微小甲状腺乳头状癌合并慢性淋巴细胞性甲状腺炎的临床特征和MMP-9表达

王晖 马世红 张正东 韩华中 艾志龙

慢性淋巴细胞性甲状腺炎（chronic lymphocytic thyroiditis，CLT）是一种自身免疫性疾病，部分患者常伴发甲状腺肿瘤，以甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinomas，PTC）多见，其中又以≤1 cm的PTC即微小甲状腺乳头状癌（papillary thyroid microcarcinoma，PTMC）最常见。近年来，炎症在肿瘤发生、发展中的作用受到越来越多的关注，但有关PTC与CLT之间的关系一直存在争议，有学者指出CLT与PTC的发生密切相关[1]，也有学者认为两者并无关系[2]。文献报道CLT与PTC共存率为0.5%～30%，不同研究数据差异较大[3]，目前尚无定论CLT是否为PTC发生的危险因素[4]。基质金属蛋白酶9（matrix metallopeptidase 9，MMP-9）参与降解细胞外基质和基底膜的胶原等成分，是促进肿瘤细胞侵袭和转移的重要因子之一。本研究对PTMC合并CLT患者与单纯PTMC患者的临床特征进行比较，分析两者肿瘤组织MMP-9的表达与淋巴结转移的关系，现报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象 选取2017年1月至2019年6月在上海市徐汇区中心医院行甲状腺切除手术的PTMC患者194例。所有患者均经术后病理组织学检查且诊断明确，无其他内分泌系统及免疫系统疾病，均行单侧或双侧甲状腺癌根治术。其中单纯PTMC患者121例（PTMC组），PTMC合并CLT患者73例（PTMC合并CLT组）。两组患者的肿瘤组织标本均行免疫组化检测MMP-9的表达情况。本研究经上海市徐汇区中心医院医学伦理委员会批准，患者知情同意并签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 临床资料收集 回顾并收集两组患者性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤多灶性、淋巴结转移情况及有无合并结节性甲状腺肿（nodular goiter，NG）等临床特征资料。

1.2.2 肿瘤组织MMP-9表达检测 手术切除的肿瘤组织标本经4%中性甲醛溶液固定，石蜡包埋，4 μm连续切片。采用链霉亲和素-过氧化物酶（streptavidin-perosidase，SP）法行MMP-9免疫组化染色。免疫组化试剂盒购于北京中杉金桥生物技术有限公司。兔抗人多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司，抗体稀释1∶100。每张切片由2位病理科医师双盲读片。细胞质中出现棕黄色或褐色颗粒判断为阳性，每张切片随机选取5个高倍视野（400倍）。染色强度：无着色记0分，浅黄色记1分，棕黄色记2分，棕褐色记3分。阳性细胞百分数：阳性细胞＜5%记 0分，5%～25%记 1分，26%～50%记 2分，51%～75%记3分，＞75%记4分。免疫组化结果判定采用半定量评分标准，阳性细胞百分数和染色强度的乘积：0 分记为-，1～4 分为记为+，5～8 分记为为++，9～12分记为+++。－、+视为阴性，++、+++视为阳性。

1.3 统计学处理 采用SPSS16.0统计软件。计量资料以表示，组间比较采用两独立样本t检验。计数资料以频数和构成比表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者临床特征比较 两组患者性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤多灶性、淋巴结转移情况及有无合并NG等临床特征比较差异均无统计学意义（均P＞0.05），见表1。

2.2 两组患者肿瘤组织MMP-9表达情况比较 PTMC组患者肿瘤组织MMP-9阳性表达率为68.60%（83/121），PTMC 合并 CLT 组患者为 45.20%（33/73），PTMC组高于PTMC合并CLT组（P＜0.05）。

2.3 MMP-9的表达与淋巴结转移情况的关系 PTMC组患者中有淋巴结转移20例，其中MMP-9阳性表达16例，占80.00%；无淋巴结转移101例，其中MMP-9阳性表达48例，占47.52%，有淋巴结转移患者MMP-9阳性表达率高于无淋巴结转移患者（P＜0.05）。PTMC合并CLT组患者中有淋巴结转移9例，其中MMP-9阳性表达7例，占77.78%；无淋巴结转移64例，其中MMP-9阳性表达23例，占35.94%，有淋巴结转移患者MMP-9阳性表达率高于无淋巴结转移患者（P＜0.05）。

3 讨论

甲状腺癌是常见的内分泌系统恶性肿瘤，近年来，其发病率呈现全球化激增趋势[5]，在女性肿瘤中已跃居第6位[6]，很大一部分原因是辅助检查技术的进步，新确诊的甲状腺癌患者明显增多。在甲状腺癌新发病例中PTMC占据了相当大的比例[7]。CLT又称自身免疫性甲状腺炎，是一种以自身甲状腺组织为抗原的慢性炎症性自身免疫性疾病。PTC合并CLT的发病率文献报道差异较大，为0.5%～30%[3]。近年来发现，PTC合并CLT的发病率也呈逐年上升趋势[8]。目前多认为CLT与PTC关系密切[9]，以往文献多对PTC与CLT进行对比研究[10]，而有关PTMC与CLT的对比研究不多。

本研究结果显示，在PTMC患者中，合并CLT的发生率为37.6%（73/194），与国内报道PTMC合并CLT的发病率（20.4%～29.1%）稍有差异[11-12]，这可能与各中心的样本量大小有关。同时，本研究显示，PTMC合并CLT组的PTMC多灶性发生率与CLT组差异无统计学意义，这与国内已有报道差异不大[13]，偏差可能与诊断方法的不同，而且多灶性发生时PTMC的病灶较小，存在一定的误诊或漏诊有关。本研究中，PTMC合并CLT组患者中以女性患者居多，这与PTC、CLT在女性中的发病率较高一致。

淋巴结转移是影响肿瘤预后的一个重要指标，PTMC的预后较好，PTMC肿瘤直径≤0.5 cm时，出现淋巴结转移及远处转移的概率较低[5]。本研究结果显示，两组患者淋巴结转移发生率比较无统计学差异。MMP-9是金属蛋白酶家族中相对分子质量最大的酶，参与降解细胞外基质和基底膜的胶原等成分，是促进肿瘤细胞侵袭和转移的重要因子之一[14]。有研究表明MMP-9与PTC的发生、发展有明显关系[15]。PTMC组患者肿瘤组织MMP-9阳性表达率为 68.60%（83/121），PTMC 合并CLT组患者为45.20%（33/73），PTMC组高于PTMC合并CLT组。PTMC合并CLT组与PTMC组中有淋巴结转移患者MMP-9阳性表达率均明显高于无淋巴结转移患者。这说明PTMC中MMP-9的表达可能与淋巴结转移风险有关。

综上所述，本研究结果显示MMP-9在PTMC合并CTL患者与PTMC组患者中均有表达，在PTMC中表达更高；MMP-9高表达可能与甲状腺乳头状癌淋巴结转移相关。