Hcy、淀粉样蛋白、TNF-水平变化在阿尔茨海默病中的表达及意义

张照阳，范立华，蔡庆春

(河南中医药大学第三附属医院检验科，河南 郑州450000)

阿尔茨海默病(Alzheimer disease，AD)俗称老年痴呆症，是临床常见的神经系统退变性疾病，多发生于老年人，以进行性认知障碍、记忆力减退、生活自理能力下降、精神人格改变为主要病变特征，具有起病隐匿、治疗棘手的特点，严重影响老年人的生存质量和家庭关系。近年来我国已步入老龄化社会，AD的发病率逐年递增，对AD的研究已成为热门[1]。

目前临床对于AD的发病机制尚未完全阐明，多数学者认为与大脑皮质弥散性萎缩、淀粉样斑块沉积、神经元丢失等密切相关[2]。有研究发现，同型半胱氨酸 (Homocysteine，Hcy)、淀粉样蛋白(-amyloid proteinA1-42，A1-42)、 肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor，TNF)等炎症介质与神经系统疾病、心脑血管疾病的发生和进展密切相关[3]，但与AD的关系研究较少，本研究探讨了血清Hcy、A1-42和TNF-在AD中的表达及意义，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年2月至2017年12月在我院治疗的AD患者87例(AD组)，纳入标准：(1)符合美国神经病学、语言障碍和卒中研究索阿尔茨海默病和相关疾病学会制定的诊断标准；(2)Hachinski缺血指数量表评分＜4分；(3)临床痴呆评定量表(CDR)评分＞1分；(4)患者家属知情同意并签署同意书。排除标准：(1)因其他中枢神经系统导致的痴呆；(2)因肝功能衰竭、甲状腺功能亢进、朊蛋白病等引起的痴呆综合征。同时选取100例健康志愿者作为对照组，两组受试者性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05)，见表1。

表1 两组一般资料比较(，n)

表1 两组一般资料比较(，n)

组别 例数 男/女 年龄(岁) 受教育年限(年)AD组对照组t/x2 P 87 100 43/44 49/51 0.003＞0.05 70.16±8.43 69.50±9.11 0.512＞0.05 10.23±2.33 9.89±1.88 1.104＞0.05

1.2 实验方法 选取AD患者和健康志愿者进行比较，抽取空腹静脉血检测两组血清Hcy、A1-42和TNF-水平，同时采用简易智能量表(MMSE)评价认知功能。Hcy采用循环酶法检测，检测仪器为Hitachi-7600-010型全自动生化分析仪，按照标准操作规程执行操作。Aβ1-42、TNF-α采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测，Aβ1-42试剂盒购自比利时Innogenetics公司，TNF-α试剂盒购自南京建成生物工程研究所，均严格按试剂盒说明书要求操作。

1.3 简易智能量表(MMSE)评价 采用简易智能精神状态检查量表 (MMSE)评价患者认知功能的变化，由患者独立完成量表问题的回答。MMSE量表包括定向力、即刻记忆力、计算力、注意力、延迟记忆和语言等内容。总分为30分，得分越高表示认知功能越好，得分＜27分者认为存在认知功能障碍。

1.4 统计学处理 统计分析采用SPSS19.0软件，计量资料采用()表示，组间比较使用独立样本t检验，计数资料比较使用x2检验，相关性采用Pearson相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清Hcy、A1-42和TNF比较 AD组血清Hcy和TNF明显高于对照组(p＜0.05)，而A1-42为明显高于对照组(P＜0.05)，见表2。

2.2 两组MMSE评分比较 AD组MMSE评分明显低于对照组，差异比较有统计学意义(P＜0.05)，见表3。

2.3 相关分析 将AD患者MMSE评分与Hcy、A1-42和TNF进行相关分析，结果显示AD患者MMSE评分与血清Hcy浓度呈负相关 (r=-0.455，P＜0.05)，而与 A1-42、TNF 无相关性(P＞0.05)。

表2 两组血清Hcy、A1-42和TNF比较()

表2 两组血清Hcy、A1-42和TNF比较()

组别 例数 Hcy(μmol/l)Aβ1-42(pg/ml)TNF-α(pg/ml)AD组对照组t P 87 100 17.60±4.11 11.43±3.03 11.779＜0.05 37.42±10.16 57.89±11.26-12.973＜0.05 60.43±7.80 37.22±9.14 18.531＜0.05

表3 两组MMSE评分比较()

表3 两组MMSE评分比较()

组别 例数 MMSE评分(分) t P AD组对照组87 100 3.70±0.97 29.01±1.22 -155.415 ＜0.05

3 讨论

AD是一种神经系统退行性病变，患者常表现为进行性认知能力下降、精神和行为异常、日常生活能力下降，在当前老龄化社会，越来越多的AD不仅影响了患者的家庭幸福，也给社会医疗资源造成沉重的负担[4]。AD的病因迄今未明，有研究认为家族史、女性、头部外伤、病毒感染、甲状腺疾病、受教育程度、母亲生育能力过高或过低均有可能影响AD的发生和进展[5]。近年来随着对AD的临床研究和基础研究的不断深入，血管因素在AD发生、发展中的作用已受到学术界的高度重视[6]。大量研究已经证实，脑组织缺血、缺氧性改变、慢性炎症所引起的应激反应是导致AD发生和进展的重要危险因素[7]。

人体自身是不能产生Hcy的，正常人血清中存在的微量Hcy是蛋氨酸的代谢产物，Hcy甲基化后生成蛋氨酸、S-腺苷甲硫氨酸，后者参与蛋白质、磷脂、DNA神经递质等物质的代谢过程[8]。高Hcy血症是血管性疾病的危险因子，与动脉粥样硬化、急性脑梗死等疾病密切相关。tau蛋白可结合并稳定微管系统，过度磷酸化后tau蛋白与微管的结合力下降，微管稳定性不能得到很好的维持，影响细胞骨架的稳定，最终导致神经元退行性变[9]。有研究认为，Hcy水平升高可引起tau蛋白过度磷酸化，形成成对螺旋丝堆积于神经元内，导致神经原纤维缠结而影响神经元功能[10]。Hcy水平升高引起β淀粉样蛋白沉积，引起神经元凋亡和淀粉样变[11]。高Hcy血症还会引起氧化应激反应，加重脑血管内皮细胞损伤，增加血管性痴呆的发生风险[12]。 本研究发现AD患者血清Hcy水平明显高于正常人群，AD患者MMSE评分与血清Hcy浓度呈负相关，提示血清Hcy可在一定程度上反映AD患者的认知功能障碍程度。这可能与高Hcy血症诱导脑血管病变有关，但其具体机制尚有待于进一步深入研究。

Aβ是淀粉样前体蛋白裂解后的氨基酸片段，主要亚型包括Aβ1-40和 Aβ1-42。其中Aβ1-40是细胞代谢的正常产物，在正常人群中也可检出，在临床上并无诊断意义[13]。Aβ1-42的神经毒性较强，易发生聚集，是AD老年斑形成的始动因子。有研究发现，Aβ1-42在脑脊液标本中的特异性更高，血液标本的特异性略低[14]，但由于在临床工作中血液标本的采集更加方便快捷、创伤小，因而本研究仍采取血液标本进行Aβ1-42的检测，发现AD患者血清中Aβ1-42水平明显高于正常人群。在高Hcy血症患者体内氧自由基大量产生，导致血管内皮细胞发生损害。Hcy的神经血管毒性会增强β淀粉样蛋白的神经毒性作用，引起神经元损害。

随着神经免疫学的研究不断深入，免疫因子引起的慢性炎症反应在AD的发病过程中的重要作用已受到重视，TNF-α在免疫应答的早期阶段启动炎症反应，诱导补体、氧自由基、一氧化氮、Aβ等大量合成，作用于胶质细胞和神经元，影响神经的生长和可塑性[15]。本研究发现AD患者血清TNF-α水平明显高于正常人群，提示AD患者机体炎症反应程度较高。但本研究发现，AD患者MMSE评分与血清 A1-42、TNF-α无相关性，AD患者的认知功能障碍程度与血清A1-42、TNF-α水平无关。

本文结果AD患者血清Hcy和表达明显升高，而Aβ1-42表达明显降低，其中Hcy可能是患者认知功能的影响因素，值得进一步研究。