脑微出血患者血浆1，25-(OH)2D3，sLRP1水平与头颅SWI影像学特征的相关性 *

刘 玥，唐 鹏，侯 辰，张 欣

(陕西省人民医院神经内三科，西安 710068)

脑微出血(cerebral microbleeds，CMBs)是指脑基底核、丘脑区和皮质下白质等部位的微血管出血性病变导致的脑实质损害[1]。CMBs在无脑血管病史的老年人中发生率约为5%，在存在脑血管病史的人群中发生率更高[2]。CMBs是老年人生活能力和生活质量下降的重要原因[3]。研究发现一种低密度脂蛋白受体家族成员的细胞表面受体低密度脂蛋白受体相关蛋白1(low density lipoprotein receptor related protein 1，LRP1)可参与β淀粉样蛋白(amyloid β-protein，Aβ)在中枢神经系统的清除[4]。LRPl的β链跨膜区断裂，释放出可溶性形式sLRP1，Aβ血浆浓度与sLRP1血浆水平相关[5]，提示LRP1可能通过清除Aβ在脑内沉积，对CMBs产生保护作用。1，25-二羟维生素D3[1，25-dihydroxyvitamin D3， 1，25-(OH)2D3]可以通过上调LRP1的表达促进Aβ清除[6]，提示1，25-(OH)2D3同样可能具有防治CMBs的作用。本研究选取我院CMBs患者及正常对照人群外周血浆1，25-(OH)2D3和sLRP1水平进行检测，研究外周血1，25-(OH)2D3和sLRP1水平在两组人群的关系。以进一步研究验证1，25-(OH)2D3是否能介导上调LRP1的表达来影响CMBs病程。

1 材料与方法

1.1 研究对象 连续收集2017年1月～2019年5月就诊于我院的CMBs患者196例(男性152例，女性44例)。CMBs符合2014年中国脑小血管病诊治共识[7]定义。对照组：选取年龄、性别匹配的健康人99例(男性67例，女性32例)作为对照组。受试前所有的受试者取得知情并签署知情同意书。

1.2 试剂和仪器 我们使用Philips Ingenia 3.0T MR成像仪采集影像，磁敏感加权成像(susceptibilitg weighted imaging，SWI)图像采用3D梯度回波序列扫描后，进行最小密度投影重建(minimal intensity projection，MinIP)技术获得。检测血浆sLRP1和1，25-(OH)2D3所用试剂由上海源叶生物科技有限公司提供。

1.3 方法 按照年龄性别匹配的方法选择健康志愿者99例。采集所有研究对象的基本资料(年龄、性别、吸烟史等)、血液检测结果[血浆sLRP1和1，25-(OH)2D3]及头颅磁共振SWI检查。研究对象空腹8～10 h，采空腹肘静脉血5 ml，3 000 r/min离心10 min后取血浆放置于-80℃深低温保存。在全自动分析仪(日本日立7020)上应用散射比浊法检测血浆sLRP1和1，25-(OH)2D3水平，以上操作均由专业人员严格按照说明进行。颅脑磁共振SWI图像由一位神经放射学医师与两位神经内科高年资医师共同读取，记录并分析CMBs病灶的数量及部位。

1.4 统计学分析 采用SPSS12.0软件进行。组间计量资料的比较采用t检验，计数资料的比较应用卡方检验，不同研究指标间的相关性分析选择皮尔逊相关分析。所有统计学显著性水平设为0.05。

2 结果

2.1 CMBs组与对照组血浆sLRP1和1，25-(OH)2D3水平的相关性 见表1。将CMBs组与对照组血浆sLRP1和1，25-(OH)2D3等指标进行t检验。CMBs组的血浆sLRP1和1，25-(OH)2D3水平均低于对照组，差异具有统计学意义(均P<0.01)。

表1 CMBs组与对照组血浆sLRP1和1，25-(OH)2D3水平

2.2 CMBs组患者年龄、性别与血浆sLRP1和1，25-(OH)2D3水平的相关性 见表2。将CMBs组患者按年龄、性别分组，分别将血浆sLRP1和1，25-(OH)2D3进行对比。CMBs组患者的血浆sLRP1和1，25-(OH)2D3水平在CMBs患者不同年龄、性别组差异均无统计学意义(均P>0.01)。

表2 CMBs患者年龄、性别分层后血浆sLRP1和1，25-(OH)2D3水平比较

2.3 CMBs组患者CMBs病灶部位及数量与血浆sLRP1和1，25-(OH)2D3的相关性 见表3。CMBs组按照CMBs病灶部位的不同分为脑皮质CMBs组与脑深部白质CMBs组，并将CMBs病灶数量与血浆sLRP1和1，25-(OH)2D3等检验值进行皮尔逊相关性分析。结果发现，血浆sLRP1水平与病灶的数量具有负相关性(r=-0.216，P=0.002)，同时发现血浆sLRP1水平与脑皮质CMBs病灶数量呈负相关(r=-0.239，P=0.001)。

表3 CMBs病灶部位及数量与血浆sLRP1和1，25-(OH)2D3的相关性

3 讨论

与白种人相比，亚洲人群的CMBs与脑出血关系密切[8]。CMBs与认知障碍也具有明显相关关系，极大影响老年人生活质量[9]。同时，缺血性卒中患者的CMBs明显增多[2]，也增加了该类患者抗栓治疗的出血风险[10，11]，影响抗栓药物的选择策略。因此，CMBs受到了越来越多临床医师的关注和重视。LRP1作为一种重要的细胞表面受体，参与细胞信号传导、胞内运输以及胆固醇代谢等众多的生理过程，对于神经元发育和突触可塑性具有非常重要的作用，同时参与神经元胶质细胞和脑微血管内皮细胞等的表达[4]。相关机制研究表明LRP1可能通过下调脂蛋白相关磷酯酶A2(lipoprotein phospholipase A2，LPA2)活性，参与血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor，PDGF)[12]等途径在CMBs发生中起作用。本团队曾进行的研究证实LPA2在CMBs发生中可能起到重要作用[13]。LRP1的β链跨膜区断裂，释放出可溶性形式sLRP1，最新研究发现Aβ血浆浓度与sLRP1血浆水平相关[5]。血浆Aβ浓度升高提示脑脊液中Aβ被更多地转运至血浆中，从而导致脑脊液中Aβ浓度降低，可能会延缓CMBs发生。本研究发现CMBs患者的血浆sLRP1水平与脑皮质CMBs病灶数量负相关，提示高表达的sLRP1与脑内Aβ清除增多有关，对脑皮质CMBs的发生具有一定的保护作用。本研究中，CMBs患者的血浆sLRP1水平与脑深部CMBs病灶数量无明显相关，可能因为脑深部CMBs的发生与高血压具有更高的相关性[1]。

本研究还发现，CMBs患者的血浆sLRP1水平与年龄、性别均无明显相关性，说明血浆sLRP1水平检测受年龄性别影响较小。CMBs患者的血浆sLRP1和1，25-(OH)2D3水平低于正常人群，1，25-(OH)2D3可以通过上调LRP1的表达促进Aβ清除[6]，提示补充活性维生素D可能有利于预防CMBs发生或减缓疾病进展。我国西部地区中老年人群普遍存在活性维生素D不足的情况[14]，下一步我们将对CMBs患者进行补充活性维生素D治疗，对比治疗前后1，25-(OH)2D3和血LRP1水平的变化情况，并观察一年内两组间CMBs病灶部位及数量的变化。以进一步了解活性维生素D是否通过LRP1途径在防治CMBs发生中起到保护作用。

综上所述，CMBs患者的sLRP1和1，25-(OH)2D3水平较正常人群偏低。sLRP1水平与患者颅内CMBs数量具有相关性，尤其与脑深部白质CMBs数量更为相关。活性维生素D可能通过提高sLRP1的表达，对脑皮质CMBs的发生具有一定的保护作用。因此，临床上补充活性维生素D进行早期干预，将有助于CMBs的防治。本研究的局限性在于为单中心队列研究，存在选择偏倚及信息偏倚等可能，接下来有必要进行大样本的研究，并验证补充活性维生素D对预防CMBs的作用，希望能够得到更有意义的临床结果。