超高效液相色谱法在卫生检验中的应用

徐修臻，管梓宁*

（1.青岛市黄岛区疾病预防控制中心，山东 青岛 266499；2.黄岛区第三人民医院，山东 青岛 266499）

现如今科技日新月异，各种分离检测手段层出不穷，2014年美国WATERS公司推出了世界上第一台超高效液相色谱仪[1]，其借助高效液相色谱的理论及原理，涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术[2]，成为物质分离分析的一个新领域，并在近些年得到了快速的发展。目前国标方法中尚无超高效液相色谱的检测方法，为更好的运用此法来开展工作，本文对超高效液相色谱在各领域的应用作简要概述。

1 在食品分析中的应用

随着食品工业的快速发展，食品添加剂品种不断增加。在2007年我国发布的GB2760《食品添加剂使用卫生标准》中，允许使用的食品添加剂有22类，近2000种；在现代食品加工中常用的食品添加剂有防腐剂、甜味剂、合成色素、咖啡因等，而有些不法商家会在生产中使用过量的食品添加剂，对人体健康造成危害，这就需要有更可靠的技术手段来检测。如凌云等[3]建立超高效液相色谱法，对14种化学添加剂进行测量，定量限在0.01-0.6mg/Kg；董桂贤等[4]采用超高效液相色谱法同时测定酱腌菜中的7种防腐剂与2种甜味剂，检出限为0.2-1.0 mg/Kg，定量限为0.5-4.0 mg/Kg；刘泰然等[5]建立了超高效液相色谱法来同时测定17种食品添加剂，检出限为0.00070-0.0074 mg/Kg，定量限为0.0024-0.043 mg/Kg；黄永辉等[6]建立了超高效液相色谱法同时测定碳酸饮料中22种添加剂，其检出限为0.02-0.50mg/Kg；肖立群[7]研究了超高效色谱同时测定种面制品中防霉剂和多种防腐剂；王希希[8]等建立了凝胶色谱-超高效液相色谱法同时测定20种常见非食用色素；涂小柯等[9]建立了同时测定茶叶中儿茶素、酚酸及生物碱含量的超高效液相色谱分析方法；石伟杰等[19]建立了固相萃取-超高效液相色谱法测定茶叶中柠檬黄、新红、苋菜红、胭脂红、日落黄和亮蓝等6种着色剂，检出限为0.1～1.0mg/kg，定量限为0.3～3.0mg/kg；杨晓倩等[10]建立了同时测定肉制品中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄和诱惑红等5种合成着色剂含量的固相萃取-超高效液相色谱法，振荡超声提取肉制品中的着色剂，检出限为0.05～0.20 mg/kg，最低定量限为0.15～0.60 mg/kg；云环等[11]建立了固相萃取-超高效液相色谱同时测定乳制品中苹果酸、酒石酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、富马酸等6种有机酸的分析方法；钟慈平[12]建立的固相萃取-超高效液相色谱法可同时检测食品中直接红Ⅱ、直接红28、红2G、苋菜红、胭脂红、日落黄、赤藓红等染料；曾永芳等[13]建立了固相萃取-超高效液相色谱法同时测定葡萄酒中的12种合成色素，检出限为0.05 mg/L～0.15 mg/L。

黄曲霉毒素是一类结构相似、有较强毒性和致癌性的化合物,付朝辉等[14]建立了同时测定发酵茶叶中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的超高效液相色谱法，其检出限为0.32ug/Kg(B1、G1)，0.18ug/Kg(B2、G2)； 氟喹诺酮类药物 (Fluoroquinolone, FQs) 是一类十分重要的人工合成抗菌药物，被广泛应用于水产养殖业中，金高娃等[15]建立了超高效液相色谱法测定水产品中的诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星三种喹诺酮药物残留，其检出限为0.1ug/Kg，定量下限为0.3ug/Kg；维生素是维持人类生命活动必须的有机化合物，蒲明清等[16]建立了高效液相色谱法同时测定保健食品中的多种水溶性维生素；喹乙醇是一种抗菌促生长剂，广泛应用于养殖业，对禽和鱼类，有中度至明显蓄积毒性，刘淳[30]建立了测定猪肉中喹乙醇残留量的超高效液相色谱法，检出限为0.015μg/g。

经以上所述超高效液相色谱法在食品分析中的广泛应用，发现该法简便、快速，其准确度和灵敏度高，且检出限低，对于制定食品中添加剂的加入标准可提供更精确的数据，同时在保障人类健康问题上也提供了更可靠的依据（超高效液相色谱法在食品检验中的应用见表1）。

2 在环境及其他领域中的应用

随着社会经济的发展，我国的环境问题日益严重,采用准确、快速的方法来检测有毒有害物质的含量尤为重要。苯并芘是致癌性最强的多环芳烃，张少君等[17]建立了固相萃取-超高效液相色谱法测定水中痕量苯并(a)芘的方法；加氯消毒剂是主要的饮用水消毒技术，消毒副产物因其环境毒性及潜在的致癌性引起人民的密切关注，刘艳等[18]建立了固相萃取/超高效液相色谱法测定饮用水中9种痕量卤乙酸的分析方法；王昭申等[19]采用反相超高效色谱法测定生活饮用水中的溴氰菊酯，最低检出质量为0.05ug，最低检出浓度为0.02ug/L；环境内分泌干扰物烷基酚中以壬基酚、辛基酚为代表，毒性大且不易降解，张钰等[20]建立了饮用水中壬基酚、辛基酚的分析方法，检出限为0.005-0.020ug/L；王晓楠等[21]建立了固相萃取-超高效色谱法测定水中速灭威、异丙威、乙霉威及仲丁威的分析方法，检出限为0.049-1.600ug/L；赵志红等[22]建立了超高效液相色谱法快速、灵敏检测水中苯酚的方法；俞涛等[23]建立了同时测定饮用水中苯酚、间甲酚、3,4-二甲酚、2,5-二甲酚的超高效液相色谱方法，样品直接过滤测定；潘亚娟等[24]建立了工作场所中丙烯酰胺的超高效液相色谱法测定法，检出限为0.02ug/ml；王点点[41]等利用UPLC建立了能够同时测定水和土壤中噻虫啉、氟虫双酰胺及其代谢产物的快速分析方法；赵宽[25]等建立了利用超高效液相色谱法测定土壤中柠檬酸、草酸、苹果酸、酒石酸和丁二酸的分析方法,检测限为0.05-0.18 mg / kg，并测定了不同土壤样品中的有机酸含量。

还可以将超高效液相色谱应用于其他领域。如谢强胜等[26]将UPLC应用于药品领域，测定了唐解胶囊中盐酸苯乙双胍、罗格列酮和格列本脲含量；区洁雯[27]等应用超高效液相色谱测定了复方氟嗪酸鼻喷剂中氧氟沙星、盐酸萘甲唑啉和马来酸氯苯那敏的含量；李伟亮[28]基于超高效液相色谱测定了化妆品中6种防腐剂的含量，有利于对化妆品中防腐剂的含量进行控制；张斌[29]等利用超高效液相色谱测定了化妆品中7种美白成分的含量，检出限为0.39-4.33mg/kg；杨培[30]等建立了应用超高效液相色谱测定牙膏中丹皮酚、麝香草酚、和厚朴酚、厚朴酚、甘草次酸5种植物源活性成分的方法等。

超高效液相色谱在环境及其他领域中有着广阔的应用前景，能够在短时间内检测出有毒有害物质的含量，并为决策及标准的制定提供依据。

3 结 语

目前，超高效液相色谱法（UPLC）在卫生检验领域有着广泛的应用，相比于液相色谱技术，它具有更高的分辨率、灵敏度、分离度和更快的分析速度，而且在一定程度上减少了溶剂的用量。超高效液相色谱具有新型固定相填充剂和超高柱效，可以满足各种高通量分析的要求。随着科学技术的进一步发展，超高效液相色谱一定会在食品、环境和其他领域发挥出更大的作用。