧英[9]等学者在尘肺病合并结核早期诊断中，就指出尘肺病γ-干扰素释放试验的阳性率为33.73%，非尘肺病为23.64%，γ-干扰素释放试验在尘肺病合并结核的早期诊断中具有重要的辅助诊断价值。

4.2 在集团感染筛查中的应用

集团感染是由于结核病传染源的存在，使得一个集团中接触者感染人数超过正常分布。集团感染描述的是结合病爆发的基本属性，更加侧重于感染者[10]。其特点主要在于：具有已知同一显性传染源属性，传播关系较为明显，接触群体经历了暴露与感染，是发病的窗口期。在实施卡介苗接种后，集团感染中会混杂大量既往接种者与既往感染者，因此需要将二者区分，提高工作效率[11]。

4.3 在儿童结核病辅助诊断中的应用

目前儿童结核病在临床症状中并不明显，重症及肺外结合的患者较高，肺结核患者的细菌载量低，咳嗽与气管纤毛运动能力较差，情愿学检查阳性率较低，使得儿童结核病诊断较难。PPD试验是目前儿童结核病诊断的常规方法，但会与卡介苗菌株与非结合分歧杆菌产生较差反应，使得假阳性较高[12]。但由于儿童免疫系统并不完善，会造成其出现假阴性的情况。赵磊[13]等学者在研究中指出，采用γ-干扰素释放试验检测60例临床确诊肺结核病患儿为病例组和60名健康儿童为对照组，IFN-γ试验对于儿童肺结核的检验方法特异性高于PPD试验。

4.4 在HIV-AIDS病人合并结核诊疗中的应用

人类免疫缺陷病毒获得性免疫缺陷综合征（HIVAIDS）患者受到HIV影响，整体免疫功能会出现破坏，伴发多种机会性感染疾病。结核病是HIV-AIDS患者常见感染，结核病与HIV-AIDS是相互促进病变进展、恶化，会直接导致患者出现死亡[14]。HIV-AIDS患者LTBI进展为结核病的风险较HIV阴性者增加，HIV感染会使得Thl分泌水平下降，AIDS患者在感染结核时的杀菌作用及对结核分枝杆菌的清除作用下降，使得结核分枝杆菌播散，从而加速结核菌感染发展成为活动性结核病进度，造成临床诊断和治疗出现困难[15]。

5 小 结

在2014年中华医学会结核病学分会，通过我国的数据就发布了专家建议，IGRA具有较高的敏感度与特异性，但其仍无法用于确诊或排除活动性结核病，对于缺少细菌学诊断依据的活动性结核病，能够起到补充或辅助诊断的作用，其阴性预测价值较高，在排除诊断期间起到了良好的重要。因此TB-IGRAS检测方法具有很好的早期诊断价值，其敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及准确度均较高，值得临床推广应用。