成人连续彩色水平断层树脂包埋标本的研制

张中军，牛小艳，崔颜宏，秦万生

（洛阳职业技术学院，河南 洛阳 471000）

人体解剖学标本在经过我国科研工作者的长期实验研究以后，探索出透明、塑化、断层、铸型标本的制作方法，制成了一大批新型的人体解剖学标本，为教学、科研、临床提供了直观新颖的形态学依据[1-2]。断层解剖学作为人体解剖学的一个分支，主要是研究正常人体器官在各种断面上的位置、毗邻、形态和大小的关系。现在的人体断层标本依然采用传统的低温冻切，防腐液固定的方法进行保存展示，各组织和器官间的位置关系、毗邻结构都没有特别的颜色区别，既不能很好地区分各层面动脉、静脉和神经的走形变化，也不易分辨肌肉和筋膜的层次结构，在一定程度上限制了对断层标本的利用和研究[3]。在生物学领域常用有机玻璃、脲醛树脂等材料包埋昆虫标本，但利用上述材料制作个体较小的包埋标本成功率较高，大型标本的成功率较低[4-5]。受此启发，通过长期试验，我们选用合适的染料和树脂材料染色包埋制作成人连续彩色水平断层树脂包埋标本，克服了传统生物学包埋技术只能制作小型标本、长期保存树脂材料发黄、标本变色的不足，对保存人体断层标本具有重要意义，现将彩色水平断层树脂包埋标本制作技术报道如下。

1 材料和方法

1.1 材料

库存尸体、10%甲醛（化学纯）、生理盐水、丙酮溶液（化学纯）、无水酒精（化学纯）、双氧水（化学纯）、二氯甲烷（化学纯）、树脂、染料、抛光蜡。

1.2 方法

1.2.1 尸体的选取 选择体态匀称，外观没有手术创伤缺损的中青年尸体标本，测量尸体两耳、两肩部、上下肢的对称性[6]，以对称性无差别的尸体标本为佳。剔除毛发，刷洗干净尸体的外表面，并对尸体标本进行头部、胸部、盆部的放射线检查。

1.2.2 定型 用生理盐水经股动脉循环灌注，从静脉系流出，直到流出的液体呈无色透明为止，按照解剖学姿势平放在木板上，用直角规测量两耳郭和外耳道的高度，并用绳子调整和固定头部姿势使其两侧耳郭和外耳道的高度一致。用绳子和绷带将头、躯干和四肢固定在木板上使之左右对称，并用直角规和卷尺逐一测量上下肢与正中矢状线的对称距离，确保两侧距离一致。

1.2.3 冷冻锯片 将定型好的尸体标本放置在200 cm×70 cm×50 cm，板厚5 cm的木箱内，-35℃冷冻1天，测量尸体标本对称性无变化后，将温度调至-70℃冷冻1周。用电动断层带锯将冷冻好的尸体标本从上往下水平锯切，做成连续水平切面，片厚5 mm，锯耗1 mm，冷水冲洗逐渐复温至5℃。

1.2.4 漂白、脱水、脱脂 把切好的水平断层标本浸泡在2%～3%的双氧水中漂白1周，然后用流水冲洗干净。将漂白后的水平断层标本迅速置于-25℃的70%、85%、90%、95%、100%的丙酮中逐级脱水，各级浓度的丙酮脱水时间为1周，每次6天。脱水后的水平断层标本放入二氯甲烷中脱脂2～3天，标本脱脂后能更清楚地显示组织内的血管和神经的走行[7]。

1.2.5 染色 将脱水、脱脂后的水平断层标本缓慢抽真空去除二氯甲烷后，选用不同的染料给肌肉、血管、神经等器官组织染色，将染色后的水平断层标本放置在30℃的包埋盒中静置3小时，使染料和各组织器官紧密结合。

1.2.6 真空渗透 将树脂缓慢倒入装有染色的水平断层标本的包埋盒中，缓慢抽真空，压力控制在2 mmHg以下，空气在真空状态下以气泡形式排出，树脂逐渐进入水平断层标本，维持该压力1～2天，当树脂中不再有气泡出现为止。

1.2.7 聚合硬化 待包埋盒内的气泡完全排除后，将包埋盒移入30℃的恒温箱内2～3天，待树脂硬化后去掉包埋盒，取出与树脂融合为一体的彩色水平断层标本。

1.2.8 修洁标本 标本聚合硬化后，切除水平断层标本边缘多余的树脂，然后用羊毛轮打磨抛光标本边缘，整个过程基本完成。

2 结果

采用彩色水平断层树脂包埋技术制作的水平断层标本厚度在5 mm以下，硬度较高，标本颜色均匀自然，透明度好，各断层上的器官和组织之间的走形及位置关系更加清晰明了。

3 讨论

树脂包埋标本具有高透明度、高亮度等特点，改良后的彩色水平断层树脂包埋技术制作的人体断层解剖标本，不但能显示清晰的解剖结构，而且能长久保持染色效果，达到长久保存的目的，既满足教学、科研、临床的需要，同时也解决了大型珍贵标本的保存问题。彩色水平断层树脂包埋技术作为一门新型实用的解剖学标本制作技术，为制作更高质量的人体标本，解决水平断层标本的保存难题、攻克长期保存颜色不变成为可能，应用前景十分广阔。