地克珠利防控泌乳母羊及其羔羊球虫病用药程序与效果研究

赵姗姗,李玉婉,史 柯,宁晓冬,李 丹,崔艳艳,闫亚群,菅复春,张龙现,王荣军,宁长申*

(1.河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002;2.河南省洛阳市洛龙区科学技术协会,河南 洛阳 471000;3.河南应用技术职业学院,河南 郑州 450042;4.海关总署风险防控中心(黄埔),广东 广州 510730;5.商丘师范学院,河南 商丘 476000)

羊球虫病是由艾美尔属球虫寄生于羊肠粘膜上皮细胞造成肠道损伤的原虫病,2～4周龄的哺乳羔羊易发病,一般多为亚临床症状,如腹泻、消瘦、生长受阻等,严重时动物发生急性肠炎而死亡[1-2]。病理切片可见肠上皮粘膜充血且有出血点,炎症细胞浸润明显,弥漫性回肠粘膜增厚和折叠,空肠远端区域淋巴结肿大,纤维组织增生等[3]。目前,羊感染的艾美尔球虫物种共有15个,潜伏期为2～3周[4]。由于球虫卵囊在高温、高湿的条件下易发生孢子化,所以该病一般在夏、秋季多发,导致幼畜死亡率升高、畜品质下降,给牧民造成严重的经济损失,因此亟需科学的防控技术以降低该病对养殖业的危害[5]。药物治疗是养殖场最常用的球虫病防控方法之一,建立最佳的用药程序进而有效防控羊球虫病对于畜牧业的发展至关重要[6]。

地克珠利(Diclazuril)作为低毒、高效广谱抗球虫药,已被广泛应用于球虫病的防治[7-9]。滥用Diclazuril易导致动物产生耐药性、延误病情和增加养殖成本[10]。因此,制定科学的用药方案,严格掌握Diclazuril应用的剂量和次数对于抗球虫病十分关键。本研究应用Diclazuril对自然感染球虫的妊娠母羊及其哺乳羔羊进行分组试验,根据球虫卵囊转阴率、减少率、抗不同种球虫效果及增重效益进行Diclazuril药效评估,从而选择最佳的用药程序,以期为防控妊娠母羊及其羔羊球虫病提供技术依据和方法。

1 材料与方法

1.1 供试药物及用法、用量

球毕特,100 g/瓶,含Diclazuril 1 g,购自河南新正好生物工程有限公司。用时,取本品1 g,加水10 mL,溶解混匀,按每千克体重1 mL的剂量经口灌服。

1.2 试验动物

24只妊娠母羊及51只哺乳羔羊，均由河南某农牧公司羊场提供。

1.3 粪便样品采集

对供试的妊娠母羊及其哺乳羔羊的直肠采集粪便,每只羊10～20 g,分别置于洁净塑料袋中，并记录羊只的耳号、放牧方式、用药情况、精神状态等信息；将采集的粪便样品带回河南农业大学寄生虫学实验室,置4 ℃冰箱内待检。

1.4 球虫卵囊检查、计数及虫种鉴定

检查粪便中的卵囊采用饱和盐水漂浮法;每克粪便中的卵囊数(oocysts per gram of feces, OPG)采用麦克马斯特计数法计数;依据相关文献[11-13]所描述的方法对球虫卵囊进行收集、培养和种类鉴定,用Motic显微图像分析处理系统测量并显微拍照。

1.5 试验设计

选择经粪检确诊自然感染球虫、生产期相近的24只妊娠母羊，将它们随机分为4组,每组6只;第1～3组为药物试验组,按照表1设计的用药程序进行投喂,第4组为不用药对照组。每间隔1周对供试羊进行粪便采集,应用饱和盐水漂浮法检查粪便中有无球虫卵囊并进行OPG计数。在试验过程中羊只的饲养管理条件均相同；详细记录试验羊的精神状态及不良反应；在试验结束后对动物进行驱虫。

表1 不同试验组的Diclazuril的用药程序

1.6 疗效考核

1.6.1 观察临床症状 在试验期间详细记录供试羊每日的饮食状况、精神状态、不良反应等。

1.6.2 评定球虫卵囊的方法 根据卵囊转阴率、减少率考核用药前和用药后第7、14、21、28、35天的药物抗球虫效果;分别收集用药前和用药后粪便样品中的球虫卵囊并进行孢子化培养,根据孢子化卵囊鉴定虫种，评定药物对不同球虫种类的防控效果。相关指标的计算公式如下：

1.6.3 增重效益的评判 分别对各组哺乳羔羊的初生龄、2周龄、4周龄进行称重,计算各组在4周龄时的平均增重率，评判羊的增重效益。

1.7 统计学分析

对试验数据进行Pearson卡方检验,当P<0.01时数据间差异极显著,P<0.05时数据间差异显著,P≥0.05时数据间无统计学意义,即数据间差异不显著[14]。

2 结果与分析

2.1 供试羊健康状态的评估结果

供试母羊及其羔羊在用药期间未出现不良反应,饮食状况和精神状态正常，表明本试验所用药物及用药程序对羊不产生副作用。

2.2 用药后球虫卵囊评定结果

2.2.1 卵囊转阴率 根据本试验设计的用药程序对供试母羊进行投喂,根据母羊用药后球虫卵囊转阴率评定Diclazuril的药效。结果(表2)显示, Diclazuril 1～3组母羊的球虫卵囊转阴率均高于对照组,差异极显著(P<0.01)，表明在本试验中Diclazuril可有效降低球虫卵囊数量,具有明显的驱虫效果。

表2 供试母羊的球虫卵囊转阴率

注：“a”表示与不用药对照组差异极显著(P<0.01)。

2.2.2 卵囊减少率 根据母羊用药前后的OPG值计算各组母羊的卵囊减少率,评定Diclazuril的药效。结果(表3)显示:各用药组母羊在用药后7 d、14 d的卵囊减少率均明显高于对照组,差异极显著(P﹤0.01);用药后35 d,地克珠利1组与不用药对照组相比,差异显著(P<0.05),地克珠利2组和地克珠利3组与不用药对照组相比差异极显著(P<0.01);用药后49 d,地克珠利2组与不用药对照组相比差异不显著(P>0.05),地克珠利3组与不用药对照组相比差异极显著(P<0.01)。上述结果表明Diclazuril 3组对卵囊减少率的效果最为显著。

表3 供试母羊球虫卵囊减少率

2.2.3 Diclazuril抗不同种球虫的效果 通过培养和鉴定各组羊用药前和用药后14 d的球虫卵囊,检测各组母羊给药前后不同种球虫卵囊感染情况。结果(表4)显示：用药前共检测到5种艾美尔球虫(如图1所示),分别为Eimeriamarsica(感染率34.33%，下同)、E.granulose(46.50%)、E.parva(9.00%)、E.ahsata(7.50%)、E.pallida(2.67%)；在用药后第14天,1～3组仅检测到2种艾美尔球虫卵囊,分别为E.marsica(62.67%)、E.granulose(37.33%)；不用药对照组在用药前和用药后14 d均检测到4种球虫卵囊。表明Diclazuril可有效防控E.parva、E.ahsata和E.pallida。

表4 供试母羊受不同种球虫卵囊的感染率%

2.3 增重效益评判结果

通过对各组哺乳羔羊进行称重计算平均增重率,评价不同用药程序对哺乳羔羊增重效果的影响。结果(表5)显示：Diclazuril 3组的哺乳羔羊在4周龄的平均增重率高于不用药对照组,差异显著(P<0.05);各用药组哺乳羔羊的平均增重率与对照组差异不显著(P>0.05)。表明在Diclazuril 3组的用药对哺乳羔羊增重效果最显著。

1:马尔西卡艾美尔球虫(E.marsica);2:颗粒艾美尔球虫(E.granulose);3:小型艾美尔球虫(E.parva); 4:阿撒他艾美尔球虫(E.ahsata);5:苍白艾美尔球虫(E.pallida)。

图1 湖羊孢子化艾美尔球虫卵囊图(400×)表5 不同用药组哺乳羔羊增重效果

注：“b”表示与不给药对照组比较差异显著(P<0.05)。

3 讨论

球虫病作为危害羊最严重的肠道寄生虫病之一,在养殖户或集约化养殖场均普遍发生,其防控形势依然严峻。采取提供充足的营养、加强饲养管理、减少应激反应等措施对于降低球虫病的危害有一定作用,但不能完全控制球虫病的发生[15-16]。目前,药物是防治球虫病的主要途径,但药物使用不当易导致耐药性的发生,造成严重的经济损失[17]。因此,制定科学的用药方案,提前使用抗球虫药物对妊娠母羊进行防控,不仅可有效降低球虫病对母羊的危害,同时还可以保证幼龄羊的正常生长[18]。

本试验选择Diclazuril作为抗球虫药,根据设计的Diclazuril用药程序分别对24只经粪检确诊的自然感染球虫的妊娠母羊及其羔羊进行药效试验。在试验期间,供试羊无不良症状;通过应用卵囊转阴率、减少率评定Diclazuril对用药后供试羊球虫的防治效果,结果表明,用药后在1～3试验组母羊卵囊转阴率、卵囊减少率均高于不用药对照组,说明Diclazuril防控羊球虫的效果比较显著，且在母羊产前1周和产后1周,按1 mg/kg剂量投服Diclazuril,每天1次,连用2 d,对母羊及其哺乳羔羊的自然感染球虫的防控效果最好;通过鉴定各组羊用药前和用药后14 d的球虫卵囊评定药物对不同种球虫的效果,表明Diclazuril可有效防控E.pallida、E.parva和E.ahsata，且能保持较长时间的药效,这与周变华等[19]报道的“Diclazuril对各阶段球虫的防控效果不同”一致;Wang等[20]指出Diclazuril可显著提高鸡的增重效益。在本研究中Diclazuril 3组用药程序对哺乳羔羊的增重效益最好。综上所述,Diclazuril 3组用药程序对母羊及其哺乳羔羊的自然感染球虫的防控效果最好，且对哺乳羔羊的增重效果最显著。本试验研究结果可为防控妊娠母羊及其羔羊的球虫病提供技术支撑。