ANA及ANA谱联合检测在自身免疫性疾病中的应用价值

文/胡丽梅（梧州市红十字会医院）

自身免疫性疾病（autoimmune disease,AID）是指机体免疫系统对自身成分的免疫耐受减低或破坏，致使自身抗体和致敏淋巴细胞损伤自身器官组织而引发的疾病。AID 患者的一个共同特征为血清中常存在有多种特异性或相关性自身抗体。因此，自身抗体成为诊断AID 的重要依据，每种自身免疫性疾病都伴随有其特征的自身抗体谱。抗核抗体（ANA）和可提取的核抗原谱（ANA 谱）检测至今仍然是临床自身免疫性疾病诊断应用最多的项目，其在自身免疫性疾病的诊断、治疗中具有重要临床意义[1-3]。本文通过对不同的自身免疫性疾病患者的ANA 和ANA 谱检测，旨在探讨ANA及ANA 谱联合检测结果对AID 诊疗的临床应用价值。现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2016 年1 月-2019 年2 月医院诊治的AID 患者118 例，入选者均经临床确诊为自身免疫性疾病患者，包括系统性红斑狼疮（SLE）35 例，干燥综合征（SS）27 例，类风湿关节炎（RA）48 例，系统性硬化症（PSS）8 例，年 龄13-65 岁，平均（33.9±11.7）岁；选取80 例健康体检者作为对照组，年龄25-67 岁，平均（42.8±7.2）岁，经统计学检验各组的一般资料无差异，具有可比性。

1.2 检测方法

全部受检者清晨空腹静脉采血3ml，2小时内离心分离血清，将获得的血清放置在-18℃冰箱中待测。ANA 检测采用酶联免疫ELISA 法，试剂由德国欧蒙公司提供，安图RT-6000 酶标分析仪判读；ANA 谱采用免疫印迹法进行检测，使用仪器为YHLO Tenfly BlotB 型全自动蛋白印迹仪，试剂由YHLO 亚辉龙生物科技公司提供，其生产的ANA 谱试剂可同时检测17 种不同抗原的IgG 类抗体。每批测定均采用质控物作为对照，相关操作步骤必须严格根据有关操作说明完成，标准和质控均符合要求,并判定结果。

1.3 统计分析

采用SPSS11.5 统计学软件对数据进行统计和处理，计量资料以（±s）表示，比较采用t 检验；计数资料以百分率表示，比较采用x2检验；以 P<0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同AID 患者ANN 与ANA 谱检测结果的敏感性

ANA 和ANA 谱检测在自身免疫性疾病中的阳性率分别为61.86%和56.78%，明显高于非自身免疫性疾病患者，与正常对照组相比较，差异具有统计学意义（P<0.05）。而在各AID 病组中，ANA 阳性率在SLE、PSS 比较高,ANA 谱阳性率在SLE 中比较高，ANA 和ANAs 检测结果仅在SLE 患者中存在相关性（P<0.05）,在其他组中不存在相关性（P>0.05），两者联合检测敏感性大大提高。见表1。

2.2 各组自身免疫性疾病患者血清ANA 谱检测结果。

各类自身免疫性疾病出现多种自身抗体阳性，SLE 组的dsDNA、Sm、核小体、核糖体P 蛋白、u1-RNP、SS-A/Ro52 抗原的抗体出现阳性率较高，与其他各组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；SS 组中的SS-A/Ro60、SSA/Ro52、SS-B 抗原的抗体；PSS 组的抗U1-RNP、抗Scl-70、抗PMScl；RA组的抗U1-RNP与其他各组相比较，差异有统计学意义（P<0.05）。 见表2。

表1 不同AID患者ANN与ANA谱检测阳性率（%）结果比较

表2 118例AD患者血清ENA抗体谱检测结果[n(%)]

3 讨论

ANA 是一组具有多种细胞核成分的自身抗体，是抗核抗酸和核蛋白抗体的总称，ANA 可与不同来源的细胞核起反应，因此其器官和种属特异性不高，对多种自身免疫性疾病均可出现阳性[4]。ANA 谱是可提取性核抗原抗体的总称，主要包括有17 种自身抗体，本实验通过118 例AD 患者和80 例健康体检者ANA 及ANA 谱检测，研究结果显示SLE、SS、RA、PSS 组中都有ANA、ANA 谱检出，ANA 的阳性率为61.86%，ANAs 阳性率为56.78%，联合检测阳性率为66.10%，与对照组比较差异具有统计学意义（P<0.05）,对于自身免疫性疾病,ANA 的敏感度较高，ANA 在SLE组中的检出率最高，达91.43%，其次为SS:81.48%,PSS62.5%,在RA 中也有31.25%的阳性率。与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05），但特异度比较差，其不能作为某种AID 的特异性诊断指标，但可起到筛查的作用，一般作为筛查实验。ANA 谱阳性率低于ANA ,但疾病特异度相对较好，对于AID 鉴别病种有重要意义[5]。从表2中可看出抗dsDNA、抗Sm 对SLE 的阳性率为85.7%和88.6%，敏感性明显高于其他疾病组，与文献报道一致。此外，SLE在核小体、组蛋白、核糖体P 蛋白抗原的抗体的检测特异性也很高，有研究报道，抗核小体抗体对SLE 诊断的敏感性和特异性较高，其与狼疮肾炎损害有很强的相关性，是SLE 诊断的标志性抗体之一，本次研究结果显示，抗核小体抗体、抗组蛋白抗体、抗-PO 也可能成为SLE 诊断的标志性抗体，对临床诊断SLE 有重要意义。

类风湿关节炎（RA）是一种经典的常见的AID,发病机制复杂，在RA 组中以抗SSA、抗Ro52、抗SSB、抗CNEP B、抗核小体抗体检出率较高，本研究结果显示，对RA 患者进行ANA 及ANA 谱的检测，无敏感性和特异性指标，RA 的诊断目前主要依赖于RA 的临床症状，ANA、ANA 谱作为类风湿性疾病的筛查项目，联合其他自身抗体RF、AKA、抗CCP、抗Sa、抗RA33、抗MCV 进行检测，可大大提高RA的正确确诊率[6]。

综上所述，自身免疫性疾病发病机制复杂，临床表现多样化，ANA 及ANA 谱等自身抗体对其有较高的敏感度和特异度，对AID 患者进行ANA 和ANA 谱联合检测，具有结果互相弥补，提高患者检出率及准确性的优点，同时，根据ANA 谱的不同谱型，更有利于AID 病种的分型、治疗、预后判断，有较好的临床应用价值，值得广大临床医师运用推广。