辛硫磷对泥鳅脑谷丙转氨酶活性的影响

于敏 岳丹霞 乔媛媛

摘要 研究了5种浓度辛硫磷处理液对泥鳅脑细胞谷丙转氨酶（GPT）活性的影响。结果表明：低浓度的辛硫磷处理液对泥鳅脑细胞中的GPT活性起诱导作用，而高浓度则起抑制作用。建议以泥鳅脑组织GPT活性变化作为水环境监测的生物指标，从而达到评价水生生态环境的目的。

关键词 辛硫磷;泥鳅;谷丙转氨酶;生物指标

中图分类号 X503.225文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2019）17-0089-02

Abstract Effects of 5 kinds of concentrations of phoxim on the activity of GPT for loach brain were studied.The results showed that the activities of GPT were induced by the lower concentration of phoxim，but restrained by the higher ones.It was suggested that the change of GPT activity in loach brain should be used as a biomarker for water environment monitoring，so as to achieve the purpose of evaluating aquatic ecological environment.

Key words Phoxim;Loach;GPT;Biomarker

辛硫磷（phoxim）是一種高效、低毒、低残留的广谱有机磷农药[1]。辛硫磷抑制胆碱酯酶，使其在体内大量积蓄，使神经兴奋失常，从而导致虫体死亡[2]。闫建国等[3]采用微核试验和单细胞凝胶电泳试验对辛硫磷的遗传毒性进行检验，结果表明辛硫磷对小鼠具有遗传毒性;刘秀芳等[4]的研究也表明一定浓度的辛硫磷对小鼠生殖系统有毒性作用，并且对小鼠具有致畸性。

泥鳅是国内外常用的试验鱼种，它极容易饲养，在我国南北方均有广泛的分布，因其分布广泛，它不仅在作为试验对象方面有重要意义，而且在作为检测指标方面也有十分重要意义。近年来，生态毒理学和生态化学领域越来越多地将生物体内的酶指标作为生物学的标志物来评估受试化学品对生物的毒害作用[5]。谷丙转氨酶（glutamicpyruvic transaminase，GPT）是泥鳅脑内的重要生物标志物[6]。生物标志物具有特异性强、反应灵敏的特点，并且能够对毒性效应起到早期预警的作用。以泥鳅脑组织中谷丙转氨酶作为生物标志物能够反映出辛硫磷毒物对泥鳅脑的污染水平。

农药会随着水的迁移进入到环境中，导致水生生物得病，甚至导致水生生物死亡，目前在国内鲜见相关方面的报道。笔者以泥鳅为研究对象，以期为我国农药的安全使用提供指导，从而达到保护环境和人体健康的作用。

1 材料与方法

1.1 材料 泥鳅全部购自烟台市红旗水产市场，平均质量约8.0 g/条;辛硫磷乳油由山东胜邦鲁南农药有限公司生产（40%，乳油）;试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.2 方法

1.2.1 急性毒性试验。通过预试验，初步得到使泥鳅最高全部不死亡浓度和致使泥鳅最低全部死亡的浓度。根据最高全部不死亡浓度和最低全部死亡的浓度设计67.5、70.0、72.5、75.0、77.5、80.0、82.5 ml/L药液共7个急性毒性浓度组，根据24 h和48 h所得出的数据，用加权概率法计算出半数致死浓度TLm，进而得到安全浓度。

1.2.2 慢性毒性试验。从每个试验组中挑选健康、体型均一、体表没有破损的泥鳅若干条进行慢性毒性试验。以即得的半数致死浓度为基础，用等比数列的方法，设计出3.55、7.10、14.20、28.40、56.80 μL/L共5个浓度组（标记为1～5组，每个浓度组设置3个平行组），并按照设计好的浓度向各个水桶中加入相应的辛硫磷处理液。另设一不加辛硫磷的对照组（标记为0组），每个试验组3次平行。在24、48、96 h后分别取各浓度组中有活力的泥鳅肝脏，对谷丙转氨酶活性进行测定，脑组织匀浆的制备和转氨酶活性的测定按照南京建成生物工程研究所提供的方法进行。

2 结果与分析

2.1 急性毒性试验结果 根据处理过24 h和48 h的泥鳅死亡数，利用加权概率法，并用统计学软件进行统计处理分析，分别得出24 h半数致死浓度（TLm24）为81.52 μL/L，95%置信区间为（77.85，98.32）μL/L;48 h半数致死浓度（TLm48）为67.98 μL/L，95%置信区间为（19.02，72.26）μL/L。

根据上述得出的结果，按下面公式计算出安全浓度：

安全浓度=TLm48×0.3（TMm24/TLm48） 2

式中，TLm24 和TLm48 分别表示24 h半数致死浓度和48 h半数致死浓度。

代入上述试验数据，求得其安全浓度为14.18 μL/L。

2.2 慢性毒性试验结果 运用统计软件IBMSPSS19和析因设计的方差分析研究辛硫磷对泥鳅脑谷丙转氨酶（GPT）活性的影响。24、48、96 h不同浓度组谷丙转氨酶活性的测定结果见表1;酶活性比较如图1所示。

由表1可知，不同浓度的辛硫磷对泥鳅的诱导作用是不同的，相同浓度的处理液中，随着时间的延长，诱导作用稍有变化。在经过相同时间段的处理之后，不同浓度的辛硫磷对泥鳅脑组织中谷丙转氨酶活性的诱导作用有明显差异。

由图1可知，对照组的谷丙转氨酶活性随着时间的延长基本没有变化。试验1组中，谷丙转氨酶活性总体呈现上升趋势;2组中，谷丙转氨酶活性随着时间的延长呈现上升趋势，48～96 h内的上升趋势比24～48 h明显;3组中，谷丙转氨酶活性随着时间的延长，呈现先上升后下降的趋势，96 h的谷丙转氨酶活性低于未处理时的水平;4组及5组中，谷丙转氨酶活性随着时间的延长一直呈现下降趋势，4组中24～48 h的谷丙转氨酶活性下降趨势比48～96 h明显。

3 结论

谷丙转氨酶在动物的线粒体中广泛存在，是一种对动物机体非常重要的转氨酶，在动物机体的蛋白质代谢过程中能够起到非常重要的作用[7-10]。该试验结果表明，在较低的辛

硫磷浓度时，泥鳅脑组织中的谷丙转氨酶活性首先呈现上升的趋势，这可能是由于泥鳅对辛硫磷产生的应激反应造成的。但是随着时间的延长，泥鳅脑组织中谷丙转氨酶活性呈下降趋势，这可能是因为泥鳅自身的抵抗能力有限，已经不能自己解除辛硫磷对其的毒害作用，辛硫磷对泥鳅产生了较强的毒害作用，所以造成谷丙转氨酶活性下降。在经过较高浓度的辛硫磷毒液处理之后，泥鳅脑组织的谷丙转氨酶活性一直呈下降趋势，这可能是由于辛硫磷的浓度太高，泥鳅自身不能抵抗该浓度辛硫磷毒液的毒害作用。

参考文献

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[4] 刘秀芳，宁艳花，屠霞，等.辛硫磷对雄性小鼠生殖细胞毒性作用的实验研究[J].宁夏医学院学报，2006，28（5）：412-414.

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[10] 何飞燕，单跃，李玉红.谷丙转氨酶和总胆红素浓度预测CYP3A的活性[J].中国现代应用药学，2015，32（8）：1008-1013.