一款胶原蛋白复合粉改善皮肤水分人体试食实验研究

□ 周致莹 乔小青 张旭光

汤臣倍健股份有限公司，广州，510000

1 引言

胶原蛋白（collagen）是一种非水溶性纤维状的含糖蛋白质，来自于脊椎动物的结缔组织。胶原蛋白不仅是脊椎动物细胞外间质的重要成分，而且是其体内含量最为丰富的蛋白质。在人体内，胶原蛋白对皮肤具有保水、保湿以及保持弹性等重要作用[1]。另外有研究表明，口服胶原蛋白对真皮和表皮均具有改善作用，因其吸收利用率好，易于扩散到皮肤的深层和表层，从而使角质层水分得以提高，达到表皮细胞活性提高、皮肤肤质提升的作用[2]。本款胶原蛋白复合粉除胶原蛋白外，还含有具有保湿作用的库拉索芦荟凝胶冻干粉（Aloe vera gel freeze-dried powder）和透明质酸钠（Sodium hyaluronate）。本研究将几款具有补水保湿作用的原料制成粉剂产品，按照《保健食品检验与评价技术规范》的方法进行功能学评价，对人体进行改善皮肤水份功能实验研究，为开发同类型的胶原蛋白保健食品提供实验支持。

2 材料和方法

2.1 受试物

胶原蛋白复合粉，粉剂，淡黄色粉末，本品的主要成分及含量为胶原蛋白（66.7%）、库拉索芦荟凝胶冻干粉（0.8%）、透明质酸钠（0.6%）。核准净含量：4.5g/袋，人体推荐量为每日1次，每次1袋，服用量为4.5g/日。安慰剂除功效成分外，在剂型、口感、外观和包装上与受试物一致。

2.2 受试对象

按自愿原则选择30-50岁，皮肤水分≤12的受试者

2.2.1 诊断标准

前额眉间皮肤水分≤12，无炎症、痛痒等症状。

2.2.2 纳入者标准

凡前额眉间皮肤水分≤12的自愿受试者，经体检合格均可进行试食观察。

2.2.3 排除者标准

2.2.3.1 年龄在30岁以下或者50岁以上者，妊娠或者哺乳期妇女，对本保健品过敏者。

2.2.3.2 合并有心肝肾和造血系统等严重原发性疾病，精神疾病患者。

2.2.3.3 不符合纳入标准，未按规定用受试物，无法判定功效或资料不全影响功效或安全性判断者。

2.3 实验设计与分组

采用自身前后对照和组间对照两种形式。104名受试者随机分为试食组和对照组，试食组服用受试物，对照组服用安慰剂。

2.4 服用剂量和时间

每日1次，每次1袋，服用限量为4.5g/日，连续30天，受试者在试食期间停止服用有关改善皮肤水分的药物或者其他保健品及化妆品，不改变原来的饮食习惯，正常饮食。

2.5 仪器与试剂

CA-500型血球计数仪（日本产），BM-200尿十项分析仪（美国产），日立7100全自动生化分析仪（日本产），Skin Analyzer SHP88仪（德国产），生化试剂盒全部由中生公司提供。

2.6 观察指标

以下观察指标实验前后各检查一次。

2.6.1 功效性观察

2.6.1.1 一般情况

详细询问病史，了解受试者饮食情况，观察精神状况、睡眠、饮食、大小便、血压等主要临床症状。观察受试物对受试者是否有不良影响。

2.6.1.2 皮肤水分检测

2.6.1.2.1 测定环境：在宽敞、通风条件良好，温度、湿度适中的空间环境稳定的检查室中进行。

2.6.1.2.2前额眉间皮肤水份测定

在安静状态下，用洁净棉球蘸蒸馏水清洁眉间被测部位，擦干后15分钟进行水分的测定，试食前后测定工作由同一台仪器、同一人操作完成。

2.6.2 安全性观察

2.6.2.1 血液、尿常规及便常规检查

红细胞计数，血红蛋白，白细胞计数，尿十项，便常规检测。

2.6.2.2 生化指标测定

血清白蛋白ALB，总蛋白TP，肝肾功能（总胆红素TBIL，谷丙转氨酶ALT，尿素氮BUN，肌酐CRE），血糖GLU、血脂（总胆固醇TC，甘油三酯TG）。

2.6.2.3 腹部B超，心电图，X线胸部透视。（在实验开始时检查一次）

2.7 改善皮肤水分功效判定

有效：水分得到改善，并经统计学检验有显著性差异。

无效：水分没有得到明显的改善。

2.8 数据统计分析

实验数据为剂量资料，用t检验进行分析。凡自身对照资料可以采用配对t检验，两组均数比较采用成组t检验，后者需要进行方差齐性检验，对非正态分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态方差后，用转换的数据进行t检验。

有效率采用χ2检验进行检验。四格表总例数小于40，或总例数等于或大于40但出现理论数等于或小于1时，应改为确切概率法。

3 结果与分析

3.1 一般状况

受试者104人，随机分为实验组和对照组，共100例有效，均为女性。试食组50例，年龄最小35岁，最大50岁，平均年龄（45.10±4.85）岁；对照组50例，年龄最小31岁，最大50岁，平均年龄（44.34±5.15）岁。

3.2 受试物对皮肤水分变化的影响

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3.3 功效判断

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由表1、2可见，试食组试食前后皮肤水分增加有显著性差异（P＜0.001），总有效率为84.00%显著高于对照组（P＜0.001）；实验后试食组皮肤水分增加2.70±2.21，而对照组无明显变化，两组比较（P＜0.001）。试食组试食后与对照组相比，皮肤水分有显著性差异（P＜0.001）。

3.4 一般情况

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3.5 血常规和血生化变化

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由表4可见，试食前后试食组和对照组各项血生化和血常规指标均在正常范围内。

3.6 血压、心率、尿和便常规变化

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由表5可见，试食前后试食组和对照组血压、心率、尿和便常规指标均在正常范围。

3.7 腹部B超，心电图，X线胸部透视试食前后试食组和对照组均在正常范围内。

3.8 受试者脱失率

纳入受试者104例，试食组52例、对照组52例。其中试食组试食结束时有2例未在规定时间按时接受复查；对照组有2例未在规定时间内按时接受复查。试食组与对照组各有2例符合受试者排除标准，有效受试者每组50例，受试者脱失率均为3.85%。

3.9 不良反应观察

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未见过敏及其他不良反应。

3.10 结论

采用自身与组件对照两种对照设计，纳入病例104例，随机分为试食组和对照组。有效受试者100例，试食组、对照组各50例。试食组按要求服用该胶原蛋白复合粉30天后，皮肤水分平均增加2.70±2.21，与对照组比较有显著差异（P＜0.001），其中42例皮肤水分增加，有效率为84.00%；对照组为安慰剂组，30天后复查时有20例皮肤水分增加，有效率为40.00%。试食组有效率高于对照组（P＜0.001）。服用该胶原蛋白复合粉前后，试食组自身比较及与对照组比较，皮肤水份均显著性增加（P＜0.001）。因此，可以认定，该胶原蛋白复合粉具有改善皮肤水分的作用。

试食者胸透、腹部B超、心电图均基本在正常范围内。试食该胶原蛋白复合粉前后，血常规、尿常规、便常规及血生化指标均在正常范围内，说明该胶原蛋白复合粉对受试者健康无不良影响。此外，试食该胶原蛋白复合粉后，未见过敏及其他不良反应。

4 讨论

本研究采用的方法为将受试者随机分成实验组和对照组两组，分别使用胶原蛋白复合粉和安慰剂，安慰剂除功效成分外，在剂型、口感、外观和包装上与受试产品一致。实验结果显示：食用胶原蛋白复合粉后受试者皮肤水分得到了显著的改善，同时血常规、血生化等各项指标的检测结果也均未见异常。试食组在试食胶原蛋白复合粉之后皮肤水分得到了明显的提高，并与试食前皮肤水分具有显著性差异，同时也与对照组皮肤水分改善情况比较后也具有显著性差异，说明该种胶原蛋白复合粉不仅能够改善皮肤水分，而且对人体没有任何的不良影响。

皮肤老化是人体衰老的外在表现，是内源性和外源性因素等综合作用的结果。胶原蛋白因其独特的皮肤修复能力，且具有较大的亲和力、良好的生物相容性，已被广泛应用于医学领域[3]。由于胶原蛋白分子含有许多的亲水取代基，因此，具有很强的保湿能力，具体体现在提高组织细胞的贮水能力、使皮肤润泽保湿[4]。大量的实验研究表明，试食胶原蛋白能起到改善皮肤水分的作用。马慧军[5]应用胶原蛋白凝胶对各类浅Ⅱ度以下烧伤创面进行护理，发现胶原蛋白凝胶组在色素沉着发生率及疼痛缓解时间上均有明显下降。周双琳[6]通过人体试食实验，口服小分子鱼胶原蛋白粉，发现可在一定程度地改善女性面部肤质，且无明显不良反应，具有较好的安全性和有效性。余宙[7]等使用鱼胶原蛋白粉进行了人体试食的安全性与功能性研究，发现试食组食用前后，自身对照皮肤水分有显著差异（P＜0.05），具有显著的改善皮肤水分作用。

作为该款胶原蛋白复合粉其他两种成分亦有保湿作用，有研究表明库拉索芦荟提取液可以很好的降低皮肤失水率和提高皮肤的含水量[8]。万克英等[9]通过动物试验，表明芦荟凝胶中的多糖成分能促进皮肤组织中纤维连接蛋白增加，有助于皮肤水分的改善。透明质酸由于具有很强的吸水性而有保湿作用，其保湿效果与甘油相比效果更好，能够使用皮肤在不同季节环境下保湿的需求[10]。