在宫颈癌筛查中液基细胞学制片方法及染色方法探讨

胡鑫瑜

【摘要】 目的：探讨沉降式液基细胞学制片联合苏木素-伊红染色用于宫颈癌筛查中的临床价值。方法：以2018年1月至2018年12月为时限，择取于本院行宫颈癌筛查的10500名受检者，取宫颈细胞样本为研究对象，分别接受液基细胞学检查（研究组）与宫颈涂片检查（对照组）。研究组采用泰普沉降式制片，行苏木素-伊红染色;对照组制成传统涂片，行巴氏染色。镜下观察，评价两组制片质量，比较两组细胞学检查结果。结果：研究组制片满意度（98.62%）高于对照组（87.05%），宫颈上皮异常检出率（6.05%）高于对照组（4.05%），差异有统计学意义（P<0.05）。结论：沉降式液基细胞学制片联合苏木素-伊红染色能有效提高涂片质量及宫颈上皮异常检出率，在宫颈癌筛查中具有重要应用价值。

【关键词】

宫颈癌;液基细胞学;沉降式制片;苏木素-伊红染色

宫颈癌是我国女性生殖系最常见的恶性肿瘤，流行病学统计显示，年新发病例约14万，占世界患者总数的35%左右，死亡超过5万，约占女性恶性肿瘤死亡人数的20%，是威胁我国女性健康与生命的重要疾病[1]。本病早期治疗收效理想，但宫颈癌早期缺乏特异性症状和体征，容易被忽视，因此，早期发现和诊断成为临床诊治的关键。液基细胞学基于人体组织正常脱落细胞进行疾病诊断，能够利用中介液体有效去除标本中的干扰成分，近年用于宫颈癌筛查中，在提高诊断率方面发挥了重要作用[2]。笔者现对基细胞学有效制片及染色方法进行分析探讨，旨在为提高宫颈癌筛查效果提供依据参考，报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

随机从2018年1月至2018年12月本院行宮颈癌筛查的受检者中择取10500名，取受检者宫颈细胞样本为研究对象，分别接受液基细胞学检查（研究组）与宫颈涂片检查（对照组）。标本来源：妇科门诊6300例，体检4200例。

1.2方法

1.2.1研究组取样避开经期，停止性生活、阴道冲洗及用药3d以上。受检者膀胱截石位，常规清洁消毒后，置入一次性宫颈刷至宫颈口，旋转数圈，刮取宫颈分泌物，置于细胞保存液中，密封送检。实验室内，标本常规排序并编号，采用泰普沉降式制片，混匀器充分振荡后，上机离心5min，离心速率2000r/min，弃上清液，取适量底部与侧壁样本，自然沉降约10min，吸取底部沉淀液制作薄层涂片，常规脱水、固定，行苏木素-伊红染色（HE染色）。涂片染色步骤：蒸馏水5min;苏木精液染色5min;蒸馏水冲洗1～3s，稍洗去染液;1%盐酸乙醇1～3s，退去多余颜色;蒸馏水彻底冲洗;0.5%伊红液染色1～3min;蒸馏水稍洗1～2s。染色完成后，乙醇梯度脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

1.2.2对照组取样前准备同研究组，受检者膀胱截石位，刮取宫颈适量组织样本，均匀涂于载玻片上，乙醇固定后，行巴氏染色。

1.3观察指标与评价标准

镜下观察两组制片，评价质量，比较细胞学检查结果。样本评价依据TBS分级系统，统计标本质量满意度以及宫颈上皮异常检出率。标本质量评价标准：涂片有形态完好清晰的鳞状上皮细胞超过8000个，覆盖面不低于10%，有移行区细胞成分或2团及以上宫颈管柱状上皮细胞团，每团细胞数量5个及以上——满意;涂片中形态完好清晰的鳞状上皮细胞不足，未至上述标准，或存在明显细胞重叠、其他细胞过多等，导致超过75%的上皮细胞被覆盖而难于观察——不满意。TBS标准将上皮细胞分为正常（NILM）、非经典鳞状细胞（ASC）、低度鳞状上皮内病变（LSIL）、高度鳞状上皮内病变（HSIL）、鳞状细胞癌（SCC），本研究拟定以LSIL及以上分类为异常。

1.4统计学方法

以SPSS 21.0软件统计分析所得数据，计量资料采用（±s）表示，行t检验;计数资料以%表示，行χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

研究组标本满意度高于对照组，差异有统计学意义。见表1。基于研究组制片方法，受检者宫颈异常上皮检出率显著高于对照组，差异有统计学意义。见表2。

3讨论

细胞学检查是临床诊断宫颈癌常用方法。既往，临床使用传统宫颈刮片，以刮板、棉签取材，获取样本范围小，存在取材不全的问题。另外，血液、宫颈分泌液等异物混杂和覆盖，常导致标本细胞重叠，导致制片质量下降，影响临床观察与诊断[3]。液基细胞学检查以专用宫颈刷取材，宫颈脱落细胞收集全面，加之采用薄层细胞检测系统检查，检测前中介液体去除干扰成分，涂片细胞重叠少，清晰度高，质量好，大大提高了诊断效果，现已广泛应用于宫颈癌筛查中[4]。

目前，临床可行液基细胞学制片技术有多种，本研究采用沉降式技术制片，其制片原理为密度分层与重力自然降沉，能够有效去除杂质，更加有效地获得病变细胞，并达到薄层制片的效果[5]。另外，自然沉降能够最大可能地减少器械操作对细胞组织的影响和破坏，对保留鳞状上皮细胞形态与完整性方面具有积极作用，更利于临床观察。液基细胞学诊断宫颈癌，关键在于观察细胞形态及细胞核的大小、结构及染色深浅。HE染色是液基细胞学常用染色方法，其主要原理为不同组织和细胞的不同成分对苏木精与伊红的亲和力与染色性质存在差异。经苏木精染色后，细胞核着清楚的深蓝色，其他成分驼色，再利用伊红染色后，胞浆不同成分呈现不同程度的粉红色，能够很好地勾勒和显示病变组织形态及结构[6]，对提高宫颈异常检出率具有重要意义。

综上所述，沉降式液基细胞学制片联合苏木素-伊红染色能有效提高涂片质量及宫颈上皮异常检出率，在宫颈癌筛查中具有重要应用价值。

参考文献

[1] 庄粤冰，潘雪萍，陈瑞兴，等.p16INK4a免疫细胞化学染色在宫颈癌筛查中的作用[J].深圳中西医结合杂志，2018，28（12）：6769.

[2] Tripathy K，Mishra A，Singh A，et al.Immunocytochemistry using liquid-based cytology： A tool in hormone receptor analysis of breast cancer[J].Journal of Cytology，2018，35（04）：260264.

[3] 王艳.宫颈癌筛查TCT细胞学检查与传统巴氏染色法的比较[J].世界最新医学信息文摘，2018，18（08）：108，111.

[4] 金宁，王焱，熊林，等.沉降式液基细胞技术和传统涂片在体液细胞学检查中的应用比较[J].世界最新医学信息文摘，2017，17（66）：56，13.

[5] 王珑，吴霞，谢爱华，等.在宫颈癌筛查中液基细胞学制片方法及染色法探讨[J].实验与检验医学，2017，35（04）：532535.

[6] 贺德智.沉降式液基细胞学制片质量12000例分析[J].现代医药卫生，2016，32（14）：22232225.