MTHFR基因多态性与宫颈癌关系的Meta分析

周青 刘帅妹 张瑞金 石慧 林宁 吴玉璘 许豪勤

[摘要] 目的 探讨亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性（MTHFR A1298C）与宫颈癌之间的关系，为临床提供可靠数据以便更好地预防和治疗宫颈癌。 方法 在万方、中国知网和PubMed等数据库检索研究MTHFR（A1298C）基因多态性与宫颈癌关系的中英文文献，检索时间为建库至2018年11月12日。通读全文最终纳入Meta分析文献共7篇，包含病例组823例和对照组1607例。应用Stata软件在5种遗传模型中分析，计算比值比（OR）和95%可信度区间（CI）评估关联度，同时进行敏感性分析以及发表偏倚的评估。 结果 MTHFR基因的3种模型C vs. A（OR = 1.11，95%CI：1.02～1.22，P = 0.015），AC vs. AA（OR = 1.24，95%CI：1.02～1.52，P = 0.030）和（CC+AC）vs. AA（OR = 1.15，95%CI：1.03～1.29，P = 0.013）均有明显相关性，提示患癌风险增加。 结论 MTHFR（A1298C）基因多态性可能会增加女性患宫颈癌的风险。

[关键词] 亚甲基四氢叶酸还原酶;宫颈癌;基因多态性;Meta分析

[中图分类号] R737.3          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-7210（2019）08（c）-0099-04

[Abstract] Objective To analyze the relationship between 5，10-Methyleneterahydrofolate reductase gene polymorphisms （MTHFR A1298C） and cervical cancer in order to provide reliable data for better prevention and treatment of cervical cancer. Methods Database of Wanfang， CNKI and PubMed were searched from the time of building database  to November 12， 2018， and a total of 7 articles about the relationship between MTHFR gene （A1298C） polymorphisms and cervical cancer were included in this Meta-analysis， including 823 cases and 1607 controls. The odds ratio （OR） and 95% confidence interval （CI） were calculated and to assess the associations， meanwhile， the sensitivity and publication bias were analyzed. Results There were significance associations in the comparison C vs. A （OR = 1.11， 95%CI： 1.02-1.22， P = 0.015）， AC vs. AA （OR = 1.24， 95%CI： 1.02-1.52， P = 0.030） and （CC+AC） vs. AA （OR = 1.15， 95%CI： 1.03-1.29， P = 0.013）. Conclusion MTHFR （A1298C） gene polymorphisms may increase the risk for cervical cancer.

[Key words] 5，10-Methyleneterahydrofolate reductase; Cervical cancer; Gene polymorphisms; Meta-analysis

宮颈癌是中国女性发病率较高的妇科肿瘤，仅次于乳腺癌位居第二，每年大约有13.5万的新发病例，病死率占到全球的1/3，严重威胁女性的身体健康[1]。宫颈癌的形成经历多步骤、多因素以及长时间内外因素相互作用。高危人乳头瘤病毒（human papilloma viruses，HPV）持续感染是宫颈癌发生的必要条件，但是单一的HPV感染仅能导致细胞转化“永生化”，并不能引起上皮细胞的恶变，而基因某些位点多态性影响宫颈癌的易感性，环境与宿主内外因相互作用，使得细胞损伤程度不断地积累，最终发生癌变。亚甲基四氢叶酸还原酶（5，10-Methyleneterahydrofolate reductase，MTHFR）功能异常导致人体内缺乏叶酸，甲基化和DNA修复异常，最终造成DNA单链甚至双链断裂，染色体不稳定，细胞癌变[2]。MTHFR基因多态性使得酶活性发生变化，与宫颈癌形成以及预后状况存在一定的关系，但因不同地区、人种以及生活环境等，导致各研究结果不一致。基于此，本研究采用Meta分析评估MTHFR基因多态性与宫颈癌的关系。

1 资料与方法

1.1 文献检索

检索中英文数据库中国知网、万方和PubMed等，搜集MTHFR（A1298C）基因多态性与宫颈癌相关研究的文献。中文检索关键词：MTHFR（A1298C）、亚甲基四氢叶酸还原酶（A1298C）、多态性、宫颈癌。英文检索关键词：MTHFR（A1298C）、polymorphisms、cervical cancer。检索时间为建库至2018年11月12日，同时采用文献追溯的方法，使得文献检索尽可能详尽，且语种限定为中文和英文。阅读文献题目和摘要部分进行初步筛选，再通读全文，最终纳入7篇文献。

1.2 纳入及排除标准

纳入标准：①关于MTHFR（A1298C）基因多态性与宫颈癌之间关系研究;②实验设计包括对照组和病例组;③研究对象为人类;④实验数据齐全，包含各基因型在病例组和对照组的分布情况;⑤对照组基因型分布符合哈德温伯格平衡定律（Hardy-Weinberg equilibrium，HWE），P > 0.05。排除标准：①综述类和Meta分析类文献;②未提供具体基因型分布数据;③病例报告和病例研究;④数据质量不可靠以及重复发表。

1.3 资料提取

两名研究者独立进行文献的筛选以及资料提取，意见不统一可通过第三位研究者协助解决，确保数据的准确性。提取数据包括：第一作者、发表时间、国家、种族、实验方法、对照组来源以及各基因型在病例组和对照组中的频数。

1.4 文献质量评价标准

纳入文献通过Newcastle-Ottawa-Scale（NOS）进行质量评价，NOS满分为10分，得分>5分为高质量文献。NOS共3个项目8个条目，包括病例组和对照组的选择4分（病例定义和诊断是否恰当、病例的代表性、对照的选择、对照的定义）;病例与对照的可比性2分，暴露4分（暴露的调查与评估方法、病例与对照调查方法是否相同、无应答率）[3]。

1.5 统计学方法

采用Stata软件计算95%可信度区间（CI）和比值比（OR）分析MTHFR基因多态性与宫颈癌之间的关系。MTHFR（A1298C）的AA、AC和CC三种基因型，分析纯合比较模型（CC vs. AA）、等位基因比较模型（C vs. A）、显性比较模型[（CC+AC）vs. AA]、杂合比较模型（AC vs. AA）和隐性比较模型[CC vs.（CA+AA）]五种不同遗传模型，以P < 0.05为差异有统计学意义。采用I2和Q检验评估纳入文献的异质性，P > 0.05采用固定效应模型Mantel-Haenszel;P < 0.05则采用随机效应模型DerSimonian和Laird合并OR值，并采用亚组分析异质性来源[4]。I2值<25%表示无异质性，25%≤I2值≤50%表示存在轻度异质性，I2值>50%表示高度异质性[5]。敏感性分析通过一一剔除文献重新进行Meta分析。通过Egger线性回归法以及Begg秩相关法进行发表偏倚的检测，P > 0.05表示不存在发表偏倚[6]。

2 结果

2.1 文献检索结果

利用关键词在中英文数据库中检索相关文献22篇，初步排除3篇Meta分析文献，通读全文根据纳入与排除标准，剔除15篇：①8篇涉及MTHFR基因其他位点;②2篇综述;③1篇研究对象不是宫颈癌;④1篇未提供原始数据。最终纳入7篇文献[7-13]。基因分型方法均采用限制性片段长度多态性聚合酶链式反应（polymerase chain reaction- restriction fragment length polymorphic，PCR-RFLP），对照组来源于医院，研究人种包含亚洲和高加索。本研究纳入的7篇文献，经NOS质量评价，得分在6～8之间。见表1。

2.2 分析结果

5种模型分析的结果显示：C vs. A（OR = 1.11，95%CI：1.02～1.22，P = 0.015），AC vs. AA（OR = 1.24，95%CI：1.02～1.52，P = 0.030）和（CC+AC）vs. AA（OR = 1.15，95%CI：1.03～1.29，P = 0.013），提示MTHFR基因多态性与宫颈癌发生存在明显相关性[7-13]。亚组分析结果显示：亚洲人种C vs. A（OR = 1.12，95%CI：1.01～1.24，P = 0.029）;AC vs. AA（OR = 1.35，95%CI：1.09～1.67，P = 0.006）和（CC+AC）vs. AA（OR = 1.20，95%CI：1.05～1.37，P = 0.007），结果提示MTHFR基因多态性与亚洲人宫颈癌发生存在明显相关性[8-10，12]。高加索人CC vs.（CA+AA）（OR = 1.47，95%CI：1.02～2.13，P = 0.039），结果提示MTHFR基因多态性与高加索人宫颈癌发生存在明显相关性[7，11，13]。见表2。

2.3 异质性与敏感性分析

MTHFR（A1298C）显性比较模型（CC+AC）vs. AA（OR = 1.15，95%CI：1.03～1.29，I2 = 50.9%），I2值>50%，表示存在高度异质性，亚组分析发现异质性来源组别高加索，通过敏感性分析一一剔除高加索组中的文献并重新合并计算结果发现，Hajiesmaeil等[13]报道的文献是主要异质性来源，剔除后异质性降低，I2值为41.6%。

2.4 发表偏倚

通过Egger线性回归法和Begg漏斗图检验，结果提示：5种比较模型漏斗图均对称，且5种模型Egger检验结果P > 0.05，因此不存在發表偏倚。见表3、图1（C vs. A）。

3讨论

人体自身不能合成叶酸，需通过从饮食中获取，叶酸主要功能转移体内一碳单位[14]。MTHFR是叶酸功能发挥的关键酶，催化5，10-亚甲基四氢叶酸还原成5-甲基四氢叶酸，为蛋白质的甲基化以及RNA、DNA的合成提供甲基，且维持体内同型半胱氨酸处于正常水平[15]。5-甲基四氢叶酸是血浆中主要的存在形式，并且是叶酸发挥作用有效成分。MTHFR基因多态性改变酶活性导致叶酸代谢异常，增加个体某些疾病发生的风险，如肺癌[16]、缺血性脑卒中[17]、复发性流产[18]、产后抑郁[19]、不良孕产史[20]、消化系统肿瘤[21]等。研究显示[7-13]，MTHFR基因多态性与宫颈癌的发生关系密切，然而不同民族、种族、地区，以及不同生活环境导致易感性发生差异。

本研究共纳入7篇病例-对照研究，包括实验组823例，对照组1607例，Meta分析结果提示C等位基因可能会增加患宫颈癌的风险。亚组分析C等位基因并未增加高加索人患病风险，引起这种现象可能是由不同人种在不同的生活环境、不同的饮食方式以及工作环境等造成。隐性比较模型CC vs.（AC+AA）亚组分析发现纯合突变基因型CC加剧高加索人患病风险，但未增加亚洲女性患宫颈癌的风险，可能原因亚洲人纯合突变基因型相对较少。采用Egger线性回归检验方法和Begg漏斗图评估是否存在发表偏倚，结果显示5个遗传模型均不存在发表偏倚，说明该Meta分析结果可靠。

本次研究尚有不足：样本量相对较少，还需大样本数据来进行验证;各种族生活方式、环境和年龄等个人信息无法获取，还需进一步评估。

综上所述，MTHFR（A1298C）基因多态性可能会增加女性患宫颈癌的风险。MTHFR基因多态性与宫颈癌的关系还需进行大样本，多地区不同种族、生活环境、工作方式等分层进一步研究证实，为临床提供可靠数据更好地预防和治疗宫颈癌。

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（收稿日期：2019-01-21  本文编辑：任   念）