超高效液相色谱检测农作物中农药残留

张镅

齐齐哈尔市质量技术监督检验检测中心 黑龙江齐齐哈尔 161000

1 高效液相色谱法

高效液相色谱技术指高压液相色谱技术，是以经典液相色谱法为前提条件，然后引入气相色谱理论形成的检测方法。高效液相色谱法的适用范围比较广阔、分离效率比较高、检测的速度比较快。在利用高效液相色谱技术检测时，流动相能选择的范围比较宽，固定相的种类比较多，色谱柱还可以反复使用，具有很大的便利性。高效液相色谱法广泛地运用在挥发性比较低、热稳定性比较差的高分子化合物和离子型的化合物中进行分离检测[1]。

2 超高效液相色谱检测农作物中农药残留

2.1 仪器与试剂

仪器的选择中，超高效液相色谱仪器是必备设备之一，除此之外还需要配备溶剂萃取仪、超声波清洗机、元素型1820A超纯水机以及固相萃取装置等设备。必备试剂有各类农药残留物的对照品，主要分为甲基硫菌灵、多菌灵、三聚氰胺以及环丙氨嗪。以上4种对照液溶度要求为：＞97.7%、＞97.2%、＞99.5%、＞99.5%。除此之外，还需要配备甲醇、超纯水、盐酸以及丙酮等。检测应用的流动相A为甲醇溶液；流动相B为融合溶液，由乙酸铵+水+三氟乙酸调节而成，最终pH控制在3.8。萃取溶剂主要是由丙酮（100mL）和甲醇，最终需要定容在500mL，pH控制在3.0。标准储备液：0.01g甲基硫菌灵以及多菌灵溶剂应用甲醇，最终定容到100mL；0.02g环丙氨嗪以及三聚氰胺同样应用甲醇进行定容，定容规格与上述相同。工作液：结合实际需求进行工作液配置，配置用试剂为甲醇和水。

2.2 样品萃取与净化

本次实验中，所有应用到的食用菌样品全部都是常见菌类品种，从超市随机采购。采购之后，将食用菌进行匀浆处理，并且进行避光存储，存储温度为4℃。加速溶剂萃取：在对应仪器萃取池底部设置1层直径为16.2mm的垫片，在其中放置0.5g硅藻土，目的在于保证收集瓶干净整洁，不会有多余杂质进入。样品称取量为10g，将其均匀地混合到萃取池中。萃取溶剂为丙酮、甲醇、盐酸混合液，保证萃取温度为70℃恒定，压强为10.3MPa恒定。进行初期的静态萃取，时间为5min，一共需要循环2次。之后以10000r/min的速度进行离心，离心时间为10min，可以得到检测应用的上清液，将上清液转移到梨形瓶进行旋转蒸发处理，最后应用3：7比例的甲醇水溶液进行定容，定容规格为3mL。固相萃取净化：将固相萃取小柱应用甲醇溶液进行活化处理，应用清水进行平衡，加入待测样品[2]。

2.3 超高效液相分析应用

色谱柱进行检测，要求色谱柱的柱温度在40℃。在检测之前进行梯度洗脱，该过程中应用到的溶剂为乙酸铵+水+三氟乙酸和甲醇。确定4种残留农药最大检测波长分别为甲基硫菌灵264nm、多菌灵280nm、环丙氨嗪240nm、三聚氰胺237nm。保证外部条件最佳，对残留农药进行峰值、峰面积、工作曲线测定。

3 结果分析

3.1 检测波长分析

规定色谱条件一致，检测4类残留农药标准液，应用仪器在190-400mm波长范围内进行测试。检测结果表明，TM、CAR、CYR、MEL分别在280nm、264nm、240nm、237nm时存在有特征吸收峰，比对结果为四者在237nm处均有响应，并且干扰并不大；最终确定，CYR、MEL的最佳波长参数为237nm，这一检测结果与其它文献参数相同。

3.2 线性和检出限

应用流动相进行逐级稀释，最终得出甲基硫菌灵、多菌灵、环丙氨嗪、三聚氰胺浓度分别为5-500ng/mL、4-400ng/mL、3.6-360ng/mL、2.4-240ng/mL，并且保证检测条件最佳状态进峰面积测定。而对于检测线性的展示则是通过坐标轴完成，本次采用的坐标轴横纵坐标分别为分析物浓度和峰面积。通过线性检测分析可以发现，以上4种分析物都存在良好的线性关系，按照规定，最终确定上述4种分析物的检出限分别为1.7、1.2、0.72以及1.1对照相关的GB/T22388以及GC-MS，本文应用的检测方法更加便捷，并且具有良好的检测效果[3]。

3.3 精确度

在精确度的检测过程中，保证检测环境为最佳条件，最终经测试4种分析物的日标准差基本维持在2.3%-4.5%之间，而相对标准差则维持在3.1%-6.3%之间，上述数据证明，本文应用到的检测方法具有良好重现性。

3.4 样品分析

在本次检测过程中，采集的食用菌为常见的香菇、杏鲍菇、双孢菇以及金针菇等，检测时确保萃取、净化、分析等过程没有受到外界环境条件影响，最终检测结果为：在上述食用菌中没有检测到4种分析物，也就是不存在农药残留。其中，香菇的4种分析物检测回收率在83%-99%之间，杏鲍菇在82%-105%之间，双孢菇以及金针菇在83%-98%、85%-97%之间。

3.5 检测结果分析

本文检测过程中所提出的ASE-SPE结合UPLCDAD方法，在实际应用过程中，成功的检测出采购蘑菇样品中甲基硫菌灵、多菌灵、环丙氨嗓、三聚氰胺农药残留量。从检测应用情况以及具体表现角度而言，此种方法具有很好的立足点，较高的灵敏度，精密度和较低的溶剂消耗，4种分析物能够在ug/kg水平上检测药物的残留。因此，该方法可以用于蘑菇样品中甲基硫菌灵、多菌灵、环丙氨嗦和三聚氰胺的常规检测，并且可以发挥重要作用。