高效液相色谱仪的维护及问题处理

史欣诺

摘 要：随着社会主义经济经济的发展与科技力量的不断发展，高效液相色普仪器如今已经成为世界使用范围最多、发展最快的现代先进设备仪器之一。因为高效液相色谱是一种灵敏度、选择度高的高效率快速分析技术。而高效液相色谱仪不仅可以用来分析微量化学组分，也能用于生物化学分离制备技术。它的运用性靈活且运用范围广泛，生化药物的研究分析离不开高效液相色谱仪，其为促进医药业发展有着极其重要的贡献。为了保证高效液相色谱仪器的正常运转，少不了日常的维护处理，因此，此文将对高效液相色谱仪器的维护及问题处理作出分析。

关键词：高效液相色谱;仪器维护;问题处理

1.高效液相色谱仪系统

1.1相色谱仪的组成

高效液相色谱仪是经过理论发展而来，主要是由溶液贮器、高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据处理控制软件系统组成【1】。

1.2溶液的贮存器

因为溶液的特殊性，就要求制作贮液罐的的材料耐腐蚀，而且在贮存液体时，需要进行密闭处理，避免溶剂挥发时引起的流动相组成产生变化以及漂浮在工作区中的有害物浓度超过标准，损害人体健康。

1.3高压输液泵

市场的高效液相色谱柱通常用小颗粒作为填料，但用小颗粒填料填充会产生很大的阻力，所以需要增加高压泵【2】。而绝大部分高压泵是由不锈钢材料制成，因此对输液泵的要求很高。需要输液泵达到高精度、流速稳定、梯度精确性高的特性。而输液泵的主要功能是把样品随着流动相一起进入色谱柱中，实现样品分离。

1.4色谱柱

色谱柱是整个高效液相色谱仪中重要的组成，分离效果的优劣取决与色谱柱的质量。通常情况下，色谱柱是由不锈钢管制成，柱内壁光洁平滑【3】。物体的分离工作都是再色谱柱内进行。

（1）高效液相色谱柱的类别

高效液色谱柱有反向、正向、离子交换、体积排除以及疏水作用等几种分离类型【4】。反向分离主要在大部分有机化合物、多肽、蛋白质、核酸等生物大小分子中使用，通常情况下可溶于水;正向分离在中性以及非极性化合物中使用，样品能与有机溶剂相溶;在离子型化合物以及可解离型化合物中需要用离子交换分离方法，此时样品只溶于不同的PH值和有离子强度的水溶液中。

1.5检测器

高效液相色谱仪中的检测器在仪器的运作中起着至关重要的作用。检测器具有高灵敏性的特点，当溶质紫外光区或可见光区时，检测器可以检测出大部分的溶质【5】。一般有紫外吸收检测器、示差折光检测器以及荧光检测器。

2.高效液相色谱仪器的维护

为了保证相色谱仪的正常使用，通常会进行维护，以保证分析工作的正常进行。

2.1输液泵的维修护理

（1）高压输液泵的作用之一是防止一切固体小粒子进入泵内。起到保护柱塞、密封缸体以及单向阀的作业【6】。日常在使用前要进行流动相进行过滤，且要在泵的入口装过滤片。一旦过滤器达到一定使用量还要进行及时更换。

（2）要注意所有具有腐蚀特性的物质都不能存在与流动相中，禁止输液泵中留有缓冲溶液的流动相【7】。当结束分析作业后，要及时清理并清晰输液泵，加入适合保存色谱柱和泵护理的溶剂，且不宜把缓冲液流动相长时间留在泵中。

2.2高效液相色谱柱的维护

（1）在使用新的色谱柱时要注意润湿以及平衡色谱且流动相要能溶于谱柱储溶剂【8】。当色谱柱中流动相发生变化，要及时提高此时流动相的速度，此时也要维持基线平稳，通常使用十倍柱体体积的流动相进行平衡。对于不同的物质，色谱柱平衡时间不一致，应该注意控制。

（2）保持色谱柱的稳定性，不能撞击和剧烈震动色谱柱。可以安装一个保护柱子进行保护【9】。应保证流入的样品质量高，注入色谱柱前做好净化处理工作，尤其是一些成分较为多的样品，用滤膜多次过滤。

（3）当色谱柱受到污染时，及时用干净有机溶剂进行清理;如果观察到色谱柱内的压力开始增加或者时出现了交叉峰，要注意保护住是否到达使用极限。一旦发现问题，及时更换处理，若压力依旧持续升高，则考虑色谱柱被堵塞情况，选区适宜的有机物进行溶解处理。

当长时间不使用色谱柱时，要进行保存处理。一般四天内不使用不需要采取措施，一旦超过四天不使用，就需要再色谱柱中添加乙腈封闭保存，避免柱床干涸。

2.3检测器的维护

检测器再分析中有重要作用，检测器的性能直接影响数据的准确性，因此要注意检测器的维护。

（1）紫外吸收检测器一旦产生噪音将直接导致分析数据出现误差，而产生噪音主要是由于检测器池内产生了气泡。因此，检测器一旦出现噪音，就要用完全脱气的流动相减小气泡的数量【10】。当超过四天不用检测器时，也要进行系统清洗。噪音产生的另一个原因是因为检测器中光源使用时间过长，光源强度降低，从而导致噪音音量增加。所以，再使用完检测器后要及时关闭，减少空气中的小颗粒的进入，影响关传播效率，从而影响分析数据的结果。

3.结束语

由于高效液相色谱仪器在医疗业、化工业、食品分析检测等行业的广泛使用，其在促进人类生活发展，提高我国经济水平方面具有重大的意义。尤其是在药物含量的分析，药物在人体内的残留量分析方面，协助医生进行诊疗判断，帮助病患治疗效果显著，对疾病的诊断和疗效检测也起着至关重要的作用。因此，为了延长高效液像色谱仪的使用寿命，保证分析数据的准确性，对像色谱仪的日常检查，维护相色谱柱、检测器的正常运行就尤为重要。

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