Piwil2在三阴性乳腺癌中的表达及临床意义分析

刘起胜 徐妮为 邹艳 黄旭 徐筱红

【摘要】 目的：探讨Piwil2在三阴性乳腺癌中的表达及临床意义。方法：收集本校附属医院病理科确诊为三阴性乳腺癌的40例患者作为观察组，另选40例非乳腺癌患者作为对照组，对所有患者的Piwil2表达情况进行比较，并对Piwil2在不同病理分期三阴性乳腺癌中的表达进行观察。结果：Piwil2在三阴性乳腺癌中的阳性表达率为82.50%，对照组为7.50%，差异有统计学意义（P<0.05），TNM分期越高，患者Piwil2阳性表达率越高;Pearson相关性分析显示，Piwil2与三阴性乳腺癌TNM分期呈正相关（r=0.756，P<0.05）。结论：Piwil2与三阴性乳腺癌的肿瘤细胞生长增殖呈正相关，可为有效分子靶向治疗乳腺癌提供参考依据。

【关键词】

三阴性乳腺癌;Piwil2;阳性表达

三阴性乳腺癌是乳腺癌中的常见类型，主要指孕激素受体、雌激素受体及人表皮生长因子受体均为阴性的乳腺癌，该病具有侵袭性强、恶性程度高等特点，严重威胁患者身心健康，目前是乳腺癌研究领域的热点课题[1]。三阴性乳腺癌的治疗多样化，靶向治疗是目前的主要方向，随着研究的深入，越来越多的基因、蛋白质被人们认识，Piwil2便是其中之一。本研究分析Piwil2在三阴性乳腺癌中的表达及临床意义，以为靶向治疗提供参考，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

收集本校附属医院病理科确诊为三阴性乳腺癌的40例患者作为研究对象，分为观察组，另选40例非乳腺癌患者为对照组。观察组年龄26～67岁，平均年龄（42.37±6.42）岁;TNM分期为Ⅰ期11例，Ⅱ期21例，Ⅲ期8例。对照组年龄25～69岁，平均年龄（43.05±6.18）岁。本研究经院伦理委员会批准，患者均接受根治性手术，术前未接受放化疗，无其他遗传性疾病、恶性肿瘤，未发生远处转移。

1.2方法

仪器用具包括：石蜡切片机、BX51显微镜、显微摄像系统、自动脱水机、自动包埋机、移液器、湿盒等。试剂包括：Piwil2免疫组化试剂盒、酸性苏木素染色剂、AEC显色试剂盒等。以免疫组化法进行，采用SP三步法：1）切片脱蜡至水;2）抗原修复;3）0.3%H2O2处理切片10～20min;4）PBS洗3次，1min/次;5）加入血清孵育20min;6）摔干血清，加入一抗60min;7）PBS洗3次，2min/次;8）加入二抗孵育15min;9）PBS洗3次，2min/次;10）加入三抗，孵育15min;11）PBS洗3次，2min/次;12）AEC孵育切片5～10min;13）PBS洗，水洗;14）苏木素染核5～10min;15）水洗，返蓝并封固。

1.3结果判断

在光镜下形态学观察，每张切片随机选5个视野，每个视野计数100个细胞，根据染色强度计分为0～3分，分别对应无色、淡黄色、棕黄色及棕褐色，根据阳性细胞所占半分比计分0～4分，分别对应<5%、5%～24%、25%～49%、50%～74%、≥75%。阴性（-）为0～1分;弱阳性（+）为2～3分;阳性（++）为4～5分;强阳性为（+++）。

1.4统计学方法

采用SPSS 18.0软件进行统计学处理，采用χ2检验及Pearson相关性分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1Piwil2在三阴性乳腺癌中的阳性表达情况

Piwil2在三阴性乳腺癌中的阳性表达率为82.50%（33/40），对照组为7.50%（3/40），差异有统计学意义（χ2=45.454，P<0.05），TNM分期越高，患者Piwil2阳性表达率越高。见表1。

2.2Pearson相关性分析结果

Pearson相关性分析显示，Piwil2与三阴性乳腺癌病理分期呈正相关（r=0.756，P<0.05）。

3讨论

三阴性乳腺癌通常发生于50岁以下的年轻女性，常伴有远处转移，致死率高，该乳腺癌类型不表达激素受体和Her2，无法实施内分泌治疗或抗Her2治疗，化疗是主要治疗选择，不过三阴性乳腺癌细胞对化疗药物具有普遍耐药性，因此传统化疗方案整体疗效较差，针对化疗耐药的三阴性乳腺癌患者，分子靶向治疗受到广泛关注[2]。

分子靶向治疗是以肿瘤细胞过度表达的某些基因和蛋白分子为基础，目前在三阴性乳腺癌中已经发现一些基因和蛋白分子存在阳性表达的情况，有研究显示，P53在三阴性乳腺癌中阳性表达率明显高于非三阴性乳腺癌，miR93表达水平也明显比非三阴性乳腺癌高，P53、miR93阳性者通常比阴性者更容易发生转移等情况，预后效果明显降低[34]。近年来Piwil2也开始受到临床关注，其属于Argonaute家族的PIWI亚家族，位于染色体8p21.3，约有23个外显子编码，973个氨基酸。有研究发现，Piwil2表达增加可使stat3和Bcl基因表达上调，对P53蛋白表达进行抑制，而且可和NFKB共同表达在细胞核中，促进肿瘤恶性增殖，而对Piwil2表达进行抑制有助于恢复P53水平，减少肿瘤细胞G2/M期细胞，从而对肿瘤增殖进行有效抑制[5]。也有学者发现Piwil2在DNA修复中有重要促进作用，通过参与DNA修复发挥抑癌基因作用[6]。

目前关于Piwil2在许多恶性肿瘤中阳性表达情况的研究报道已有不少，但其在三陰性乳腺癌中阳性表达情况尚不明确。本研究通过分析发现，Piwil2在三阴性乳腺癌中的阳性表达率为82.50%，明显高于非乳腺癌患者，且三阴性乳腺癌病理分期越高，其阳性表达率也越高。Pearson相关性分析显示，Piwil2与三阴性乳腺癌病理分期呈正相关。由此可见，Piwil2表达水平对评价三阴性乳腺癌恶性程度可能存在参考价值，其可能成为分子水平治疗三阴性乳腺癌的靶点。

综合上述，Piwil2与三阴性乳腺癌的肿瘤细胞生长增殖呈正相关，可为有效分子靶向治疗乳腺癌提供参考依据。

参考文献

[1] 吴珏堃，熊志勇，阮莹，等.DLL1基因在乳腺癌及三阴性乳腺癌中的表达及其临床意义[J].实用医学杂志，2018，34（20）：34063409.

[2] 杨帆，李长天，窦龙涛，等.三阴性乳腺癌分子靶向治疗的研究进展[J].医学信息，2016，29（13）：3334.

[3] 程维刚，刘九洲，靳梦琳，等.三阴性乳腺癌中p53蛋白产物的表达及其临床意义[J].中华实验外科杂志，2016，33（04）：939941.

[4] 石文龙，巫姜，孟庆杰，等.miR34c3p与M2型肿瘤相关巨噬细胞在三阴性乳腺癌中的表达及意义[J].现代肿瘤医学，2019，27（01）：48.

[5] 冯定庆，闫克芹，张筱，等.Piwil2调控宫颈癌细胞恶性生物学行为的机制探讨[J].中国癌症杂志，2017，27（12）：921927.

[6] 杨金平.Piwil2与肿瘤干细胞放射耐受性的研究进展[J].现代医药卫生，2017，33（06）：856858.