临床实验室干式生化检测项目测量不确定度的评估与分析 *

毛 瑞，曹三成，王 娟，王 斌，陈建梅，史剑飞

(西安市儿童医院检验科，西安 710003)

测量不确定度是表征合理的赋予被测量之值的分散性，与测量结果相联系的参数[1-2]。即处于重现性条件下某一概率可能得到的测量结果。不确定度首先在计量学领域普遍采用，近年来被引入临床检验医学领域[3]。ISO15189实验室认可要求中明确规定，临床实验室“必要且可能时”应确定检验结果的测量不确定度[3]。

本研究依据北欧测试合作组织(Nordtest)准则，利用实验室半年的室内质控和三年的室间质评数据评估儿童医院临床实验室干式生化检测项目的不确定度，以探讨此法的实用性，为测量不确定度在儿童医院临床实验室应用提供实践经验。

1 材料与方法

1.1 研究对象 收集西安市儿童医院检验科2018年6～12月的干式生化检测项目的两个水平度室内质控数据和国家卫生健康委员会临检中心2017～2019年间连续7次干式化学室间质评数据进行统计分析。

1.2 试剂和仪器

1.2.1 试剂：干式生化检测项目葡萄糖(Glu)、尿素(BUN)、尿酸(UA)、肌酐(Cr)、总蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、总胆红素(TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、肌酸激酶(CK)和谷氨酰转肽酶(GGT)试剂均为美国强生公司。质控品：强生配套质控，批号为W5903(生理水平)和X5905(病理水平)。

1.2.2 仪器：美国强生vitros4600全自动干式生化分析仪。

1.3 方法 严格按照标准操作规程操作，室内质控和室间质评测定同患儿标本。利用实验室信息系统(LIS)收集检测数据，分别计算不精密度和偏移带来的相对不确定度，两种不确定度相对应的浓度应在彼此接近的水平中进行计算。

1.4 统计学分析

1.4.3 合成相对标准不确定度：ucrel2=urel(RW)2+urel(bias)2

1.4.4 扩展相对不确定度U=ucrel×K，K=2(95%可信区间)。

2 结果

2.1 与精密度相关的不确定度分量 见表1。检测项目的长期室内质控是由不同的检测人员，使用不同批号的干式试剂进行检测得出的数据。其相对实验室内测量复现性(CVw%)，为与室内不精密度相关的不确定度分量。

表1 实验室内测量复现性引入的相对测量不确定度分量

其中，GGT生理水平的实验室内测量复现性引入的相对测量不确定度最低，ALT生理水平的实验室内测量复现性引入的相对测量不确定度最高。

2.2 与偏移相关的不确定度分量 室间质评的测定结果与回报靶值的偏移有正负之分，本研究采用绝对值平方后根据公式计算出实验室方法的相对偏移RMSbias%。室间质评回报靶值的相对测量不确定度结果见表2。

2.3 合成相对标准不确定度与扩展相对不确定度 室内质控数据和室间质评数据计算得到的相对不确定度分量已分别算出，最后根据公式计算实验室干式生化项目的合成不确定度(ucrel)和扩展不确定度(urel)，见表2。

表2 13项检测项目偏移的相对测量不确定度分量及合成不确定度(%)

3 讨论

临床实验室的定量检测项目较多，是临床医生做出诊断与治疗决定的重要依据，尤其干式生化项目被临床实验室广泛用于急诊检验，故向临床医生提供及时准确的检测结果十分重要。不确定度评定是实验室认可的要求，也是临床实验室持续质量改进的需要。测量不确定度表述指南(guide to the expression of uncertainty in measurement，GUM)推荐的”模式办法”是提出测量的数学模型，然后从下往上尽可能找出不确定度的来源的所有分组，计算每一组分的标准不确定度，然后综合为合成不确定度。此方法操作费时费力，且不同实验室测量结果很难达到一致，临床实验室中难以实现[4]。Nordtest准则提出用经验办法来代替模式办法，包含尽可能多的测量不确定度来源。此方法所用的典型数据为偏移和精密度，而这些数据来自室内质控和室间质评数据，易于获得，可以在临床实验室中开展评定[5]。临床实验室难以定量分析操作人员、仪器、方法、试剂等不确定度分量，这些因素能从长期的室内质控结果中反映出来，因此可以用常规质控数据估计不确定度的一个分量。室间质评数据反映了临床实验室检测结果的准确度，多次的室间质评结果能有效的显示检测质量，也可作为评估实验室与方法偏移带来的不确定度的一个分量[5-9]。在ISO15189实验室认可中不确定度评定是必要的，而本研究选择对13个干式生化项目进行评价，具有更好的指导意义。

本研究中BUN的生理水平和TC的病理水平的扩展相对不确定度不符合实验室目标不确定度10.93%(9%)和10.76%(10%)，高于包安裕等[5]的研究9.66%，4.78%，这可能与我们的室间质评中参与实验室数量较少有关，导致偏移的测量不确定度较大，合成后的扩展不确定度较大。ALT的生理水平扩展相对不确定度为17.41%(20%)，虽然符合本室的目标不确定度，但由于与精密度相关的相对不确定度为7.94%较大[5，8-9]，提示应从检测人员、仪器、试剂和方法、所使用的校准品和质控品、环境温湿度条件等方面入手，加强人员培训，逐步改进检验质量从而缩小测量不确定度。

本方法未包括与分析前和分析后阶段相关的测量不确定度分量，也未包括由于人群生物学变异而产生的测量不确定度[6]；张晓红等[4]认为在不确定度评定过程中应注意不能忽略校准品不确定度的影响，故如何量化检验过程中的不确定来源，以更可靠的计算和表示测量不确定度，为临床医生提供重要参考，还需我们不断探索。