东莞地区汉族冠心病患者CYP2C19基因多态性分布特征分析

阮富旺,杨万勇,陈小珑,刘伟畴

广东省东莞市光华医院医学检验中心,广东东莞 523416

冠心病作为临床常见的慢性疾病,主要的发病原因为冠状动脉粥样硬化导致血管腔狭窄或阻塞[1-2]。我国冠心病的发病率呈现不断上升的趋势[3]。有研究表明,通过采取相关的预防措施可有效降低冠心病的病死率[4]。临床上通常采用氯吡格雷联合阿司匹林来预防冠心病导致的心血管事件，但仍有部分患者在给予常规的治疗剂量后出现了心肌缺血情况。CYP2C19作为人体主要的细胞色素CYP450药物代谢酶之一,主要存在于肝微粒体中[5]。CYP2C19基因突变可导致人体相关酶的活性发生改变,影响相关药物的代谢过程,导致冠心病患者出现心血管事件[6-7]。笔者发现对于东莞地区汉族人群冠心病患者的CYP2C19基因多态性的研究较少,基于此,笔者结合自身临床实践，选取本院收治的800例东莞本地汉族冠心病患者作为研究对象,对患者全血标本CYP2C19基因多态性分布情况进行检测,并对CYP2C19基因多态性分布患者年龄、性别的关系进行探讨,为临床冠心病的合理用药提供相关的理论依据，现将研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2016年9月至2019年1月本院收治的800例冠心病患者作为研究对象,其中男514例，女286例；年龄<65岁者343例，年龄≥65岁者457例。所有患者均为东莞市常住居民,民族均为汉族,患者之间无直系亲属关系；无家族遗传病史；排除患有恶性肿瘤、心功能严重不全、急性慢性肝肾疾病患者。

1.2仪器与试剂 DNA提取试剂、Expure-20全自动核酸提取仪均购自深圳汇研科创生物科技有限公司，CYP2C19基因分型检测试剂盒(生产商:武汉友芝友医疗科技股份有限公司)、SLAN-96P实时荧光定量PCR仪(生产商:上海宏石医疗科技有限公司)。

1.3方法 取EDTA抗凝的患者空腹静脉血2 mL,采用Expure-20核酸提取仪对血液中的DNA进行提取、纯化。将配制好的CYP2C19 PCR反应液(636C、636A、681G、681A)依次加入0.2 mL的八联管中,每管23 μL，并做好相关标记。随后将待测标本的基因组DNA、阳性对照、阴性对照各2 μL 加入4种反应液中。随后采用SLAN-96P实时荧光定量PCR仪进行PCR扩增。根据每分标本反应孔的荧光曲线判断患者CYP2C19的基因型。

1.4观察指标 观察CYP2C19在患者中不同表型的分布情况、对CYP2C19等位基因频率分布情况进行记录,对不同性别、不同年龄CYP2C19基因型频率分布进行记录。

1.5统计学处理 使用SPSS22.0软件进行统计学分析,计数资料采用例数或百分率表示,组间比较采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1CYP2C19在患者中的基因多态性分布情况比较 CYP2C19基因型中,快代谢型*1/*1出现频率为38.50%，中代谢型*1/*2出现频率为40.00%，*1/*3出现频率为6.38%，慢代谢型*2/*2、*2/*3、*3/*3出现频率分别为11.75%、3.00%和0.37%。见表1。

表1 CYP2C19在患者中的基因多态性分布情况比较[n(%)]

2.2CYP2C19等位基因分布情况比较 在CYP2C19的3种等位基因中,CYP2C19*1占61.69%，CYP2C19*2占33.25%，CYP2C19*3占5.06%。

2.3CYP2C19在不同年龄、性别冠心病患者中基因多态性分布情况比较 不同性别、年龄患者CYP2C19各基因多态性分布虽存在一定的差异,但差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 CYP2C19在不同年龄、性别冠心病患者中基因多态性分布情况比较[n(%)]

3 讨 论

据报道,在西方国家中,冠心病是主要的致死原因之一[8]。由既往数据得知,我国冠心病的发病率低于西方国家,但现阶段发病率逐年增加,目前我国患有冠心病的患者约为1 000万,且呈现年轻化趋势[9]。氯吡格雷、阿司匹林是临床上用于治疗冠心病的常用药物,它们经过小肠的吸收与肝脏中CYP2C19酶的氧化水解转化为相关产物，从而起到抗血小板凝聚的作用[10-12]。CYP2C19基因野生型为CYP2C19*1/*1,其自身的编码酶具有完全活性；CYP2C19*2与CYP2C19*3是亚洲人群主要的缺失型。CYP2C19*2基因型的出现源于外显子5的681位点碱基缺失,导致蛋白未能发生剪切,最终造成蛋白失活且血红素结合区丧失了催化活性。CYP2C19*3则是源于外显子4的636位点的碱基发生突变,使CYP2C19酶的活性被破坏[13-14]。所以,对于长期服药的冠心病患者,对CYP2C19代谢情况进行检测可获知人体相关药物的代谢情况,对临床中患者的用药有一定的帮助意义。

本研究结果表明，CYP2C19基因中,*1/*1型别的频率为38.50%，*1/*2为40.00%，*1/*3为6.38%，*2/*2为11.75%，*2/*3为3.00%，*3/*3为0.37%；其中快代谢型38.50%，中代谢型46.38%，慢代谢型15.12%；等位基因分布中CYP2C19*1占61.69%，CYP2C19*2占33.25%，CYP2C19*3占5.06%；根据患者的年龄与性别进行分组，结果发现不同年龄、性别患者CYP2C19基因型间差异无统计学意义(P>0.05)。该结果与中国其他地区汉族冠心病患者人群的研究结果基本一致[15-16]。CYP2C19快代谢型患者其自身药物代谢较快,不良反应发生情况相对较少,慢代谢型患者药物代谢通常较慢,药物容易在体内蓄积导致不良反应的发生[17]。所以,进行临床用药时，代谢快的患者可适当加大药物剂量,达到维持适当血药浓度的目的,慢代谢型患者需要适当地减少药物剂量或是更换药物,避免因药物的沉积造成不良反应；而中代谢型患者大多只需常规药物就可维持治疗效果。本文中东莞地区的汉族冠心病患者快代谢型与中代谢型占比较多,临床需根据患者的自身情况进行合理用药。国内对CYP2C19基因多态性与年龄、性别的研究有类似的报道,与本文研究结果也基本一致[18]。本文中根据患者年龄<65岁和≥65岁进行分类,该划分较为宽泛,后续研究还需进行更加详细的年龄划分,以确定不同年龄段冠心病患者CYP2C19基因型情况。

药物基因检测在个体化用药的过程中占据非常重要的地位。在药物的基因组学中,药物的效应与安全性是主要的研究目标,通过对药物在体内代谢过程的差异与基因特性，以及基因变异导致不同患者服用药物的不同反应进行研究,可对药物的合理使用提供相应的指导意见。以往临床用药往往采用千人一药、千人一量的模式,CYP2C19多态性的研究可有助于帮助转变该模式,使因人用药、量体裁衣的模式变为可能。因此掌握不同地区人群基因多态性的分布情况对临床用药来说意义非凡。

本文对我国广东东莞地区汉族冠心病人群CYP2C19基因多态性进行了相关的研究分析,且研究的样本量较大。分析证实CYP2C19基因的多态性与我国其他地区的表现差异不大,不同年龄、性别患者CYP2C19基因型间差异无统计学意义(P>0.05)。但其多态性依旧存在一定的差别,临床中对于冠心病患者的用药需要根据患者CYP2C19基因型的代谢情况进行调整,防止因药物代谢过快造成治疗效果减弱,或是药物代谢过慢导致药物在体内蓄积引发不良反应。