苗药大果木姜子挥发油对幽门螺杆菌的体外抑菌实验研究

吴碧清 吴贤倩 陈丽玄 鲍杰 王平

【摘 要】 目的：研究大果木姜子挥发油对幽门螺杆菌的体外抑菌作用。方法：采用水蒸气蒸馏法提取大果木姜子挥发油，以幽门螺杆菌国际标准菌株ATCC26695为实验菌株，采用纸片法测定抑菌圈大小，倍比稀释法测定最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。结果：大果木姜子挥发油得油率为6.4%，不同稀释浓度下，抑菌圈直径为7.80～26.04mm，幽门螺杆菌的MIC值为6.25mg/mL，MBC值为12.5mg/mL，结论：大果木姜子挥发油具有抗幽门螺杆菌作用，其具体机制值得进一步深入研究。

【关键词】 大果木姜子;挥发油;幽门螺杆菌;体外抑菌

【中图分类号】R29 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2020）24-0007-05

Abstract：Objective To investigate the anti Helicobacter pylori activity of essential oil isolated from the fruit of Cinnamomum migao H.W.Li.Methods The volatile oil of the Fruit of Cinnamomum migao was extracted by steam distillation. The international standard strain （Helicobacter pylori ATCC26695 ） was used as the experimental strain.The bacteriostasis experiment was carried out by filter paper method， and the minimum inhibitory concentration （MIC） and the minimum bactericidal concentration （MBC） were measured by two times dilution method and the nutrient agar diffusion method. Results The yield of volatile oil was 6.4%， the diameter of bacteriostatic circle was from 7.80mm to 26.04mm， the MIC of Helicobacter pylori was 6.25mg/mL， and MBC was 12.5mg/mL. Conclusion The volatile oil isolatedfrom the fruit of Cinnamomum migaohad obvious bacteriostasis effect on H.pylori，and its mechanism deserves further study.

Keywords：Cinnamomum migao H.W.Li;Volatile Oil;Helicobacter Pylor;Bacteriostasis in Vitro

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）感染是慢性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤和胃腺癌发生的主要诱导因素之一[1]。幽门螺杆菌是世界范围内常见的、具有强传染性的病原菌之一。有研究报道，全球有超过50%的人群感染此菌[2]。研究H.pylori致病机制，有效防治幽门螺杆菌相关性疾病已成为全球关注重大公共卫生健康问题。由于现阶段抗生素耐药性的增加，幽门螺杆菌根除率逐年下降。探索幽门螺杆菌感染治疗的新路径是当前研究的热点问题，其中中医药治疗引起越来越多的关注。中医药治疗幽门螺杆菌感染具有疗效确切、毒副反应小、根除率高等优势，是西药疗法的有益补充[3]。目前研究已发现多种中药具有明确的抗幽门螺杆菌作用。

大果木姜子是樟科樟属植物米槁（Cinnamomum migao H.W.Li）的干燥成熟果实，味苦、辛，性温，能够散寒祛湿、行气止痛，常用于治疗胃痛、腹胀、腹痛、胸闷、呕吐等病症。主要分布在我国西南地区，如贵州、云南和广西等省，为贵州十大苗药之一[5-6]。研究发现，大果木姜子挥发油对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、表皮癣菌等具有较好的体外抑菌作用[7]。但目前尚未见其对幽门螺杆菌抑菌效果的相关报道。通过体外抑菌试验，发现大果木姜子挥发油对幽门螺杆菌有较强的抑菌作用，现将研究结果汇报如下。

1 仪器与材料

1.1 试验菌株幽门螺杆菌 ATCC26695由贵州医科大学微生物学教研室惠赠，由课题组保管于贵州中医药大学形态实验室。

1.2 材料 大果木姜子购自贵阳市万东药材市场，由贵州中医药大学药学院陈晓兰教授鉴定为正品。幽门螺杆菌固体培养基（HB8647）、脑心浸液肉汤干粉（HB82971）、幽门螺杆菌抑制剂（HB8646a，10mL/支）购自青岛海博生物技术有限公司;无菌新鲜羊血购自贵阳超研生物科技有限公司;过氧化氢酶试剂（HB8650）、氧化酶试纸片（HB2100）购自于青岛海博生物技术有限公司;尿素酶试纸（121102）购自珠海市克迪科学技术开发公司;氨苄西林药敏纸片（AMP，10ug）购自湖南长沙快迈生物科技有限公司;微需氧产气袋（8057ZJ-2，日本三菱）购自上海舒济生物有限公司。

1.3 仪器 ULTS1386超低温冰箱（美国赛默飞世尔科技公司），BSC-1300 ⅡA2生物安全柜（苏州安泰空气技术有限公司），SW-CJ-1FD超净工作台（苏州安泰空气技術有限公司），BNA610电热恒温培养箱（日本Yamato公司），GI54DWSGI60DP立式压力蒸汽灭菌器（厦门致微仪器有限公司），麦氏比浊仪（法国Biomerieux SA公司），WND-2000高速中药粉碎机（浙江省兰溪市伟能达电器有限公司），多功能酶标仪（瑞士Tecan Spark）。