孕妇血清PLGF，sFlt-1，Ca2+，25-(OH)-D水平检测及其他危险因素分析对预测子痫前期的临床意义 *

徐晓锋，郭历琛，徐 玲，张 锐，咸睿星，石 琴

(上海健康医学院附属嘉定区中心医院妇产科，上海 201800)

子痫前期(PE)属于妊娠期高血压疾病之一，是妊娠期特有的疾病，PE最大特点为起病隐匿、病情发展变化迅速、可以迅速引起多种母儿并发症，严重危及母儿健康，是孕产妇和围生儿死亡主要原因之一[1]。PE发病率较高，约为5%～10%，其发病机制至今尚未完全阐明，可能与遗传、胎盘、免疫、氧化应激等多种因素有关[2]。为了尽早预知PE疾病发生，及早采取控制措施，本研究探讨了孕妇血清血管胎盘生长因子(PLGF)、可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)、钙离子(Ca2+)、25-羟基维生素D[25-(OH)-D]水平及其他危险因素对PE发生的临床意义，为PE的预测和及时治疗提供参考。

1 材料与方法

1.1 研究对象 以2017年1月～2019年3月在我院妇产科完成产检建卡以及分娩的孕妇为研究对象，追踪其妊娠结局，将发生PE的患者纳入PE组，共计82例。纳入标准：①PE患者符合《妊娠期高血压疾病诊治指南(2015)》诊断标准；②无恶性肿瘤疾病；③知情本研究方案，并签署知情同意书。排除标准：①存在内分泌疾病；②甲状腺机能亢进、血液病等慢性病史患者；③主动申请退出本研究者。随机选取同期产妇中无并发症的正常孕妇82例为对照组。

1.2 仪器与试剂 人胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒、可溶性受体1(sFLT-1)ELISA试剂盒购自美国Biotech公司，25-羟基维生素D定量测定试剂盒(化学发光法)购自美国DiaSorin公司，血清Ca2+检测试剂盒(邻甲酚酞络合铜比色法) 购自美国R&D公司。酶标仪(型号Varioskau Flash version 2.4.3)购自美国Thermo Scientific公司，冷冻离心机(型号CF16RXⅡ型)购自日本HITACHI公司。

1.3 方法

1.3.1 资料收集：收集PE组和对照组患者的一般资料，包括孕妇年龄、是否为初产妇、受教育程度、既往病史、家族病史、妊娠期BMI、妊娠并发疾病、羊水情况等与PE发病有关的危险因素。

1.3.2 检测方法：所有研究对象在孕18～22周时静脉采血10 ml，待30 min静脉血凝固后，4℃条件下3 000 r/min离心10 min，分离出血清。采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清PLGF，sFlt-1水平；比色法测定血清Ca2+水平；化学发光法测定25-(OH)-D水平。具体的检测步骤均严格按照试剂盒操作说明进行。

2 结果

2.1 两组观察对象的一般资料比较 见表1。两组患者在孕妇年龄、是否为单胎妊娠、流产史、高血压家族史、妊娠期高血压、妊娠期尿路感染、妊娠期不良情绪等7项因素上差异均具有统计学意义(均P<0.05)，其余因素差异无统计学意义(均P>0.05)。

2.2 各组血清PLGF，sFlt-1，Ca2+以及25-(OH)-D检测水平比较 见表2。PE组与对照组相比，PLGF，Ca2+和25-(OH)-D三个指标水平降低，而sFlt-1水平升高，差异均具有统计学意义(P<0.05)。

2.3 孕妇PE发生影响因素的多因素Logistic回归分析 见表3。Logistic回归分析表明，患者年龄≥35岁、多胎妊娠、具有高血压家族史、妊娠期高血压、妊娠期尿路感染、不良情绪、血清PLGF降低、sFlt-1升高、血清Ca2+降低以及25-(OH)-D降低为发生PE的独立危险因素(OR=2.433～4.669，均P<0.05)。

2.4 孕妇血清PLGF，sFlt-1，Ca2+以及25-(OH)-D对PE发生的诊断效能 绘制ROC曲线，评价各生化指标对PE发生的诊断效能。血清PLGF，sFlt-1，Ca2+以及25-(OH)-D的ROC曲线下面积分别为0.812，0.583，0.637和0.720；敏感度分别为87.45%，78.92%，80.66%和83.24%；特异度分别为80.23%，70.87%，75.14%和76.86%；联合检测的ROC曲线下面积为0.883，联合检测的敏感度为93.23%，特异度为95.64%，均高于单项检验。

3 讨论

PE是妊娠期高血压疾病中常见的典型并发症，PE患者随孕周增加，病情呈现加重趋势，出现全身多器官功能损伤甚至衰竭，如不及时干预，可发展成子痫等更为严重的症状，引起母体抽搐甚至昏迷，危及母婴健康[3]。因此，探讨PE发生的高危因素，并且寻找与产前检查相结合、高效敏感、具有高度特异性的生化检验指标，对PE的预测及及早干预具有重要的临床意义。

表1 两组观察对象的一般资料比较[n(%)]

表2 各组血清PLGF，sFlt-1，Ca2+以及25-(OH)-D检测水平比较

目前，PE发病机制尚未完全阐明，多种高危因素与PE发生密切相关，胎盘的浅着床、缺血缺氧、血管内皮细胞损伤是其重要的病理基础[4]。傅岚[5]对孕妇年龄、病史、流产史等多个因素进行Logistic分析表明，高血压史、肾病并发糖尿病、年龄≥35岁、高血压家族史、自然流产史为PE发生的独立危险因素。本研究更全面地收集了PE发生相关的可能危险因素，结果显示孕妇年龄≥35岁、有高血压家族史、妊娠期高血压史为PE发生独立危险因素，与文献报道基本一致；并且发现多胎妊娠、妊娠期尿路感染、妊娠期不良情绪也同样为PE发生的危险因素。相对于正常单胎妊娠，多胎妊娠子宫过度胀大，容易引起胎盘缺血、血管内皮损伤，PE发病风险增加。妊娠期尿路感染，激发母体系统炎症反应因素，导致机体与炎症有关的炎性因子例如C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)等显著增加，PE发生与炎性因子密切相关[6]，因此PE发生风险增加。孕妇不良情绪，尤其是高龄孕妇心理压力过大，精神过度紧张，肾素分泌增加，母体循环中血管紧张素Ⅱ升高，孕妇基础血压升高，也是PE发生的危险因素。

表3 孕妇PE发生危险因素的Logistic回归分析

本研究同时分析了PE孕妇和正常孕妇血清中对于PE发生有预测价值的4项生化指标，包括血清PLGF，sFlt-1，Ca2+以及25-(OH)-D水平差异。NGUYEN等[7]研究指出，PE的发生依赖于PLGF，sFlt之间的平衡，两者的异常变化可以预测PE的发生。PLGF通过特异性地与受体结合，促进胎盘血管生成，改善血流灌注，促进滋养细胞的增殖和侵袭，sFlt-1可以与PLGF相结合，阻碍PLGF的正常生理功能，导致胎盘血管生成障碍[8]。本研究表明，PE患者血清PLGF水平降低，sFlt-1水平升高，并且与正常孕妇相比差异具有统计学意义(P<0.05)，PLGF为PE发生的保护因素，sFlt-1为独立危险因素。熊矿辉等[9]研究发现，PE孕妇晚期25-(OH)-D3水平较健康孕妇显著降低，血清25-(OH)-D3水平的降低能促进血管内皮损伤、加重胎盘细胞凋亡。高颖等[10]研究指出，血清Ca2+水平与胎盘质量、胎儿质量显著正相关，Ca2+水平下降，增加胎盘血管形成不良，血管重塑障碍，血流阻力增加从而增加高血压发生率。本研究结果表明，PE孕妇血清Ca2+降低、25-(OH)-D升高，差异具有统计学意义(P<0.05)，为发生PE的独立危险因素。

本研究进一步探讨了孕妇血清PLGF，sFlt-1，Ca2+以及25-(OH)-D水平测定对于PE发生的诊断效能。通过绘制ROC曲线，描述了血清PLGF，sFlt-1，Ca2+以及25-(OH)-D水平单一预测与联合检查PE的敏感度和特异度。四项指标中，单项预测的敏感度范围为78.92%～87.45%，特异度范围为70.87%～80.23%；联合检测的敏感度为93.23%，特异度为95.64%，均高于单独检验。提示可在PE高危孕妇妊娠20周左右，测定以上四项指标水平，作为PE发生的预测指标。

综上所述，PE发生的危险因素具有多元性，孕妇血清PLGF，sFlt-1，Ca2+以及25-(OH)-D均参与PE发生、发展，对于PE的发生具有一定的预测价值。临床实践中，重视孕妇产前检查，对于PE高危孕妇，分析其独立危险因素同时采用血清指标联合预测，对于PE的及早发现和干预具有重要意义。