原因不明复发性流产与sFlt-1的相关性及其临床意义分析

刘炜 徐聆峰 谭宗建

(贵州省人民医院生殖中心，贵州 贵阳 550002)

复发性流产(RSA)主要是指与女性与同一位性伴侣连续发生两次或者是大于两次的自然流产现象，且近年该疾病的发生率呈上升趋势，发生率大概在1%～5%之间[1]。复发性流产的原因比较复杂，主要与环境因素、不良生活习惯、创伤刺激、全身性疾病、感染因素、生殖器官异常、免疫功能异常、内分泌异常、染色体异常等有关，但是临床上仍然有50%的患者病因不够明确，临床上将其称为原因不明复发性流产(URSA)[2]。原因不明复发性流产的发生与胎儿血液供应不足、胎盘组织中血管发生异常有很大的关系。妊娠早期血管重塑与形成有利于滋养细胞侵入胎盘与子宫内膜使其正常发育，最终有利于保证胚胎的顺利发育。血管内皮生长因子(VEGF)与相关的受体相关受体(VEGFR)，在血管形成当中其主要作用的为可溶性VEGF受体-1(sFlt-1)，它还具有维持胎儿营养供应、蜕膜组织中血流量、血管密度的作用[3]。我院在原因不明复发性流产与sFlt-1的相关性及其临床意义分析中，发现原因不明复发性流产与sFlt-1呈正相关，现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2016年7月至2018年7月我院收治的原因不明复发性流产患者77例作为研究组，同时选取在我院进行体检的正常早孕妇女77例作为对照组，纳入标准：(1)已经发生原因不明复发性流产≥2次的患者；(2)妊娠孕周6～12周；(3)经过临床尿人绒毛膜促性腺激素(hCG)、B超、体征、临床病史确诊为已经发生难免流产产妇；(4)健康早孕妇女也符合以下要求：①以往未出现过死产、死胎、自然流产历史；②此次妊娠期间无任何异常，生命体征正常；③无病毒感染、服药历史；④通过B超检查胚胎发育正常；⑤无妇科疾病。排除标准：(1)存在感染性疾病的产妇；(2)精神异常的产妇；(3)存在服药历史的产妇。对照组77例，年龄23～35岁，平均年龄(32.3±1.2)岁；孕周6～12周，平均孕周(9.2±1.2)周；研究组77例，年龄23～36岁，平均年龄(32.5±1.1)岁；孕周6～12周，平均孕周(9.1±1.3)周；产妇资料有可比性(P>0.05)，本研究得到了我院伦理委员会处批准。

1.2方法 血标本：所有孕妇均在入院后的第2天清晨采集空腹肘静脉血2 mL，静置1 h离心分取血清，将分取的血清放置到-70 ℃环境下保存[4]。血清中VEGF与sFlt-1水平检测：将待检的血清应用ELISA法进行定量检测，ELISA试剂盒由美国安迪生物提供；人工流产后采集产妇绒毛组织，后冲净并去除血细胞，将其放到甲醛溶液(4%)中进行固定(36 h)，再将其进行石蜡包埋切片后烤片脱蜡，免疫组织化学二步法对组织进行染色，对VEGF与sFlt-1表达情况进行观察[5]。免疫组化判断标准：VEGF阳性：组织为棕色或者是黄色；sFlt-1阳性：组织为棕黄色颗粒状。由病理科人员应用高倍镜视野进行阅片，并根据半定量积分法对免疫组织学进行评分。评分=a×b(a.阳性细胞百分比，b.阳性细胞染色强度)；a为1b=0，细胞染色不明显，阴性；b=1，细胞染色呈淡黄色；b=2，细胞染色呈黄色；b=3，细胞染色呈棕黄色；阳性细胞<20%；a为2，阳性细胞为21%～60%；a为3，阳性细胞为61%～90%；a为4，阳性细胞≥90%。阳性判断结果：阳性：组织学评分5～12分；阴性：组织学评分<5分[6]。

1.3观察指标 比较两组人群血清中VEGF与sFlt-1水平。比较两组人群绒毛组织中VEGF与sFlt-1表达情况。分析原因不明复发性流产与sFlt-1的相关性[7]。

2 结 果

2.1两组血清中VEGF与sFlt-1水平对比 研究组血清中VEGF与sFlt-1水平高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 血清中VEGF与sFlt-1水平对比

2.2两组绒毛组织中VEGF与sFlt-1表达情况对比 研究组绒毛组织中VEGF与sFlt-1阳性表达率高于对照组(P<0.05)。见表2。

表2 绒毛组织中VEGF与sFlt-1表达情况对比[n(%)]

2.3原因不明复发性流产与sFlt-1的相关性分析 原因不明复发性流产与sFlt-1呈正相关(P<0.05)。见表3。

表3 原因不明复发性流产与sFlt-1的相关性分析

3 讨 论

原因不明复发性流产是近年临床上发生率较高的疾病，导致该疾病的发生原因有很多，但是还有很多原因仍不明确。近年来临床上发现VEGF与sFlt-1与原因不明复发性流产存在一定的联系。VEGF在胚胎发育、创伤愈合过程中发挥着非常重要的作用，它会对血管形成起到一定的调节作用，促进有丝分裂，同时会促进血管内皮细胞增长繁殖、分化分裂等[8]。本次研究发现，VEGF与sFlt-1水平越高越容易导致不明原因复发性流产的发生。VEGF属于血管内皮细胞生长的重要因子，它在诱导血管形成、维持胎盘血流量的过程中发挥着重要的作用[9]。近年有学者研究[10]发现，胎盘绒毛基质巨噬细胞与合体滋养细胞所产生的VEGF具有促进血管内皮细胞生长、繁殖、静脉血管通透性的作用。VEGF是促进血管内皮生长的主要因子，它在血管生成方面有着重要的作用，该表达水平出现异常与流产有很大的联系。VEGF受体sFlt-1除了具有抑制血管形成的作用，且它可以对内皮细胞NO释放合酶进行抑制，抑制VEGF发挥作用，最终会对血管生成过程造成影响，破坏血管通透性与完整性。VEGF发生异常会对胚胎血管生成过程造成影响，导致流产的发生，VEGF水平偏高就属于异常[11]。同时，VEGF与sFlt-1水平偏高，会使胚胎处于低氧环境，两者之间相互影响会导致绒毛血管生成受到影响，血管壁通透性降低导致流产[12]。VEGF与sFlt-1水平越高胚胎缺氧也就会越严重，胎儿各方面的发育情况也会受到严重的影响，特别对血管生成非常不利，加快了流产的发生[13]。本次研究发现，研究组血清中VEGF与sFlt-1水平高于对照组(P<0.05)，这就说明，VEGF与sFlt-1水平会对不明原因的复发性流产造成影响，尽早对产妇进行检查有利于预防复发性流产的发生。同时也说明不明原因复发性流产产妇的血清中VEGF与sFlt-1水平比正常产妇的要高。

相关研究[14]显示，VEGF的受体sFlt-1水平如果显著升高，则会导致sFlt-1与VEGF的亲和力增强，降低产妇血清中VEGF的水平，抑制产妇胎盘中血管的形成，最终会对早期胎盘的发育造成影响，促进流产的发生。本次研究发现，研究组绒毛组织中VEGF与sFlt-1阳性表达率高于对照组(P<0.05)，这就说明，VEGF与sFlt-1阳性表达率越高越容易导致流产的发生。另外也可以说明可溶性sFlt-1水平越高会对VEGF水平进行中和，导致VEGF水平不足，最终使产妇的孕期胎盘血管生成造成了抑制，促进了流产发生。

有学者[15]发现，对正常孕妇的妊娠绒毛进行培养液培养可以发现有管状内皮细胞形成与迁移现象发生，而在其中加入sFlt-1则会对其作用进行抑制或者是减弱，说明加入的sFlt-1会对VEGF作用进行抑制，会对胎盘中血管的生成造成影响，最终会导致血管内皮受到损伤，使血管生成过程受到抑制。本次研究发现，原因不明复发性流产与sFlt-1呈正相关(P<0.05)，说明sFlt-1水平发生异常是导致不明原因复发性流产发生的重要因素。

综上所述，原因不明复发性流产与sFlt-1的相关性及其临床意义分析中，原因不明复发性流产与sFlt-1存在紧密的联系，对其进行检测是非常有必要的。