青海省富硒产业园农产品中硒含量的研究进展

陈秀娜 王力君 韩永辉

摘      要：以青海省海东市富硒产业园区农产品（鸡蛋、甜瓜、菜籽、清油等）为样本，采用氢化物原子荧光法来测定硒的含量， 研究了富硒饲料对鸡蛋中硒含量的影响。通过给相同状态的鸡群喂以不同天数和不同配方的富硒饲料，收集鸡蛋，比较它们的硒含量测试结果。通过实验选择合适的配方和喂养天数，为养鸡用户科学养鸡提供理论依据。采用氢化物原子荧光法测定产业园区不同的样本，所得硒的曲线线性良好，检出限为0.017 mg/kg，该方法的准确度和精密度都较好，RE为0.77%～4.76%，RSD在0.16%～3.59%之间。通过对不同样本加标测定其回收率，所得回收率在95.0%～102%之间。

关  键  词：农产品; 鸡蛋; 原子荧光; 富硒饲料

中图分类号：O433.4      文献标识码： A       文章编号： 1671-0460（2019）10-2328-04

Abstract： The selenium contents of agricultural products （eggs，melon，rapeseed，oil，etc.） from the selenium-rich industrial park in Haidong city of Qinghai province were determined by hydride atomic fluorescence method. The effect of selenium-rich feed on selenium content in the egg was studied. Chickens in the same state were fed selenium enriched diets with different formulations and different days.At the same time， eggs were collected，and their selenium test results were compared. The proper formulation and feeding days were determined through experiments， which can provide theoretical foundations for chicken farmers to raise chickens scientifically. In this paper， hydride atomic fluorescence method was used to determine different samples in the industrial park. The obtained selenium curve was linear with a detection limit of 0.017 mg/kg. The accuracy and precision of this method were good， with RE ranging from 0.77% to 4.76% and RSD ranging from 0.16% to 3.59%.The recovery rate was 95.0%～102% in different samples.

Key words： Agricultural products; Eggs; Atomic fluorescence; Selenium-rich feed

硒是自然界中廣泛分布的一种准金属元素，也是人体和动物生命所必需的微量元素之一，能提高人体免疫力，具有减轻和缓解重金属毒性的作用 [1]。硒缺乏或过量都会导致人和动物产生疾病[2]。人体缺硒会造成大骨节病、癌症、心血管疾病、克山病、白内障、高血压和甲状腺肿大等多种疾病[1]。但是硒摄入过量也会导致人体中毒、出现指甲脱落、脱发等[2]。研究发现缺硒会造成器官机能失调，适量补硒可以防止心血管疾病、抗癌等。人体中的硒主要通过日常饮食获得，因此农产品中硒的含量的高低直接影响人们日常硒含量的摄入量。

近几年来，富硒食品例如富硒鸡蛋、富硒鸡肉、富硒大蒜、富硒蔬菜等被人们炒的火热，富硒产业也迎来了发展的热潮[3，4]。通过生物学方法生产富硒食品是一种安全有效的方法，主要包括：微生物富集法、植物转化法和动物转化法三种方法，其中动物转化法是采用含硒量较高的饲料喂养动物以生产富硒类产品[5]。

目前硒含量的测试方法主要有电化学法、气相色谱法、比色法、中子活化法、原子吸收法等。这些方法在测定中均存在一些缺点，例如比色法灵敏度低，试剂不稳定;电化学法受干扰严重;中子活化法所需设备要求较高;氢化物原子吸收法灵敏度较高，但是线性范围较窄，样品用量大。氢化物原子荧光光谱法选择性强、灵敏度高、线性范围宽[6，7]。因此本文主要采用动物转化法来研究富硒饲料对鸡蛋中硒含量的影响。采用原子荧光光谱法[8，9]来测试农产品中硒的含量，通过给同样状态的鸡群喂以不同天数和不同配方的富硒饲料，选择合适的配方和喂养天数，为养鸡用户科学养鸡提供理论依据。

1  实验部分

1.1  仪器与试剂

（1）AFS-8330双道原子荧光光度计（北京吉天公司）配硒空心阴极灯;

（2）MARSXPress微波消解仪（美国CEM公司）;

（3）JYL-C03V食品粉碎机（九阳）;

（4）电子天平（BSA124S）;

（5）硒标准溶液：100mg/L（国家标准物质中心）;

（6）20%盐酸（优级纯）;

（7）硝酸（优级纯）;

（8）高氯酸（优级纯）;

（9）过氧化氢（优级纯）;

（10）硼氢化钾（优级纯）;

（11）氢氧化钾（优级纯）;

（12）一级水。

1.2  仪器工作参数

测试前，先将仪器预热足够长的时间，使仪器的灵敏度和稳定性等参数达到最佳状态，其余的优化后的仪器参数见表1。

1.3  实验方法

1.3.1  试样制备

青海省海东市平安富硒园区鸡蛋、甜瓜、菜籽、清油若干，取不同配方（1-4）和不同喂养天数（5，10，15，20）的鸡蛋，将鸡蛋壳敲碎，倒出蛋清和蛋黄，搅匀，将甜瓜和菜籽用食品粉碎机分别粉碎，备用。

1.3.2  实验过程

称0.2～0.5 g样品于微波消解管中，加入10 mL硝酸，2 mL双氧水，静置过夜。然后在120 ℃加热保温30 min，之后盖上内塞和外塞放入微波消解仪中，设定消解程序。微波消解程序设定如下：

step1.最大功率1 600 W（90%），以10 ℃/min速率到100 ℃，保持10 min;

step2.最大功率1 600 W（90%），以5 ℃/min速率到150 ℃，保持10 min;

step3.最大功率1 600 W（90%），以5 ℃/min速率到190 ℃，保持40 min。

消解完毕后，将消解管中的溶液转移至干净的100 mL烧杯中，并用蒸馏水冲洗管壁，加入1 mL高氯酸。将烧杯置于电热板上低温加热，直至高氯酸白烟冒出，取下，放涼，加入5 mL盐酸，再将此溶液置于电热板上低温加热至溶液产生泡泡后，将六价硒还原成四价硒，取下，转移至10 mL比色管中，定容至刻度并摇匀，同时做试剂空白实验。在AFS-8330原子荧光光度计上测定硒的含量。

1.3.3  实验结果测试

以20%的盐酸溶液为载流，硼氢化钾碱溶液（2%）为还原剂，连续用标准系列的零管进样，待读数稳定后，将硒标准溶液按照浓度由低到高，分别测试，测定其荧光强度，以质量浓度为横坐标，荧光强度为纵坐标，绘制标准曲线。在此仪器条件不变的情况下，分别测试空白溶液和试样溶液的荧光强度，并与标准系列比较定量结果。试样中硒的含量以质量分数ω（Se）计，单位以mg/kg表示，计算公式如下：

ω（Se）=（ρ1-ρ0）×V/（m×1 000）

式中：ρ1—从校准曲线上查得试样溶液中的硒量，ng/mL;

ρ0—从校准曲线上查得空白溶液中的硒量，ng/mL;

m—试料质量， g;

V—试样定容体积， mL;

1 000—换算系数。

2  结果与讨论

2.1  硼氢化钾溶液浓度的选择

硼氢化钾溶液是常用的还原剂之一，当硼氢化钾溶液浓度过低时，其还原能力差，反应速度慢，灵敏度低[6]，不能很好的将六价硒还原成四价硒，导致测试结果偏低。当硼氢化钾溶液浓度过高时，产生过量的氢气会稀释硒的氢化物，导致灵敏度下降[6]，影响测试结果。实验结果表明：当硼氢化钾溶液的质量浓度在2%～5%之间时，硒的荧光强度值趋于相对稳定，故本文选择硼氢化钾溶液的浓度为2%。

2.2  标准曲线的绘制

取100 mg/L的硒标准溶液用20%的稀盐酸逐级稀释到10 ng/mL的标准溶液，分别配制成0.25、0.50、0.75、1.00、2.50、5.00、10.0 ng/mL等不同浓度水平的标准系列，以硒标准溶液浓度为横坐标，荧光值为纵坐标，绘制校准曲线，校准曲线如图1所示。

2.3  方法检出限

鉴于氢化物原子荧光光谱法测试硒已经是非常成熟的方法，本文采用国家一级标准物质GSB24（河南小麦）按照前文所述实验条件平行处理7次，以7次的测定结果计算检出限，结果见表2。通过表2可以得知，该方法的检出限为0.017 mg/kg，测定值均在标准推荐值范围内。

2.4  方法准确度和精密度

本文采用国家一级标准物质GSB3、GSB13、GSB21、GSB26作为监控样，按照前文所述的实验条件处理样品后，按照表1的条件平行测试7次，实验测试结果见表3。通过表3可见，该方法的准确度和精密度都较好，RE为0.77%～4.76%，RSD在0.16%～3.59%之间，测定值均在标准推荐值范围内。

2.5  配方的选择

选择长势相同的鸡群分别按照配方1、配方2、配方3和配方4喂养相同的天数，其中选取一组普通喂养（即不添加富硒饲料），收集鸡蛋，经过消解处理后上机测试。经过测试发现，普通组鸡蛋中硒也有检出，只是含量较配方鸡蛋略低，测试结果见表4。通过表4可以发现用配方2饲养的鸡中的鸡蛋硒含量最高，故选择配方2喂养鸡群。

2.6  喂养天数的选择

选择长势相同的鸡群按照配方2分别喂养0、5、10、15、20 d，收集鸡蛋，经过消解处理后上机测试，测试结果见表5。通过表2可以发现喂养天数在10和15 d时较为合适，考虑到富硒饲料的价格成本问题，以及人体吸收等综合因素，建议选择喂养10 d收集鸡蛋。

2.7  实际样品的测定

选取园区中鸡蛋、甜瓜、菜籽、清油等不同样品，按照前文所述的实验方法进行实验，同时做加标回收实验，实验测试数据见表6。回收率在95.0%～102%之间，结果令人满意。

3  结束语

本文采用氢化物原子荧光法测定产业园区不同的样本，所得硒的曲线线性良好，检出限为0.017 mg/kg，该方法的准确度和精密度都较好，RE为0.77%～4.76%，RSD在0.16%～3.59%之间。通过实验，选取配方2和喂养天数10天为最佳。通过对富硒产业园区的不同样本的加标回收实验，所得回收率在95.0%～102%之间。

参考文献：

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[3]王燕，陈秀娜，张啟云，等.青海省富硒产业园富硒农产品中有机氯农药残留分析[J].当代化工，2018，47（9）：1986-1989.

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