Ael亚型引起产科备血困难2例

吴李萍，罗 敏，刘敏悦，卿克勤

(成都市第一人民医院检验科，四川成都 610041)

血型是人体稳定的遗传性状，正确的血型鉴定结果是临床安全用血的重要前提。输血技术的提升和广泛应用挽救了更多的生命，也促进了输血研究的长足发展，越来越多的血型亚型被发现，给临床输血提出新的挑战。随着国家二胎政策全面放开，高龄、瘢痕子宫、妊娠合并症等高危妊娠数量增加，产科和新生儿科输血风险随之增加，给输血带来了新的挑战。本科遇遗传因素引起血型Ael亚型导致产科备血困难2例，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 2例孕妇均在本院产科建卡，常规进行血型鉴定正定为O，反定为A型。孕妇1，女，32岁，G1P0，边缘性前置胎盘。基因鉴定血型为Ael04/O02，行剖宫产备血；孕妇2，女，19岁，G2P0。基因鉴定血型为Ael01/O02，顺产备血。

1.2试剂与仪器 ABO和RhD血型鉴定、不规则抗体筛查与交叉合血IgG凝胶卡购自Ortho-Clinical Diagnostics公司；抗-A、抗-B标准血清购自上海血液生物医药有限责任公司；抗-A1、抗-H血清购自上海血液生物医药有限责任公司；A、B、O反定型红细胞、抗体筛查细胞购自长春博德生物医药有限责任公司，均在有效期内。

1.3方法 血清学血型鉴定、吸收放散试验参考操作规程和文献[1-2]。血型基因鉴定送至中国医学科学院输血研究所检测。

2 结 果

2.1血型正反定型 用血型卡鉴定孕妇血型，两者血型均为正定O反定A，结果见表1。进一步用试管法在3组温度(4 ℃、室温、37 ℃)条件下验证血型。正定型：将孕妇红细胞用生理盐水洗涤3次，分别与抗A、抗B血清反应；反定型：2例孕妇血清与A、B、O试剂细胞反应，同时设置自身对照，均为正定O反定A，结果见表2。

2.2吸收放散试验 以试剂O型红细胞做对照，孕妇压积红细胞洗涤3次后与抗-A血清混匀于4 ℃冰箱吸收1 h，吸收后的孕妇红细胞进行直接抗人球蛋白试验，结果为阴性；洗涤吸收后细胞保留末次洗液与A细胞和O细胞应检测，结果呈阴性；洗涤细胞与生理盐水混匀，56 ℃热放散10 min，离心获得放散液与A细胞和O细胞反应，结果显示A细胞反应呈强阳性，与标准O细胞反应呈阴性反应，提示孕妇红细胞上有A抗原，结果见表3。

表1 2例孕妇ABO、Rh血型卡鉴定结果

表2 2例孕妇ABO血型试管法检查结果

表3 2例孕妇ABO血型吸收放散检查结果

2.3基因鉴定 分别采集2例孕妇血液4 mL(乙二胺四乙酸二钾抗凝管2管)送至中国医学科学院输血研究所进行血型基因型检测，两者回报结果均为Ael亚型，孕妇1基因血型为Ael04/O02，孕妇2基因血型为Ael01/O02。

2.4临床备血 由于Ael亚型非常少见，临床输血最优选择为与Ael亚型相同红细胞血液制品输注；若血液中心无同型血液制品，临床用血选择备O型洗涤红细胞悬液，A型新鲜冰冻血浆。

3 讨 论

自1901年有研究者发现ABO血型系统以来，越来越多的血型抗原和亚型被鉴定和报道。血型是人体稳定的遗传性状，一个血型系统为一系列等位基因的产物，血型基因按孟德尔遗传规律独立遗传[2]。目前ISBT认定的抗原数量多达342个，其中303个归类于35个血型系统[3]。在人类遗传进化过程中，血型遗传物质改变常引起血型变异产生亚型，常导致血型鉴定困难或错误。

ABO血型系统是临床输血最为重要的血型系统，除常规A、B、O和AB血型外，还包含多种亚型，A型有A2、A3、AX、Ael等，B型有B3、BX、Bel等。其中，Ael亚型常因血型血清学鉴定为正定O反定A不一致被发现，经吸收放散试验可证实红细胞上有弱的A抗原，分泌型唾液中含H物质，不含A物质。Ael抗原在白种人中符合孟德尔遗传规律进行遗传，吸收放散试验为最佳检测方法，放散后最好采用抗-A，而不是抗-A1进行检测[4]。

早期研究者采用针对A型寡糖链反应的单克隆抗A抗体对Ael细胞进行标记，扫描免疫电镜观察发现不到5%的Ael细胞可鉴别标记的A抗原，其中一些显示极强的标记，解释了为什么Ael细胞能够吸收大量的抗-A而不被凝集[5]。也有研究者发现1例Ael02/O04，血清血型检测为典型的表型O，具有较强的抗A和抗B抗体。吸收放散试验并未检测到Ael抗原，而经直接测序分析证明为Ael02/O04[6]。随着分子生物学技术广泛应用，血型分子机制得以被阐述，Ael亚型的主要特征为插入与缺失突变[7-8]。由于突变产生转录物引起转录早期终止，导致在N端产生功能性Ael糖基转移酶缺失转录子在细胞中稳定表达促成了Ael-RBC的弱表达和弱凝集，且具有多态性[9]。国内关于Ael的报道常见于献血员血型鉴定、孕妇产检等，也验证了人群中Ael出现频率较低且存在多态性[10-14]。

本次实验中，2例孕妇均因产科建卡时血型鉴定正反不一致被发现。两者血型正定为O型反定为A型，血清学方法进一步鉴定符合Ael亚型反应格局，送基因鉴定证实为Ael亚型，基因型分别为Ael04/O02和Ael01/O02。临床输血最优选择同型红细胞血液制品输注，由于Ael亚型罕见，血液中心常无同型血液制品库存，产科备血选择备O型洗涤红细胞悬液，A型新鲜冰冻血浆。若提前知晓血型为Ael亚型的适龄女性，临床用血可能性较大时，条件具备则可以考虑提前保存自体血备用。值得注意的是，Ael血型母亲所生新生儿若有输血需求，应谨慎对待。理论上新生儿至少有1/2概率遗传到母亲的Ael血型基因，由于新生儿抗体尚未形成或抗体效价较低，通常只参考正定型结果，常规方法则不能被检出。临床工作中，Ael亚型和其他弱A亚型患者血型易被误定为O型，且交叉合血时与O型献血员相容无凝集，一旦输注O型血液制品尤其是血浆，可能产生严重输血反应；若作为供血者，被误定为O型的Ael血输入O型患者体内也可能导致严重的输血反应[15]。

在Ael亚型报道极少情况下，短期内2例孕妇血型鉴定为Ael亚型，为产科备血带来了新挑战。随着国家经济发展和全面放开二胎，孕妇高龄、瘢痕子宫及妊娠合并症较以往明显增加[16-18]，孕妇和新生儿输血需求相应增加。为保障安全用血，尤其是母婴患者用血安全，提倡孕期建卡时常规进行血型鉴定。在临床工作中，血型鉴定应十分重视血型正反定型，及时发现弱凝集和正反不一致情况。对血清学方法鉴定不明确的血型结果，必要时应进行分子生物学检查明确基因型，保障患者输血安全。