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美味牛肝菌栽培种培养成功初报

2019-11-08李立峰夏兴宏

北方蚕业 2019年3期
关键词:柞树牛肝菌营养液

李立峰 高 伟 夏兴宏 于 艳 费 滕

(辽宁省蚕业科学研究所,辽宁凤城 118100)

柞园内林下经济建设是柞园生态建设的一个重要内容,也是未来柞园建设和发展的方向。近些年,我们发现柞园里有非常珍贵的野生真菌,这些野生真菌与柞树根系共生形成菌根后,不仅能够促进柞树生长发育,增强柞树抗病、抗逆性,而且其子实体还有许多药用和食用价值。辽东山区柞树菌根真菌有36种,而美味牛肝菌就是药食同用的一种野生真菌。美味牛肝菌(BoletusedulisBull.exFr.),牛肝菌科,牛肝菌属,俗称大脚菇,粗腿蘑,大腿蘑,牛腿蘑等[1]。资料和实践表明,这种真菌与柞树根系共生形成菌根后,能促进作树生长[2],其子实体是餐桌上受青睐的菜肴之一,也是我省出口创汇的野生食用菌主要种类,有开发价值。

目前,对美味牛肝菌的一级斜面菌种、二级液体菌种的分离、培养,不少人已获得成功;而对三级栽培种(以下简称栽培种)的制备、未见报导。研究者普遍认为该真菌是难培养的菌种之一,有人试验其栽培种三个月后菌落呈愈伤组织状态,仅有少数绒毛出现。本试验参考其它共生菌、腐生菌栽培种培养基用料,抓住柞树菌根真菌,菌丝生长的主要环节,从编号JMF培养基的用料和营养液不同pH值着手,经过多次试验,终于使该菌栽培种菌丝在30~50 d内长满全袋。现将培养情况初报如下。

1 材料与方法

1.1 材料

美味牛肝菌二级液体菌种,JMF培养基,PDMN营养液,丙稀袋(规格为13 cm×17 cm), 精密试纸等。

1.2 方法

1)配制不同pH值JMF培养基:将PDMN营养液的pH值分别调至4.5,5.0,5.5,6.0,6.5,7.0,7.5,8.0,并分别与JMF培养基搅拌、加水,以手握料见滴水为宜,然后分别装入丙稀袋内扎口,标记好[3-4]。

2)高压灭菌:将装好JMF培养基的丙稀袋,用高压灭菌锅(压力1~1.5 kg/cm2)灭菌120 min,待灭菌锅压力自然降至零时,再启盖、取袋,可防止丙稀袋破裂。

3)接种培养:将灭菌的培养基袋放进接种箱内,用高锰酸钾、甲醛溶液再消毒60 min,袋内培养基温度降到30 ℃以下时,可在酒精灯的火焰周围接种[5]。具体操作是:先将装培养基的丙稀袋口打开,在培养基的中心扎10 cm左右深的圆孔,后将二级液体菌种瓶塞在火焰上方迅速打开,将液体菌种0.5~1.0 mL(或小块)放进培养基内,迅速扎口。为了防止恒温培养时感染杂菌,可在丙稀袋口处扎一层牛皮纸。

4)恒温培养:将接好种的JMF培养基丙稀袋,放置于25±2 ℃的遮光恒温室内发菌。在恒温培养中,每天观察、记载菌丝体生长情况,及时处理被杂菌感染的菌种袋[6]。

2 结果

经过多次试验,JMF培养基营养液不同pH值的8个区,接种后菌丝体生长情况见表1。

表1 营养液不同pH值对美味牛肝菌栽培菌丝生长影响

注:A表示接种平面上的菌丝生长状态,B表示培养料中的菌丝整体生长状态。A0表示菌丝开始扩展;A1/2表示菌丝长满平面1/2;A1表示菌丝长满平面;B1/5表示菌丝涨至全袋1/5;B1/4表示菌丝长满全袋1/4;B1/3表示菌丝长满全袋1/3;B1/2表示菌丝长满全袋1/2;B2/3表示菌丝长满全袋2/3;B1表示菌丝长满全袋。

由表1可见,不同pH的JMF培养基营养液上美味牛肝菌的菌丝都能生长。接种后1~5 d菌丝开始扩展,3~10 d菌丝长满平面,10~20d菌丝长至全袋的1/5~1/2,20~30 d菌丝长至全袋的1/2~2/3,30~50 d菌丝长满全袋。

3 讨 论

3.1 JMF培养基营养液pH道为6.0~6.5的试验区,在30 d内菌丝率先长满全袋;pH值7.0~7.5试验区,有2/3在40 d内菌丝长满全袋;其余试验区的菌丝在50 d内也都长满全袋。

3.2 在试验中,如有杂菌感染现象,是培养料中有干块、恒温室有杂菌及丙稀袋破碎的缘故,为此,拌料时要均匀、剔除硬块,在丙稀袋口处扎一层牛皮纸,防止杂菌感染,并且及时淘汰破碎的丙稀袋。

3.3 恒温室的温度高低;培养料中水份的多少;袋内装料的实松与通气好坏等,均会影响菌丝的正常生长繁殖。

4 结 语

柞园是柞蚕业赖以生存和发展的物质基础,要实现柞蚕业可持续发展,就要保护、建设好柞园,实现生态绿色发展。我们把培养成功的美味牛肝菌等菌种适时回接到柞树幼苗上,培育成菌根化柞苗,栽植到柞园里,可以有效增加柞园真菌子实体的发生量,柞苗成活率、生长量和生产力将会显著提高。利用该项技术,不仅可以应用于柞园生态建设,还可以应用于荒山、荒坡造林以及疏林地改造等林业生态建设,可有效提高辽宁乃至北方柞蚕区柞园的生物量和生产力,对退化柞园生态修复、改善山区生态环境、实现柞蚕业可持续发展起到积极作用。

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