云南省文山壮族苗族自治州兽医实验室建设现状调查

（文山州动物疫病预防控制中心，云南文山 663000）

文山壮族苗族自治州（以下称文山州）地处云南省的东南部，全州8 县（市）104 个乡（镇），动物防疫工作点多面广，难度较大。2018 年我国非洲猪瘟（ASF）的发生，暴露了文山州基层动物疫病防控能力的薄弱，因此全面了解其兽医实验室建设现状及检测能力水平，针对性地加强8 县（市）动物疫病预防控制中心兽医实验室的建设，提高各县市兽医实验室综合技术能力，对全州动物疫病的预防与控制具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 调查对象的基本情况

至2020 年文山州共有8 个县级兽医实验室，1 个州级兽医实验室。兽医实验室是动物疫病控制系统的重要组成部分，承担着动物疫病的诊断、检测、监测以及流行病学调查等重要任务，是动物疫病防控工作中重要的技术支撑力量。各级兽医实验室在建设、运行、管理等方面的问题直接或间接地影响着当地动物疫病防控工作[1]。

2004 年以来，国家加大对兽医系统实验室建设投资力度，农业农村部在全国实施了省、州（市）、县三级兽医实验室考核验收、认证工程，为县级兽医实验室的建设、规范运行带来了发展机遇[2]。全州8 县（市）在不同程度上新建、扩建兽医实验室，通过考核验收获得省级兽医实验室考核合格证的有7 个，其中包括3 个边境测报站（文山市、麻栗坡县、富宁县），1 个州级兽医实验室，3 个县级兽医实验室（丘北县、广南县、马关县）。

1.2 调查方法

经问卷调查、检测工作调查、现场调查等方式，对实验室建设状况、运行情况、仪器设备、人员配备、开展检测项目以及生物安全防护等方面进行调查，全面掌握文山州兽医实验室建设现状，针对实际问题提出思考，为提高文山州基层兽医实验室动物疫病检测能力与实验室生物安全水平奠定基础。

2 调查结果

2.1 检测能力范围及通过考核情况

对文山州1 市7 个县的动物疫病预防控制中心兽医实验室建设情况开展问卷调查，结果显示：文山州系统内兽医实验室共有9 个，包括州级1 个、市级1 个、县级7 个（其中边境测报站3 个），具备常规抗体血清学检测、监测能力的实验室9 个，具备病原分子生物学检测能力实验室1 个（州级兽医实验室）；具备ASF 检测能力的实验室4 个（州级1 个、县级3 个）。全州兽医实验室通过省级考核验收比例为77.8%（7/9），2 个县级（砚山县、西畴县）兽医实验室未完成建设与考核，兽医实验室的建设与地方财政收入、政府重视程度、养殖量等因素密切相关。

2.2 基础设施及人员配备

在调查具备抗体血清学检测、ASF 检测能力的兽医实验室中，实验室建设面积基本达到县级兽医实验室建设标准（200 m2以上），但有部分实验室所处的地理位置达不到相对独立；文山州兽医实验室专业技术人员仅有34人，各县实验室为2～4人，高级兽医师15 人（约44%）；年龄在40～55 岁的工作人员占比90%；实验室技术人员大专学历有18 人，大学本科学历13 人，硕士学历3 人（均在州级兽医实验室），毕业于兽医专业技术人员仅60%。文山州兽医实验室建设总体上推进较慢，实验室专业技术人员年龄偏大、职称不高、学历偏低、配备不足直接影响实验室检测工作的推进。

2.3 仪器设备及试剂配备

配有便携式荧光定量PCR 仪的实验室4 个，配有普通PCR 仪的实验室1 个（州级兽医实验室），配有全自动核酸提取仪实验室2 个（1 个州级1 个县级），配有酶标仪实验室9 个。ASF 检测仪器设备与试剂涉及4 个生产厂家，血清学检测仪器设备与试剂基本相近，多数以省级比对试验要求一致。

2.4 生物安全设备设施

9 个兽医实验室均同时配有生物安全柜、高压灭菌设备，但工作人员理解执行生物安全管理文件的能力有待加强，在调查中发现各县实验室人员生物安全设备的使用、管理不规范，对生物安全方面的理解片面，生物安全意识不强，尽管设备已就位，但生物安全措施的落实不到位。

2.5 能力验证情况

2017 年有6 个实验室参加云南省禽流感血凝抑制比对试验，比对结果符合率约为92.5%；参与口蹄疫抗体检测能力比对符合率为94%。2018 年参与云南省禽流感病原学PCR 检测比对实验室1 个，比对结果符合率为97%；参与禽流感血凝抑制试验比对实验室6 个，比对结果符合率为95%；参与口蹄疫抗体检测能力比对符合率为98%。2019 年参与云南省非洲猪瘟病毒核酸PCR 检测比对实验室1 个，使用国家ASF 参考实验室提供的引物进行盲样比对，比对结果符合率为100%；参与ASF 荧光快速PCR 检测比对实验室3 个，比对结果符合率约为93%；参与禽流感病原学PCR 检测比对实验室1 个，比对结果符合率为100%；参与禽流感血清学检测能力比对实验室7 个，比对结果符合率98%；参与口蹄疫抗体检测能力比对实验室7 个，比对结果符合率为100%。全州兽医实验室在病原学PCR 检测方面能力十分薄弱，缺乏新的检测仪器设备；在血清学检测能力方面有所提高，但因试验因素影响及人员技术等原因仍存在检测结果不稳定的情况。

3 讨论

3.1 兽医实验室建设

经现场调查发现文山州县级兽医实验室建设缓慢，基础硬件设施相对不足。从全州兽医实验室建设完成情况来看，完成实验室基础硬件平台建设，具有固定相对独立实验室区域；能开展血凝和血凝抑制试验、琼脂凝胶免疫扩散试验、平板凝集试验、试管凝集试验、ELISA 抗体检测试验等血清学检测项目；通过省级考核验收的兽医实验室7 个，全州兽医实验室建设完成比例为77.8%。目前拥有ASF 检测能力的兽医实验室仅有4 个，占总数的44.4%。各兽医实验室条件有限，难以开展病原学检测项目，县级兽医实验室检测项目少、检测能力薄弱。县级兽医实验室配置的仪器设备中废旧、老化的仪器占比较高，而适用于目前动物疫病检（监）测的仪器设备相对稀缺，难以满足当前动物疫病检（监）测工作的需求。全州兽医实验室服务于动物疫病预防控制工作的基础硬件设施有待提高。对于县级兽医实验室的建设及检测诊断能力水平，我国其他地区也存在实验室硬件基础条件不完善，无法正常开展动物疫病的检测和对疫病及时准确的诊断工作，甚至ASF 检测能力的缺失等问题，面对目前复杂多样的动物疫病，持续加强县级兽医实验室的建设十分重要[3-6]。

3.2 兽医实验室内部管理

兽医实验室内部质量管理体系和生物安全体系的建设不完善。80%的基层兽医人员对管理体系的认识、理解局限于文件上，实际工作落实情况与文件要求存在一定差距，执行和运行上存在一些细节问题。兽医实验室对实验室物资管理方面存在不足，如对ASF 检测，各实验室采购ASF 快速检测仪器、试剂厂家各不一致，来源复杂，缺少统一的判定标准，检测结果可靠性有待验证。部分兽医实验室开展PCR 检测环境的控制能力较低，进行ASF 检测的实验室存在半开放性的实验室，检测区域未达到负压标准。我国高级别兽医防护实验室分布不均且数量有限，大量高风险动物疫病样品的采集、前期处理、疫病初筛等试验活动尚需要由基层兽医实验室承担，面对基层兽医实验室的基础设施改造、设备配置、完善规范运行、人员能力提升等诸多因素，基层兽医实验室急需规范内部工作，强化实验室管理[7]。

3.3 实验室检测技术人员

各县兽医实验室检测技术人员素质参差不齐，检测能力不足。因体制改革，实验室检测人员不稳定，存在一人同时兼数职、调岗工作兼扶贫工作等现象，导致兽医实验室检测压力大，超负荷运转。在现场调查中发现部分实验室检测人员对快速PCR 仪器检测方法认识匮乏，试验操作不规范，检测结果无法正确判断；大部分检测人员未开展岗前专业的ASF 检测技术及PCR 和荧光PCR 检测技术实操培训，仅依靠个人经验、仪器厂家短暂的仪器操作培训及大规模的政府ASF 防控文件、政策知识培训，技术人员的检测能力无法达到实际检测工作的要求。兽医实验室的检测能力难以适应新形势下动物疫病防控工作需求，疫病的预警和预报能力发挥不够，服务功能发挥不全[8]。

3.4 实验室生物安全意识

基层兽医安全意识缺乏，生物安全防护落实不到位。实验室专业技术人员缺乏，实验室操作技术不规范，实验室虽然配有高压灭菌锅和生物安全柜等重要生物安全防护装置，但因人员意识及操作规范方面的投入相对不足，许多人认为“建成生物安全实验室就一定能够进行有效的防护”[9]。而实际在实验室开展禽流感、口蹄疫、布病、ASF等动物疫病的检测过程中，试验人员对废弃物的处理、生物安全防护装置的维护保养以及试验关键设备及应用防护等方面存在短板，导致工作中存在很大的生物安全隐患。

4 建议

4.1 重视县级兽医实验室建设

从本次调查情况来看，文山州9个兽医实验室，仅有4 个实验室具有ASF 检测能力，少数实验室具有完整的生物安全管理体系。县级兽医实验室检测能力十分薄弱，无法及时准确诊断疫病，继而错失控制疫病的最佳时机。随着现代畜牧业的不断发展，兽医实验室建设、功能定位都发生了变化[10]。各县政府部门应高度重视基层动物疫病预防控制机构兽医实验室的建设，合理安排兽医实验室建设运行专项资金的投入，加快推进县级兽医实验室的建设，尤其是边境以及畜牧养殖业丰富的县市，充分履行基层兽医实验室的职能、职责，切实开展动物疫病诊断、监测、检测、流行病学调查等重要工作，提高实验室的服务功能，为兽医行政管理部门和动物卫生监督执法部门提供科学有力的技术保障。

4.2 加强实验室内部管理

基层兽医队伍庞大、建设发展不平衡，需加强管理与指导。当前，全州各县兽医实验室内部质量管理体系与生物安全管理体系建设、执行不到位，各县兽医实验室应以实验室建设为契机，结合实际工作不断改进、建设管理体系，加强实验室管理，加大培训学习力度，利用年度实验室内部审核和管理评审工作强化两大体系的学习与落实，向外探讨、向内提升，逐步规范化管理兽医实验室。

4.3 提高兽医实验室检测服务能力

各县市兽医实验室应主动开展检测技术、生物安全、政策法规、质量体系文件等相关基础知识的培训，并对实验室检测人员进行考核持证上岗。对实验室已授权的检测项目有计划地进行内部培训，定期开展实验室内的检测能力比对。同时积极主动参与省、州级组织的检测能力比对试验，对检测能力比对符合率不高的试验项目进行分析总结、查找原因，加强实验室检测能力比对与技术培训，提高实验室检测能力与技术服务水平。

4.4 选择可靠的检测仪器设备与试剂

兽医实验室检测仪器设备、检测技术的标准、试剂等不统一，检测数据不统一分析是兽医实验室检测工作的一个难题。目前，出现在市面上的ASF 诊断和检测制品多种多样，相关仪器设备与试剂种类繁多，价格不一，在选择诊断、检测试剂、仪器设备时要与实际情况相结合，选择质量可靠、较稳定的通用仪器设备及检测试剂。

4.5 加强生物安全防护

兽医实验室作为密切接触临床病例的场所，加强实验室生物安全防护措施，规范实验室人员、仪器设备等操作程序，是防止实验室感染与病原传播的有效手段。各县级兽医实验室管理滞后，生物安全设备有效利用率较低，废弃物无害化处理不规范，生物安全意识薄弱，生物安全风险较高，因此亟需科学严谨地加强生物安全防护与管理。各兽医实验室可考虑从生物安全制度的制定、落实，人员的管理，风险评估、预防及控制[11]，以及生物安全仪器设备的规范使用，有效维护保养等方面来完善兽医实验室的生物安全防护。