黑花生与红花生果实各部分硒含量的研究

徐 聪,杨 柱

(陕西省安康市农业科学研究所，陕西 安康 725021)

硒是一种多功能的生命元素，是人体必需的微量元素[1]，但是又不能自制，且无机硒不仅不易吸收，还易对人体造成毒害。因此通过植物将无机硒转化成有机硒进入食物链，是人类和动物摄入硒的重要来源，所以研究植物对硒的生物富集特点具有重要意义。

花生是我国主要的油料作物，营养价值比粮食高，含有大量蛋白质和脂肪，有“长生果”之称。花生果实各部分都是宝，果仁可食用，包衣和果壳均有药理作用[2]。为此，我们选择了花生为研究对象，采用微波消解-氢化物-原子荧光光谱法对样品进行测定，得出硒在不同品种的花生果实各部分的含量，为进一步的研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

全能型微波化学工作平台：TOPEX+(上海屹尧仪器科技发展有限公司)，智能控温电加热器：G-400(上海屹尧仪器科技发展有限公司)；原子荧光光度计：AFS-8220(北京吉天仪器公司)，硒编码特种空心阴极灯。硒标准溶液[GBW(E)080215]：100 μg·mL-1(国家标准物质中心)；硝酸：优级纯(成都科龙化工试剂厂)；盐酸：优级纯(洛阳昊华化学试剂有限公司)；30% 双氧水：分析纯(天津市科密欧化学试剂有限公司)；实验用水为优普纯水机制备的超纯水；器皿使用前用10% HNO3浸泡24 h，超纯水冲洗备用。

1.2 样品来源

黑花生和红花生均为陕西安康市农业科学研究所3号试验田所产。

1.3 实验方法

1.3.1 样品前处理 样品首先用清水冲洗去除泥沙，依次用纯水洗涤3次，超纯水冲洗2次，沥干；再将样品放置恒温干燥箱100℃烘至恒重，烘好后，取出放在干燥器中自然冷却；最后将样品分离为壳、花生仁、包衣三部分，分别研磨成粉末保存在干燥器中备用。

1.3.2 样品制备 称取0.2 ～0.5 g(精确到0.001 g)样品放入消解罐中，然后加入5 mL浓硝酸摇匀，放入G-400加热器中120 ℃预消解30 min后，取出冷却至室温加入1 mL 30%双氧水混匀，盖好密封盖放入微波化学工作平台中。根据样品选择合适的反应条件进行微波消解。降温至60 ℃取出消解罐转移到G-400加热器中120 ℃进行赶酸，约剩1 mL液体时取出冷却至室温，然后加入5 mL 6 moL·L-1的盐酸溶液，混匀后再放入G-400加热器中120 ℃进行还原反应，待黄烟散完出现白烟取出冷却至室温。用超纯水冲洗罐壁将内容物无损失的转入10 mL容量瓶中，定容、混匀待测。以同样步骤制备试剂空白[3]。

1.3.3 标准溶液的配制 分别准确吸取1 000 μg·L-1硒标准使用液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、3.0 mL置于100 mL的容量瓶中，用10% 盐酸溶液定容，配制成浓度为2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、20.0、30.0 μg·L-1的梯度标液，绘制标准系列，见表1。

表1 标准系列测定

1.3.4 仪器工作条件 主要有:

(1)微波化学工作平台设置。选择梯度升温法消解法。室温升到100 ℃保温3 min，再升到130 ℃保温3 min，再升到160 ℃保温3 min，最后升到200 ℃保温25 min。

(2)原子荧光光度计工作条件设置。负高压270 V；总电流80 mA；辅阴极电流40 mA；载气流量300 mL·min-1，屏蔽气流量800 mL·min-1；原子化器高度8 mm；测定方式：校准曲线；读数方式：Peak Area；测量方式：Std. Curve; 读数时间10 s，延迟时间1 s，重复次数2次；进样方式为手动进样[4～5]。

1.3.5 标准曲线的绘制 按1.3.4(2)中设定的仪器工作条件，将原子荧光分光光度计调到最佳状态，用2%硼氢化钾-0.5%氢氧化钾溶液(现配现用)作为还原剂，首先连续对10%的盐酸载液测定获得稳定的标准空白值，再测定梯度标液自动扣除标准空白值以获得相应的荧光强度。系统自动绘制标准曲线(见图1)，并算出回归方程式和相关系数。线性回归方程为y=93.018x+10.635，相关系数R2=1。

图1 硒的标准曲线

1.3.6 测定方法 按照仪器操作条件2%硼氢化钾-0.5%氢氧化钾溶液(现配现用)作为还原剂，10%盐酸做为载液，将样品溶液导入原子荧光光度计，测其荧光强度，由上面的线性回归方程及样品配制倍数计算出样品中硒的含量。

2 结果讨论

2.1 重复性实验

为了验证本实验方法的可靠性，用黑花生果仁和黑花生壳按1.3.2方法处理，按1.3.6方法重复测定5次，计算RSD值，结果见表2。

2.2 精密性实验

为了验证测量方法的可靠性，分别对黑花生果仁和黑花生壳测量了5次，计算RSD值，结果见表3。

2.3 回收率实验

分别对样品中微量元素Se进行加标回收，称取样品后加入硒标准溶液，按1.3.2方法处理，按1.3.6方法测定，测得加标回收率，结果见表4。

表2 重复性实验结果

表3 精密性实验

表4 加标回收结果

2.4 花生果实各部分硒含量测定

结果见表5。

表5 红花生、黑花生果实各部分硒含量

3 结论

3.1 实验方法的讨论

采用微波消解-氢化物发生-原子荧光光谱法的方法测定花生各部分中微量元素硒的含量，重复性实验结果RSD值在6%以内，仪器精密性测试RSD值在2%以内，回收率为97%～108%。此方法具有操作简单易行、干扰少、灵敏度高、回收率好的特点。应该注意的是硒的熔点只有217 ℃，沸点为685 ℃，因此在实验过程中要严格控制温度，避免实验过程中造成硒的损失，导致实验结果偏低，赶酸温度和还原温度控制到120 ℃为宜。

3.2 实验结果的讨论

(1)从结果可以看出，不管是红花生还是黑花生，各部分的总硒含量顺序一致，都是果仁>壳>包衣。

(2)相对于红花生，黑花生的硒含量更高。黑花生的壳含量大概是红花生壳的1.3倍，黑花生的果仁含量大概是红花生果仁的1.5倍，黑花生的包衣含量大概是红花生包衣的1.8倍。由于在同一块试验田里生长，生长大环境相同，所以从结果可以看出黑花生的聚硒能力更好。