A型猪塞内卡病毒流行病学、致病性、诊断研究进展

刘 存，刘 畅，刘 琪，王 静，李秀博，崔尚金，梁 琳

（1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 海淀 100193；2.农业部兽用药物与兽医生物技术北京科学观测实验站，北京 海淀 100193）

A型塞内卡病毒（Senecavirus A,SVA）又称为塞内卡山谷病毒（Seneca Valley virus,SVV）是单股正链RNA病毒，属小RNA病毒科塞内卡病毒属。该病毒能够感染仔猪及母猪并造成仔猪死亡，其对养猪业的生产和经济效益具有重大的潜在威胁。2002年，在美国马里兰州盖瑟斯堡，从PER.C6细胞系中首次分离出SVA，该分离株被命名为SVV-001[1]。之后的研究发现，SVV-001是一种有效地抗神经内分泌源性肿瘤的溶瘤病毒，这成为了学者关注点[2-4]。SVA自1988年即在美国的猪群中流行，但是加拿大和美国分别在2007年和2012年报道了塞内卡病毒相关的猪水疱病病例[5-7]。2014年之前，可能因其低感染率而未得到广泛研究，在此期间SVA的分子特征与其在猪群中的流行、传播以及对猪的致病性等的相关研究鲜有报道。然而，自2014年底以来，SVA在北美以外国家或地区猪群中暴发，同时北美地区也出现了新的病例，SVA感染的新生仔猪表现出了新的临床症状[8-16]。目前，美国、加拿大、巴西、泰国、中国、哥伦比亚等国家猪群中检测出SVA。SVA是感染猪的一种新病毒，其所致的临床症状与其他致水疱病的疾病相似，影响猪的生产及仔猪的存活率，对养猪业存在重大的潜在威胁。为了进一步了解SVA的病原学特征和感染猪致病特性，本文就SVA的流行病学、致病性、诊断方法等方面进行综述。

1 SVA的发现和流行

SVA最初是于2002年在美国的马里兰州盖瑟斯堡，由Neotropix公司实验室作为PER.C6细胞系的污染物分离得到的，已确实该病毒是通过被污染的牛血清或者猪胰酶被引入其他细胞系中的[1]。首株SVA分离毒株被命名为SVV-001。最初研究发现，SVV-001对人和动物没有致病性，也无证据表明其与任何有害的疾病有关系[2]。然而，加拿大和美国分别在2007年和2012年报道的猪水疱病病例提供了塞内卡病毒可能与猪水疱病有关的证据[5，7]。

在2002年于美国首次发现并分离得到第一株SVA毒株。2014年以前，猪特发性水疱病的报道较少。2004年，美国印第安纳州发生猪水疱病，排除了外来动物疫病病原的感染，但其病因未明确[17]。2014年底以来，猪水疱病在巴西不同地区的断奶仔猪和成年猪上暴发，且据统计，1～4日龄的新生仔猪死亡率升高[18-19]。巴西动物卫生进行的官方检测排除了口蹄疫病毒、猪瘟病毒和猪流行性腹泻病毒等动物疫病病原的感染，但由其他研究组从不同地区的发病猪中检测出了SVA[17]。巴西一项10年（2007—2016）猪血清学回顾性研究表明，在2014年之前SVA并未在巴西猪群循环，而美国一项20年猪血清学回顾性研究表明，SVA在美国猪群中广泛分布且一直在猪群中循环[5]。自2015年初，SVA相关的水疱病暴发增多，且发现SVA感染与新生仔猪的死亡率升高有关，特别是在母猪发生过水疱病的猪场[8-21]。2016年，加拿大、泰国、哥伦比亚的猪场受到了SVA感染的影响。

我国在2015年，首次从广东地区发生猪特发性水疱病的猪场检测到SVA，感染母猪发生水疱症状，感染仔猪出现急性死亡[11]。自2015年以来，SVA已在我国广东、福建、河南、湖北等地区检测出SVA。

由于自2015年初以来，关于SVA感染所致猪水疱病报道显著增多，SVA的许多特征也得到了鉴定，因此2015年被认为是SVA感染流行病学的转折点。SVA感染所致疾病的发病率和死亡率在不同种猪上存在差异。在首次感染的猪场，依据猪的日龄和临床症状，发病率介于4%～70%之间。断奶仔猪发病率在0.5%～5%间，肥育猪发病率在5%～30%间，不同的地区间存在差异，母猪发病率高，可达70%～90%[9，18，22]。然而，这些感染猪的死亡率很低，约为0.2%，且恢复较快，临床症状持续10～15 d[11]。对于新生仔猪，尤其是1～4日龄的新生仔猪发病率可达70%，死亡率在15%～30%之间[22]。目前尚无感染SVA的猪场再次暴发猪水疱病的报道。在传播媒介上，据Joshi等调查，鼠、苍蝇等均检测到了SVA，其可能在SVA传播中起重要作用[23]。发病猪通过口、鼻、粪便排毒。尿液也可能是排毒的途径，带有病毒的尿液成为猪场重要传染源[24]。易感动物与带有水疱或水疱破裂发病猪的直接接触可能是SVA重要的传播途径之一。SVA是否能够垂直传播尚需进一步的研究。

2 SVA的分子生物学特性

分离之初，认为SVV-001与心病毒属成员相似，但是经过进一步的深入分析，根据病毒特征和复制模式将其列入小RNA病毒科并将其归入新的病毒属—塞内卡病毒属。目前，该属仅有代表种一个成员。

SVA具有典型的小RNA病毒的L434结构基因组。基因组大小约7 200 nt，包括Vpg、666 bp 5'UTR、编码2180氨基酸的ORF、71 bp 3'UTR和Poly(A)Trailer。其5'UTR区域具有复杂二级结构，而其406～625 bp区域丙型肝炎病毒的同源性达57.3%，这表明SVA核糖体结合位点为Ⅳ型[25]。SVA病毒基因组特征与心病毒属的非常相似，尤其是P1、2C、3C、3D，其2B、3A、核糖体结合位点类型与心病毒属的不同。然而，SVA的2A、2B、3A、3B与其他小RNA病毒的2A、2B、3A、3B存在明显差异[5]。

3 SVA的致病性

目前，仅有少数关于SVA试验性感染猪的研究。临床上SVA感染猪表现的临床症状主要为肌肉无力、嗜睡、跛足、腹泻，在鼻部和蹄部冠状带出现充满液体的水疱，破溃后形成溃疡（图1）。Joshi等和Montiel等分别用当前SVA分离株感染9和16周龄的猪复制了SVA感染猪所致疾病[24，26]。在SVA致病性研究中，感染猪出现嗜睡、跛足和厌食等症状，在鼻部、唇部、蹄部冠状带及趾间出现水疱。SVA潜伏期为4～5 d；急性感染期，扁桃体是SVA复制的主要位置；病毒血症约持续7 d，在第3天血液中病毒达到高峰。

4 SVA的检测方法

目前，已有多种方法应用于SVA的检测，包括PCR方法、血清学方法、分子杂交技术等。PCR方法中普通PCR和荧光定量RT-PCR（qRT-PCR）均可有效地检测SVA。qRT-PCR快速、灵敏度高、特异性强，应用于SVA的快速检测、排毒检测及病毒载量检测中[26]。分子杂交技术中RNA原位杂交技术已经应用于SVA的快速检测当中。RNA原位杂交是利用杂交探针识别、靶向经固定、包埋和制片的组织样品中的SVA特异性序列，通过杂交信号判定SVA的有无。血清学方法中包括间接ELISA、竞争ELISA、间接免疫荧光和病毒中和试验等方法[27-30]。血清学的方法适于大规模的流行病学研究或监测。

5 展望

SVA为小RNA病毒科成员，感染猪所表现的临床症状与口蹄疫病毒、猪水疱病病毒、猪水疱疹病毒所致症状非常相似，需进行鉴别诊断。快速鉴别诊断对快速控制疫情、制定防控措施具有重要意义。SVA危害虽不及口蹄疫病毒，但其感染仔猪导致仔猪死亡率升高，造成经济损失，给养猪业高效绿色健康发展带来了新的挑战。SVA已在我国多个省份猪场检测到，一方面需要对SVA进行回顾性研究，对其进行溯源；另一方面需要对其流行病学、免疫、快速诊断技术以及遗传变异机制进行深入研究，以为制定SVA防控方案提供理论依据。