1年20次以上血小板献血者血小板计数波动情况分析*

谢桂芸，黎世杰，梁华钦

广州血液中心体检采血部、广州市医学重点实验室(血液安全重点实验室)(广东广州 510095)

20世纪末引入我国的血小板单采技术，因其制品浓度及纯度均高，其他血细胞污染少，成为临床血小板供应的重要途径[1]。在医疗科技快速发展的背景下，作为多种疾病中血小板减少或功能障碍出血的有效防治方法，血小板制品的临床需求与日俱增[2]。同时，因机采血小板操作相对复杂，献血时间长，献血者招募及保留难度大，进一步加重了机采血小板的供应压力[2]。2012年7月起实施的《献血者健康检查要求(GB18467-2011)》缩短了2次机采血小板献血间隔期为不少于2周[3]。这一政策从提高重复血小板献血者献血频率的角度大大增加了血小板的供应。与此同时，也引发了对频繁单采血小板献血者安全性的研究。既往研究大多以首末次献血2个时间点为横断面，对比血小板计数差异，所得结论有不一致且忽略了中间多次献血可能存在的血小板计数波动。为了解频繁单采血小板献血者血小板计数波动情况，从而对其安全性提供更多信息，本研究以2017—2018年度中，1年20次以上血小板献血者为研究对象，采用多重测量方差分析，对其1～20次献血前血小板计数波动情况及影响因素进行分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2017年1月1日至2018年12月31日，在广州血液中心首次献机采血小板且1年内献血小板20次以上献血者311例，其中男294例，女17例，年龄20～58岁，平均(37.30±9.52)岁。本中心献血者信息系统中获取311名献血者第1～20次每次单采血小板前外周血血小板计数、献血次数、献血小板治疗量。

1.2 试剂与仪器 Sysmex KX-21N 型血液分析仪(日本)及配套试剂用于血小板采集前外周血血小板计数水平检测；Amicus, MCS+, Trima血细胞分离机及配套一次性管道用于机采血小板。

1.3 每次献血血小板计数的获取 每次献血前留取5 mL静脉血，混匀存放于EDTA-K2抗凝管，严格按操作规程获得献血者每次献血小板前外周血血小板计数。

1.4 统计学方法 配对t检验首次与第20次献血前血小板计数变化；311名献血者根据是否每次均献血小板2 U，分为两组，PRISM 7用于制作分组箱线图(Tukey法)，观察不同献血量对于1～20次献血前血小板计数波动的影响。以首次献血前血小板计数为对照组，第2～20次献血前血小板计数为实验组，单因素方差分析(RM one-way ANOVA)血小板计数变化。单因素重复测量的方差分析分别检验性别、年龄组以及献血小板治疗量对1～20次血小板计数波动的影响；其中有统计学意义的因素，进一步纳入多因素方差分析。SPSS 24.0统计软件，用于重复测量方差分析及结果绘图。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 1～20次献血前血小板计数波动情况 第1～20次每次献血前血小板计数平均值组间差异有统计学意义(F=3.22，P<0.05)。多重比较中，第2～14次与首次献血前血小板计数差异无统计学意义(P>0.05)，第15～20次献血前血小板计数与首次献血前血小板计数比较明显增加，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

采血次数血小板计数P值∗第1次282.9±51.24-第2次285.9±51.280.67第3次283.8±54.731.00第4次280.8±51.910.98第5次281.2±54.061.00第6次281.6±49.201.00第7次281.6±50.561.00第8次279.5±52.610.58第9次282.4±51.821.00第10次278.4±51.840.19第11次280.3±52.980.90第12次281.3±51.991.00第13次282.5±53.731.00第14次286.2±55.100.61第15次288.9±50.210.04第16次292.9±55.870.00第17次294.1±53.550.00第18次293.5±52.400.00第19次294.2±54.760.00第20次291.5±52.200.00

*与第1次比较

2.2 第1～20次献血前血小板计数波动的影响因素 男性与女性1年20次以上血小板献血者血小板计数波动差异无统计学意义(F=0.60，P>0.05)，见表2和图1-A。年龄对血小板计数平均值波动的影响有统计学意义(F=6.36，P<0.05)，见表3和图1-B。献血小板治疗量对血小板计数平均值波动的影响有统计学意义(F=79.46，P<0.05)，见表4和图1-C。将年龄及献血小板治疗量纳入多因素方差分析，献血者年龄对血小板计数波动情况的影响无统计学意义(F=0.48，P>0.05)。每次均献血小板2 U对比至少1次献血小板1 U献血者的1～20次献血前血小板计数平均值波动更大(F=3.59，P<0.05)。

2.3 对比不同血小板单位数献血者第1～20次献血前血小板计数分布及波动情况 两类献血者第1～20次献血前血小板计数均在(150～450)×109·L-1范围内波动，每次献血小板均为2 U的献血组每次献血前血小板计数的平均数(箱中黑点)，中位数(箱中横线)(箱中横线)及上(箱上/下边界线)下四分位间距(箱上/下边界线)均大于至少1次献血小板1 U献血者。见图2。

1年捐20次以上且至少1次献血小板1 U献血者，第1～20次献血前血小板计数差异无统计学意义(P>0.05)。1年捐20次以上且每次均献2 U血小板献血者第1～20次献血前血小板计数差异有统计学意义(P<0.05)，多重比较发现第16～19次献血前血小板计数比首次献血前血小板计数明显增加，差异有统计学意义(P<0.05)。

采血次数女性(n=17)男性(n=294)第1次285.18±42.47282.76±51.76第2次283.29±40.32286.02±51.89第3次293.35±42.68283.29±55.35第4次297.71±51.90279.85±51.82第5次290.65±53.44280.70±54.13第6次297.24±43.78280.66±49.41第7次293.35±54.84280.93±50.32第8次284.41±54.37279.25±52.59第9次290.88±41.62281.94±52.36第10次278.24±51.06278.40±51.97第11次283.71±55.38280.15±52.93第12次282.18±60.01281.27±51.60第13次284.59±52.96282.38±53.85第14次288.29±45.82286.09±55.65第15次286.18±41.44289.10±50.72第16次286.00±60.81293.31±55.65第17次285.59±49.16294.57±53.82第18次297.47±59.76293.32±52.04第19次301.71±53.91293.76±54.86第20次302.06±41.34290.92±52.74

采血次数<25岁(n=27)25～34岁(n=106)35～44岁(n=92)>44岁(n=86)第1次274.44±54.60286.44±52.43282.30±51.76281.80±48.58第2次277.70±59.24292.08±51.74286.02±52.68280.62±46.25第3次274.93±58.26290.48±56.41277.72±57.30284.99±48.14第4次272.59±52.51286.32±53.93278.05±53.40279.62±47.60第5次276.44±56.35287.47±54.44278.84±55.65277.66±51.32第6次276.37±54.41287.83±51.88276.48±47.45280.93±45.83第7次273.33±52.63288.29±52.68277.03±51.14280.85±46.33第8次260.04±51.45289.38±56.91277.92±51.86275.23±46.27第9次279.11±55.39292.33±53.15275.16±52.47279.03±47.14第10次274.07±59.92287.06±55.66274.89±51.44272.83±43.58第11次274.48±62.09287.62±55.18274.14±50.58279.86±49.38第12次275.93±54.49287.89±54.10281.08±50.15275.19±50.41第13次277.33±62.74289.46±54.68277.33±62.74274.43±50.90第14次279.15±65.04292.52±57.33286.76±56.94280.07±46.29第15次277.85±62.54296.67±51.19289.34±47.27282.47±47.02第16次284.11±58.65303.64±54.31289.78±58.57285.79±52.76第17次281.59±59.31304.86±54.59287.79±54.52291.45±47.67第18次284.19±55.80304.16±53.62289.59±50.86287.64±50.16第19次282.04±57.39307.16±56.66290.41±52.92286.07±51.23第20次276.48±54.64298.73±52.27289.03±51.24289.03±51.24

采血次数每次均献2U(n=206)至少有1次献1U(n=105)第1次297.15±47.54254.92±46.68第2次299.56±46.56254.92±46.68第3次298.94±51.21254.19±49.19第4次294.28±48.13254.42±48.99第5次294.62±50.80255.00±50.73第6次296.50±44.26252.27±45.22第7次296.83±44.39251.71±48.73第8次294.83±45.93249.51±52.13第9次297.98±44.93251.91±51.05第10次293.38±45.99248.99±50.23第11次295.51±48.85250.59±48.08第12次297.18±47.37250.19±46.43第13次297.88±47.96252.30±51.76第14次301.93±50.06255.36±51.55第15次303.55±43.84260.25±49.71第16次309.69±50.70259.98±50.83第17次310.06±49.77262.73±46.53第18次309.39±47.13262.45±48.27第19次308.58±50.97265.95±50.99第20次306.14±46.98262.85±50.15

3 讨论

2012年7月起最新实施的献血者健康检查要求中，血小板捐献间隔期规定从2次捐献间隔至少4周，总献血次数不超过12次/年，调整为2次间隔不少于2周，总献血次数不超过24次/年[3]。缓解血液供应压力的同时，考虑到多次频繁捐献机采血小板以爱心奉献为初衷，保障献血者健康同样重要，不少采供血机构开展了针对多次频繁机采血小板对献血者血小板计数影响的研究，追踪了多次机采血小板献血者，对比首末次外周血小板计数均发现差异无统计学意义(P>0.05)，但研究中或研究对象献血次数较少，或未对献血次数分类，或未对献血量进行讨论，无法获得频繁多次机采血小板献血的情况[4-8]。吴次宁等[9]对2012年新规前后半年内献血者血小板计数进行对比，但研究期间研究对象混合了累计机采血小板献血次数10～96次，且未提及每次献血小板量。王欣等[10]考虑到献血量的影响，分别对7个月内10次单/双份血小板献血者首末次血小板计数对比，未发现统计学差异，但该研究结果不能推广到10次以后血小板计数波动情况。

本研究结果显示，1年20次以上多次频繁血小板献血者血小板计数在正常范围内波动。这是因为血小板代谢速度快，外周血血小板因捐献下降，刺激骨髓造血干细胞分化，原始巨核祖细胞分化为巨核细胞，进一步分化成熟血小板，脱落并补充到外周血中维持动态平衡。与既往研究不同，本研究限定了2017年或2018年首次捐献机采血小板且1年累计献血20次以上献血者，与首次对比，第20次献血前血小板计数有显著增加。对于频繁血小板捐献者，骨髓造血干细胞刺激更强[11]，生成更多血小板生成素(TPO)及血小板衍生生长因子(PDGF)[12]。但也有研究表明，频繁单采血小板可能引起相对性血小板耗竭，骨髓生长受抑，从而降低血小板生成能力[12-13]。因此，血小板计数的波动状况值得进一步研究。

A:不同性别对血小板计数波动的影响；B:不同年龄对血小板计数波动的影响；C:不同献血小板治疗量对血小板计数波动的影响

图1单因素重复测量的方差分析性别、年龄组以及献血小板治疗量对血小板计数波动的影响

以首末次献血2个时间点为横断面，简单对比血小板计数差异，丢失了中间可能存在的较大波动。本研究进一步探索1～20次献血前血小板计数的变化，发现15次献血前，血小板计数波动不大，自第16次献血前，血小板计数出现有统计学意义的增加。这一结果提示，对于频繁献血者，骨髓造血刺激增强引发血小板计数显著增加可能出现得更早，更需要及时发现以进一步监测血小板波动情况。

除了献血间隔期，献血量也影响着造血刺激强度以及血小板再生速度。既往相关研究的研究对象或者混合献血者，或者只针对研究一种献血量献血者。本研究首次对比探索不同献血量，每次均献血小板2 U及并非每次都献2 U献血者对血小板计数波动情况的影响及相关影响因素。并发现每次都献血小板2 U在第1～20次献血前血小板计数均显著高于并非每次都献2 U血小板献血者。多因素方差分析结果表明，排除献血治疗量差异的影响后，性别和年龄组与血小板计数波动情况不相关。并非每次都献2 U血小板献血者第1～20次献血前血小板计数没有发生统计学意义的波动；而每次都献2 U血小板献血者自第16次献血起出现了有统计学意义的血小板计数增长。这一结果提示献血量对血小板计数波动存在影响，未来研究可以进一步跟踪频繁多次献血且每次均捐献2 U血小板献血者20次献血后的血小板波动情况。

综上所述，本研究发现《献血者健康检查要求(GB18467-2011)》条件下，1年20次以上频繁血小板献血者首次至第20次献血前血小板计数，引入性别，年龄和献血单位数因素，仍在正常范围内波动；每次均献2U血小板献血者第16～20次献血前出现血小板计数显著增加。因此，目前以不少于2周的间隔期捐献血小板20次以内，血小板计数在正常范围内波动。下一步研究需要针对不同献血量血小板献血者更长期多指标监测，为频繁机采血小板对献血者血液指标的影响提供证据。

图2 每次献血小板均为2 U及至少1次献血小板为1 U治疗量献血者1～20次血小板计数箱线图