LC-MS/MS法测定玉米植株和土壤中磺酰磺隆残留量

2019-12-18高宗军李瑞娟李如美

现代农药 2019年6期

高宗军，李瑞娟，戴争，李如美

（山东省农业科学院植物保护研究所山东省植物病毒学重点实验室，济南 250100）

磺酰磺隆（sulfosulfuron）是美国孟山都公司和日本武田公司共同开发的磺酰脲类除草剂，于1997年上市，2002年在欧盟获得登记[1-2]。其作用靶标是乙酰乳酸合成酶（ALS），可用于小麦田防除野燕麦、早熟禾等一年生和多年生禾本科和部分阔叶杂草，对小麦安全，但对后茬敏感作物玉米、水稻有生长抑制作用[3-4]。因此，磺酰磺隆在农田环境中的持久性和安全性备受关注。

目前，有关磺酰磺隆的研究主要集中在室内生物活性测定、田间药效和持效期、高效液相色谱法定量检测、酶联免疫吸附分析等方面[3-6]。利用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS），对玉米植株和土壤中磺酰磺隆残留量的定量检测分析未见报道。本文采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS），检测玉米植株和土壤中磺酰磺隆的残留量，为磺酰磺隆在农田环境中的使用提供试验依据。

1 材料与方法

1.1 仪器和试剂

高效液相色谱-质谱仪：Agilent1260-6460Eclipse plus C18色谱柱（50 mm×3.0 mm，2.7 μm），安捷伦科技有限公司；Z326K高速冷冻离心机，德国哈默公司；SQP百分之一电子天平，BSA224S-CW万分之一电子天平，赛多利斯科学仪器有限公司。

95%磺酰磺隆标准品，德国Dr.Ehrenstorfer公司；乙腈（色谱纯），山东禹王和天下新材料有限公司；甲苯（色谱纯），国药集团化学试剂有限公司；甲醇（色谱纯），赛默飞世尔科技有限公司；纯水，屈臣氏有限公司。

1.2 磺酰磺隆标准溶液的制备

用电子天平称取95%磺酰磺隆标准品0.010 5 g于100 mL烧杯中，用2 mL二氯甲烷溶解后，加入甲醇稀释定容至100 mL，即得100 mg/L标准储备液，用甲醇梯度稀释配制5、10、50、100、200 μg/L的标准工作溶液，待用。

1.3 试验样品的前处理

玉米植株样品：称取待测玉米植株匀浆液5.00 g，置于50 mL塑料离心管中，加入10 mL乙腈和2.00 g NaCl，涡旋超声10 min后加入5.00 g无水Na2SO4，涡旋振荡30 s，5 000 r/min离心3 min；上清液置于鸡心瓶中，旋蒸，用5 mL甲苯-乙腈（体积比1∶3）定容，同时用5 mL甲苯-乙腈（体积比1∶3）对Bond Elut Carbon固相萃取柱进行2次活化处理；将Bond Elut Carbon固相萃取柱置于鸡心瓶内，待净化样品经涡旋振荡器涡旋后转移至Bond Elut Carbon固相萃取柱，静置过滤5min后，用5mL甲苯-乙腈（体积比1∶3）洗脱2次；旋蒸浓缩近干，用甲醇定容至5 mL容量瓶，过0.22 μm滤膜，待测。

土壤样品：称取30.00 g土壤于250 mL锥形瓶中，依次加入40、40、20 mL乙腈，各超声1次，每次超声15 min；取上清液经漏斗转移至100 mL的具塞量筒，重复3次；过滤合并3次离心所得上清液，向具塞量筒内加入7.00 g无水NaCl，振荡2 min，静置1 min，再振荡1 min，静置40 min。取20 mL提取液于鸡心瓶中，旋蒸浓缩近干，用甲醇定容至5 mL容量瓶，过0.22 μm滤膜，待测。

1.4 色谱检测条件

离子源为电喷雾离子源ESI；扫描方式为正离子源；毛细管电压4 kV（-）；脱溶剂温度300℃；脱溶剂气流量8 L/min；雾化器压力0.24 MPa。磺酰磺隆检测方式为多重反应监测（MRM），具体参数见表1。

表1MRM扫描参数

进样体积5 μL；流速0.3 mL/min；柱温35℃；采用1 mmol/L乙酸铵＋0.1%甲酸（A）和1 mmol/L乙酸铵＋0.1%甲酸甲醇（B）组成的流动相进行梯度洗脱。洗脱程序：0～1 min，90%→60%（A）、10%→40%（B）；1～3 min，60%→10%（A）、40%→90%（B）；3～6 min，10%（A）、90%（B）；6～6.01 min，10% →90%（A）、90%→10%（B）；6.01～10 min，90%（A）、10%（B）。

1.5 添加回收率的测定

称取玉米植株样品5.00 g，分别添加磺酰磺隆标准溶液，使磺酰磺隆添加浓度为5、10、100 μg/kg，每个处理设5次重复。按照上述提取、净化步骤和仪器条件测定样品中磺酰磺隆的含量，计算添加回收率。

称取土壤样品30.00 g，分别添加磺酰磺隆标准溶液，使磺酰磺隆添加浓度为5、10、100 μg/kg，每个处理设5次重复。按照上述提取、净化步骤和仪器条件测定样品中磺酰磺隆的含量，计算添加回收率。

2 结果与分析

2.1 方法的线性关系、灵敏度

按照上述仪器条件，对5、10、50、100、200 μg/L的磺酰磺隆系列标准工作溶液进行丰度测定，以磺酰磺隆质量浓度为横坐标，磺酰磺隆色谱丰度为纵坐标，绘制标准曲线（图1）。其线性回归方程为y=2 746.8x＋2 519.8（R2=0.994 4）。结果表明，在5～200 μg/L范围内，磺酰磺隆色谱丰度与进样质量浓度之间线性关系良好。仪器对磺酰磺隆的最小检出量（LOD）为0.3 μg/L，本试验中磺酰磺隆在玉米植株和土壤中的最低检测浓度（LOQ）均为5 μg/kg，保留时间为5.01 min。