素心蜡梅种皮油和种仁油化学成分的GC-MS分析

张 莲，廖 君，邹峥嵘,2

(1.江西师范大学 生命科学学院，南昌 330022； 2.江西省亚热带植物资源保护与利用重点实验室，南昌 330022)

蜡梅(Chimonanthuspraecox(L.)Link)又名腊木、岩子桑、臭腊梅、干枝梅，是蜡梅科蜡梅属植物[1]，主要分布于我国的山东、河南、陕西、四川、贵州、云南、广东、广西、浙江、江苏和福建等省[2]，是原产我国的传统观赏花木，具有较高的观赏价值和经济价值，主要用于园林、切花、香精、医药和保健饮品[3]。素心蜡梅(Chimonanthuspraecoxcv.Luteus)为蜡梅的变种，其内外轮花被片均为纯黄色，具有香味浓郁等特点，是一种广受欢迎的园林绿化树种。

蜡梅的果实药用名为土巴豆[4]，富含油脂。目前，蜡梅属植物化学成分研究以挥发油为主[5-6]，对非挥发性成分研究较少，主要报道了生物碱、黄酮、香豆素等成分[7-8]，并主要是从蜡梅的枝叶[9]中得到，对素心蜡梅种子化学成分的研究较少。因此，本研究采用正己烷分别提取素心蜡梅种皮油和种仁油，用索氏提取法和气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对素心蜡梅种皮和种仁含油量及油脂化学成分进行分析，以期为蜡梅属植物的进一步资源化利用提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 原料与试剂

素心蜡梅种子(于2018年5月在江西师范大学的校园里采集，并由邹峥嵘教授鉴定，凭证标本存放于江西省亚热带植物资源保护与利用重点实验室，标本号为2017-137)；双蒸水；活性炭、二硫化碳、正己烷、氢氧化钾、乙醇、浓硫酸、无水硫酸钠和石油醚等均为分析纯，购自西陇科学股份有限公司。

1.1.2 仪器与设备

7890A/5975C气相色谱-质谱联用仪(美国Agilent Technologies公司)，电子天平(奥豪斯仪器(上海)有限公司)，中药材粉碎机(永康市铂欧五金制品有限公司)，旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司)，干燥器(上海新苗医疗器械制造有限公司)，索氏提取器。

1.2 实验方法

1.2.1 水分和油脂含量的测定

将素心蜡梅种子分为种皮和种仁两部分，分别粉碎、过筛备用。水分含量的测定参照文献[10]的方法。将称量瓶烘干，冷却至室温，并重复至恒温准确称重(W0)，分别称取种皮粉末或种仁粉末5 g，放入称量瓶中，精密称重(W1)。在95～105℃下烘干4 h后，于干燥器中放置30 min，精密称重(W2)，按下式计算种皮和种仁水分含量。

水分含量=(W1-W2)/(W1-W0)×100%

采用GB 5009.6—2016的索氏提取法进行油脂含量的测定。

1.2.2 素心蜡梅种皮油和种仁油的提取

分别精密称取素心蜡梅种皮和种仁的粉末150 g，加入正己烷，于60～70℃加热浸泡提取12 h，过滤得正己烷提取液，将提取液在55～65℃下进行减压蒸馏回收溶剂，最后加入0.5%活性炭进行脱色及除杂质，分别得到素心蜡梅种皮油和种仁油。

1.2.3 脂肪酸组成的测定

分别称取素心蜡梅种皮油和种仁油10 g，置于250 mL烧瓶中，加6%的KOH乙醇溶液50 mL，连接回流冷凝管，在85℃水浴上煮沸2 h，对素心蜡梅种皮油和种仁油进行皂化处理。

皂化完成后，停止加热，从回流管顶部加入50 mL水并旋转摇动。冷却后转移皂化液到250 mL分液漏斗，将50 mL石油醚倒入分液漏斗，反复萃取不皂化物3～4次，合并石油醚层，水洗至中性，回收石油醚得不皂化物。皂液加硫酸酸化，再用石油醚抽提3次，合并石油醚层，水洗至中性，加无水硫酸钠干燥，回收石油醚得总脂肪酸。

将上述得到的总脂肪酸加甲醇15 mL，再加浓硫酸1.5 mL，水浴回流1 h，冷却，加水，用石油醚抽提3次，合并石油醚层，水洗至中性，加无水硫酸钠干燥，回收石油醚，得总脂肪酸甲酯，按GC-MS条件分析脂肪酸组成。

1.2.4 不皂化物成分鉴定

将1.2.3中提取的不皂化物溶解于0.2 mL二硫化碳中，按GC-MS条件分析不皂化物成分组成。

1.2.5 GC-MS分析条件

GC条件：Agilent HP-5MS气相色谱柱(30 m×250 μm×0.25 μm)；载气为高纯氦气；起始柱温60℃，程序升温以4℃/min升至250℃，保持10 min；进样量0.4 μL，以分流比10∶1分流进样；柱流量1 mL/min。

MS条件：EI离子源，全扫描方式，接口温度250℃，离子源温度220℃，电离能量70 eV。

2 结果与分析

2.1 素心蜡梅种皮、种仁水分和油脂含量

按1.2.1方法对素心蜡梅种皮、种仁水分含量进行测定，同一样品测定3次，得到素心蜡梅种皮和种仁水分含量无显著差异，水分含量为6.05%～7.65%，平均水分含量为6.76%。素心蜡梅种皮油脂含量为12.14%，种仁油脂含量为32.51%。

2.2 素心蜡梅种皮油和种仁油的脂肪酸组成

表1、表2分别为素心蜡梅种皮油和种仁油的脂肪酸组成。

从表1可以看出，素心蜡梅种皮油中共检测出16种脂肪酸，其中14种被定性鉴定，主要脂肪酸为十八碳二烯酸(57.70%)、棕榈酸(21.78%)、油酸(8.27%)、二十烷酸(4.13%)。素心蜡梅种皮油中不饱和脂肪酸含量较高，为70.72%。

从表2可以看出，素心蜡梅种仁油中共检测出16种脂肪酸，其中13种被定性鉴定，主要为十八碳二烯酸(56.76%)、棕榈酸(17.03%)、二十烷酸(8.26%)、油酸(7.31%)。素心蜡梅种仁油中不饱和脂肪酸含量较高，为71.28%。

表1 素心蜡梅种皮油脂肪酸组成及相对含量 %

表2 素心蜡梅种仁油脂肪酸组成及相对含量 %

脂肪酸参与人体代谢，有广泛的生理作用[11]。研究表明，不饱和脂肪酸具有降低血清胆固醇的作用，进而降低高血压、心脏病及中风等疾病的发病率[12]。素心蜡梅种子油中十八碳二烯酸含量较高，是一种新发现的富含十八碳二烯酸资源。十八碳二烯酸在工业上可用于制肥皂、油漆、乳化剂等，医药上可用于治疗动脉粥样硬化和血脂过高等症状。从脂肪酸组成上看，素心蜡梅种子油有较好的营养价值和保健功能，可进一步提高其开发利用价值，使其能广泛应用于医疗、香料、化妆品等行业[13-14]。因此，素心蜡梅种子油具有较大的潜在经济价值。

2.3 素心蜡梅种皮油和种仁油不皂化物组成

表3、表4分别为素心蜡梅种皮油和种仁油的不皂化物组成。

从表3可以看出，从素心蜡梅种皮油中共检测出20种不皂化物，其中鉴定了18种，相对含量较高的是二十三烷(60.82%)和二十烷(33.93%)。

从表4可以看出，素心蜡梅种仁油中共检测出20种不皂物，其中鉴定了19种，相对含量较高的是二十三烷(53.23%)和二十烷(35.30%)。

素心蜡梅种子油不皂化物中富含的二十三烷和二十烷可用于有机合成。素心蜡梅种仁油不皂化物中角鲨烯的含量较高，角鲨烯可用于调节胆固醇代谢及降血脂、降血糖，并具有抑菌、抗菌作用。此外，角鲨烯还在化妆品、食品机械润滑剂、杀虫剂等行业有着广泛应用[15]。

表3 素心蜡梅种皮油不皂化物组成及相对含量

表4 素心蜡梅种仁油不皂化物组成及相对含量

3 结 论

素心蜡梅种皮油脂含量为12.14%，种仁油脂含量为32.51%。素心蜡梅种皮油和种仁油中都以十八碳二烯酸和棕榈酸的含量最高，其中种皮油中十八碳二烯酸和棕榈酸的含量分别为57.70%和21.78%，种仁油中十八碳二烯酸和棕榈酸的含量分别为56.76%和17.03%。素心蜡梅种皮油和种仁油中不皂化物主要成分都是二十三烷和二十烷。素心蜡梅种子油不饱和脂肪酸含量较高，具有良好的开发利用价值和广阔的应用前景。