中药西红花的真伪鉴别研究
2019-11-29沙妙清张艳秋朱丽红苏禄晖
刘 波,田 晖,沙妙清,张艳秋,杨 薪,朱丽红,苏禄晖,杨 意
(1.上海市医药学校,上海 200135;2.上海市浦东新区公路管理署,上海 200129)
1 引言
西红花(CrocisStigma),鸢尾科(Iridaceae)植物番红花(CrocussativusL.)的干燥柱头,具活血化瘀,凉血解毒,解郁安神之功效[1]。西红花为我国传统名贵中药材,其原植物番红花享有“植物黄金”的美誉,西红花不仅是天然的食品、色素、香料和化妆品原料,还是名贵观赏花卉,享有“最昂贵的香料”、和“红色的金子”的美誉,原产地中海,后东向克什米尔,西向西班牙,沿地中海地区扩散,主产地西班牙、希腊、法国、伊朗及中亚西亚一带,我国于20世纪70年代开始从国外引种栽培,目前有23个省份及地区引种成功,今主产地为上海[2~12]。近年来,西红花已被列为国家重点发展的39种中药之首[9,13]。因西红花产量极低,且资源有限,而市场需求量却相对较大,故其价格昂贵,市场上曾出现西红花掺伪品,且品类较较复杂,均应注意鉴别。
2 西红花正品的鉴别
2.1 性状鉴别
呈细丝状或线状,具三分枝,长约3 cm。色暗红,上部较宽且略扁平,顶端边缘齿状,不整齐,内侧具一短裂隙,下端或残留一小段黄色花柱;体轻,质松软,未见油润光泽,经干燥处理后质脆易断;气特异,微具刺激性,味微苦[1,14~22]。
2.2 显微鉴别
粉末色橙红。表皮细胞长条形(表面观),细胞壁薄,稍弯曲,其外壁有时呈乳头状或绒毛状凸出,表面可仔细观察到纤细纹理;其顶端表皮细胞呈绒毛状,直径约26~56 μm,表面纹理稀疏;草酸钙结晶存在于薄壁细胞中,为颗粒状、梭形、圆簇状及类方形,直径约2~14μm;环纹导管多见,细小,直径7.5~15 μm,聚集在花柱、柱头组织碎片内;花粉粒细小,圆球形,外壁近乎光滑,内含颗粒状物质[1,15~18,21]。
2.3 理化鉴别
(1)显色反应。取样品少量,置白瓷板上,加H2SO4试液1滴,试液显蓝色,后经紫色慢慢变成红褐色或棕色[1,14,17]。
(2)薄层色谱测定。取西红花20 mg,加甲醇试液15 mL,超声处理10min,静置,吸取上清液作为供试品溶液,按照《中国药典》项下薄层色谱法规定,乙酸乙酯-甲醇-水(100∶16.5∶13.5)作为展开剂进行展开,取出并晾干,分别于日光下和波长为365 nm的紫外灯下进行检视,出现3个连续的荧光斑点[1,17]。
(3)水试。取本品浸水中,可见橙色成直线下降,并慢慢扩散,水染成黄色,未见沉淀;柱头喇叭状,具短缝;短时间内以针拨之不破碎[1,14,18,21]。
(4)滴加碘试液。取粉末少许,滴加碘试液,真品不变色[14]。
(5)吸收度比值法。按照《中国药典》项下有关规定,照紫外-可见分光光度法,在波长458 nm条件下检查其吸光度,在波长分别为458 nm和432 nm条件下二者的吸光度之比应为0.85~0.90[1]。
(6)灰分测定。按《中国药典》项下规定,本品总灰分不得超过7.5 %。
此外,高效液相色谱法(如HPLC、HPLC-DAD方法、HPLC-MS/MS法等)气相色谱法、近红外光谱法、rDNA ITS序列与AS-PCR分子鉴别[4,23~31]等现代技术手段应用于西红花鉴别,均能快速、准确的鉴别西红花及其掺伪品,保障了用药安全。
3 常见伪品及其鉴别
3.1 红花的加工品
(1)性状鉴别。为西红花最常见的伪品。本品来源于菊科(Compositae)植物红花(CarthamustinctoriusL.)的干燥的不带有子房的管状花。本品长1~2 cm。表面色红或红黄。冠筒细长,其先端5分裂,裂片狭条状,长5~8 mm。聚药雄蕊5,筒状,色黄白;柱头长圆柱形,先端微分叉,质柔软,气微香,味微苦。气味重,与西红花区别明显[1,14,16~20,32]。
(2)显微鉴别。本品粉末色橙黄。花冠、花丝及柱头碎片多数;可见长管状分泌细胞,直径约5~66 μm,胞内充满分泌物,色黄棕至红棕。花冠顶端碎片表皮细胞外壁呈乳头状突起;柱头与花柱碎片上端表皮细胞为先端尖或者稍钝的圆锥状单细胞毛;花粉粒呈类圆形、椭圆形或橄榄形,直径约最大约为60 μm,外壁有时突起,齿状,萌发孔3个[1,14,16,18,23]。
(3)薄层色谱法。按照薄层色谱法(《中国药典》2015版项下规定),红花出现一个黄色斑点[18]。
(4)水试。取本品浸水中,水变成金黄色,滤过,滤液加醋酸试液使成酸性,即现红色沉淀[1,17]。
3.2 番红花雄蕊体及花柱经染色的加工品
(1)性状鉴别。番红花雄蕊体及花柱经染色的加工品,呈条形或线形,条形加工品呈对2分枝或不等 3分枝,扭曲成螺旋状,线形加工品细长,长1~6 cm,色棕红;气特异,味微涩苦[14,21~22,31]。
(2)显微鉴别。粉末在镜下观察,花粉纤维层细胞和花粉粒多数,色素颗粒及矿物碎块聚集,无柱头顶端绒毛状表皮细胞和草酸钙结晶[21,23]。
(3)理化鉴别。取样品浸水中,水变成黄色,未观察到下降的橙黄色直线,甲醇试液染成粉红色[14,21]。
3.3 浸取过的西红花
浸取西红花的有效成分后,以其完整柱头,经干燥、染色、整理而成。染色浸提过的西红花用水洗或煎煮立即褪色,变成黄白色;其它特征同正品西红花[17,20]。
3.4 莲须
(1)性状鉴别。本品呈线形,花药扭转,纵裂,长约1.2~1.5 cm,直径约0.1 cm,色淡黄或棕黄,花丝纤细,微弯曲,长1.5~1.8 cm,淡紫色;气微香,味涩[14,17,19,32~33]。
(2)显微鉴别。本品粉末色黄棕。花粉粒类球形或长圆形,直径约45~86 μm,具3沟,表面具颗粒网纹;表皮细胞为长方形、多角形或不规则形状,侧面观外壁突起呈乳头状;花粉囊内壁细胞多见,呈长条形,壁稍厚,其内充满黄棕色或红棕色物质;导管螺纹[14,17,19,32]。
(3)水试。取样品浸水中,无橙黄色呈现直线下降,水染成红色,雄蕊呈细丝状而非喇叭状[14,17]。
3.5 黄花菜的加工品
(1)性状鉴别。本品经切丝染色而成,通体为红色,未见黄色部分,无光泽[17,20,22]。
(2)水试。取本品浸水中,呈片状或丝状,水被染成红色,非喇叭状。
3.6 玉米花柱状及其加工品
(1)性状鉴别。为玉米花柱与柱头加工而成的团块,短线(或须)状,具细纵纹,柱头短,分裂,色深红或暗红棕,微有油润光泽,质柔软,具刺激性,微臭,味稍咸[14,17,19,21,22,32,34]。
显微鉴别 本品粉末色红棕。表皮薄壁细胞表面观细长条状,壁薄,顶面观为类方形,花粉粒类圆形、椭圆形或卵圆形,直径约60~100 μm,萌发孔1个,表面具少数疣状突起,导管环纹,油滴少数[14,21,34]。
理化鉴别 取本品适量,加H2SO4试液1滴,显暗紫色。取除色的玉米须适量,加H2SO4试液1滴,试液初显黄棕红色,最后变为棕褐色[14,19,21,34]。
(2)水试。取样品浸水中,无橙黄色成直线下降,水面现油滴,水染成红色,花柱非喇叭状[14,17,32]。
3.7 菊花的舌状花冠加工品
(1)性状鉴别。由众多扭曲的针状物集成的团块状,质疏松,深红色,长2~3 cm,花冠先端平展呈扁舌状,基部圆筒状,内藏先端2裂柱头,微见滑润光泽,气微香[14,17,22,32]。
(2)理化鉴别。取本品置纸上可见油斑;加碘液于团块上现蓝紫色[14,17,32]。
(3)水试。取本品浸水中,水面现油滴,水染变成棕色,针状物展开可见舌状花。花柱非喇叭状[14,17]。
3.8 尼龙纤维和淀粉加工品
(1)性状鉴别。呈短节状,长约0.5~10 cm,色暗红,上端较宽且略呈扁平状,顶端边缘不具齿状,较整齐,内侧具一条线形纹理,色橙黄,分叉,体轻,微现油润光泽,气特异,味咸[21]。
(2)显微鉴别。本品粉末色橙红。可见多数块状物,色橙红或橙黄,纤维交错成聚集成团块状,有的嵌入由糊化的淀粉粒与尼龙纤维组成的块状物中,遇碘液显蓝色[21]。
(3)理化鉴别。取样品浸水中,可观察到下降的橙黄色弯曲的线,并逐渐扩散,水染成黄色,可见下沉的块状物,且脱色显淡白色,短时间内以针拔之破碎成渣;取本品适量,置白瓷板上,加H2SO4试液1滴,显浅橙色,最后变成深橙黄色[21]。
3.9 纸浆与淀粉加工品
(1)性状鉴别。用纸浆、染料及油性物质加工而成。本品多成丝状,两侧平整光亮,表面红色或深红色,微见油润光泽,气微[14,19,22,32]。
(2)显微鉴别。本品镜下观,可见导管、纤维及薄壁细胞等,丝的中央有一条线,其周围现多数淀粉粒与脂肪油颗粒,油粒为黄白色[14,19,32]。
(3)理化鉴别。取本品,加碘试液,则团块变成蓝黑色[17,32]。
(4)水试。浸水中呈橙色,水面现少量油状物,其边缘不整齐,未见波状突起,宽端扁平而整齐,顶端非喇叭状;以针拨之易碎[14]。
3.10 印度西萌草加工品
(1)性状鉴别。本品以印度西萌草染上胶汁加工而成(鸡牛牌西红花)。本品条状,具红色粗梗,干燥且无光泽,无芳香气味[17,20]。
3.11 胡萝卜丝加工品
(1)性状鉴别。本为条状,呈两分枝,长约3 cm,暗红色,较扁平,顶端边缘呈齿状,整齐,多破碎,味微甜[17,35]。
(2)水试。取样品浸水中,水立即被染成橘黄色,产生沉淀[17]。
3.12 萝卜丝加工品
本品系萝卜切丝,染色加工而成。水试。取查品浸水中,微有黄色物释出,浸泡10 min后,水不变色,药材破碎后水则变成紫红色[35]。
3.13 掺杂矿物质或化学物质
掺以重晶石、黄粘土、白奎、硝酸铵及甘油等物质,用以改变外观性状或增重[17,20]。水试。样品水浸或现油迹,或产生细小沉淀[17,20]。总灰分均严重超标。
3.14 西红花中掺入栀子
据文献报道,应用HPLC色谱法,利用西红花特征图谱分析,可鉴别西红花中掺假栀子[31]。
4 结语
西红花因其名贵而伪劣品频现。近年来,随着国家监督力度的增大以及消费者鉴别能力的提高,纯粹造假的中药材已不多见,但掺伪品五花八门,非专业人员难以鉴别,且有些掺伪品常含有毒素成分,会对人体健康不利。对于专业从业人员,只要努力掌握西红花的性状鉴别特征,同时辅以显微鉴别方法、理化鉴别方法,必要时利用现代化分析技术及手段,均可正确辨出伪劣西红花,进而杜绝其进入市场。