免疫奶牛群布鲁氏菌病的实验室诊断经验分析

阿米娜·买买提

摘 要 现阶段市场对于牛奶制品的需求量非常大，所以我国很多地方的奶牛养殖户投入了大量的资金和技术进行奶牛养殖，以期牛奶制品进入市场后获得高额的经济收益，但是受到多种因素影响，当前奶牛养殖期间奶牛有着较高发生布鲁氏菌病的风险，该疾病具有较高的传染性、死亡率等特点，一旦出现，给养殖户造成的经济损失较多，所以需要养殖户对于免疫奶牛群布鲁氏菌病的实验室检查诊断工作加强关注并予以积极配合，以此降低牛群患病风险。基于此本文对养殖场免疫奶牛群布鲁氏菌病实验室诊断工作基本情况进行了分析，探究了提升诊断结果准确性的有效诊断方法。

关键词 免疫；奶牛群；布鲁氏菌病；实验室；诊断

布鲁氏菌病属于奶牛养殖期间的常见疾病，病原体为革兰氏阴性菌，好发于春季、冬季，属于人畜共患传染疾病，临床症状主要为潜伏时间非常长、母牛流产、精神状态不佳、关节炎、体重下降、乳房炎、睾丸炎、奶品质差等，发病之后的治疗、根治难度非常大，所以奶牛养殖场的奶牛患有该疾病后，养殖户面临的经济风险非常高。

1 材料与方法

1.1 材料

选择本地区多处奶牛养殖场、散户的奶牛为研究对象，采集其中300头奶牛（月龄在13月以上、不超过16个月，均经过布鲁氏菌病免疫疫苗接种）的血液，应用离心机作以血液血清样本制作。结合本次实验室诊断的需要，进行实验试剂的准备，包括布氏杆菌抗体竞争监测试剂、虎红平板凝集试剂、聚合酶链反应试剂。

1.2 实验室诊断方法

本次研究中选择三种方法来诊断奶牛疾病免疫后的转阳率，即酶联免疫吸附测定法、虎红平板凝集试验法、聚合酶链反应法。

2 结果

（1）酶联免疫吸附测定：取出100份布鲁氏菌病免疫奶牛血液血清进行试验，研究奶牛该疾病抗体转阳率，其中阳性奶牛例数为12头（12.00%）；（2）虎红平板凝集试验：100份免疫奶牛血液血清经过该法检测转阳例数后，共检出15例转阳奶牛（15.00%）；（3）聚合酶链反应：100份免疫奶牛血清的转阳率通过该法检测后，检出阳性奶牛头数为8头（8.00%）；因此综合分析上述免疫奶牛布鲁氏菌病转阳情况，发现虎红平板凝集试验用于该指标检测时，结果准确率高，与实际转阳奶牛头数保持一致，其中检测对象的免疫期在半年或超过该时间的条件下，可以得到准确的检测结果，酶联免疫吸附测定法、聚合酶链反应法作用于布鲁氏菌病免疫奶牛转阳检测诊断中，也有着较好的检查结果，其中酶联免疫吸附测定法应用后检查出来的阳性免疫奶牛中有 7头属于流产奶牛，之后再次利用聚合酶联反应法对这7头流产奶牛进行疾病转阳的检测，结果验证了这一点，说明这两种方法同样在免疫奶牛群疾病阳性检测中有着一定的检查诊断作用。

3 结论

现阶段进行免疫奶牛群布鲁氏菌病实验室诊断时使用的方法较多，不同方法的应用条件与效果存在较大差异，所以需要实验室工作人员结合受检奶牛群的身体基本情况，选择最佳的诊断手段进行应用，以期奶牛群罹患布鲁氏菌病的奶牛可以被及时检查出与处理，避免病原体在养殖场所内大规模传染所致的严重后果发生。

首先虎红平板凝集试验，利用该实验室诊断方法对于布鲁氏菌病免疫奶牛进行阳性率转变检查时，适用于免疫期（猪型2号布病疫苗）在6个月或以上的奶牛群体，究其原因是奶牛犊牛在娩出后至生长到8个月时进行布鲁氏菌疾病疫苗接种，之后在半个月左右时奶牛身体内会出现抗体，在总抗体比例中的占比约为40%，待免疫期到3个月时，抗体比例会达到最高峰，然后免疫期到4个月-9个月时抗体会逐渐下降直至消失，因此可以选择在免疫期处于6个月时对免疫奶牛进行布鲁氏菌病转阳情况的检查，可准确检出免疫奶牛群中转阳的奶牛只数，使得养殖户可及时对这部分奶牛进行疾病发生检查确诊与治疗、无害化处理，防止布鲁氏菌病在养殖场内继续扩散发展[1]。其次，酶联免疫吸附测定法，应用该方法检测疾病免疫奶牛转阳情况时，与虎红平板凝集试验法检测条件一致，即对疾病免疫时间超过半年的猪型布病疫苗免疫奶牛进行检测，可得到较为理想的检测结果，或者奶牛接种了19菌株疫苗，待免疫期在半年时检测转阳情况，此时奶牛身体内疫苗抗体残留量较少，最终检查出的结果可以准确反映出免疫奶牛是否转阳的结果。最后聚合酶联反应法，该检测方法在布鲁氏菌病免疫奶牛转阳率实验室诊断期间，存在敏感性差的问题，所以检测得出的结果显示阴性率较高，如果检测对象应用此法检测分析了转阳情况，那么基本上要在检测结果出来后等待一个月，再次对检测对象进行转阳率检测，以此综合两次结果才可以得出最终的阳性率检出结果，最后该结果仍不能将检测对象中属于疾病转阳的奶牛完全检出，因此提示在对奶牛场的布病奶牛接种疫苗之后进行转阳诊断时，尽量不要用聚合酶联反应法进行阳性检测，如果应用了该检测法，那么仅对免疫奶牛发生早期感染之后的乳品样本进行病原学的检测即可，不可进行血清样本的布病转阳检测[2]。

4 结束语

综上所述，布鲁氏菌病对于奶牛场养殖奶牛的身体健康、生命安全造成的威胁较大， 需要养殖户对于奶牛该疾病涉及的相关内容进行深入的研究学习，准确把握奶牛发病后的临床症状表现，每年在适当的时候联系防疫人员来为全部适龄奶牛接种布病疫苗，以此降低该牛病发生风险，与此同时养殖户需要对免疫期奶牛的疾病转阳情况加以关注，委托防疫中心工作人员在适当的免疫期限内，来对全部奶牛作以疾病转阳率的实验室诊断检查，以便了解与准确把握该养殖场免疫奶牛布病发生情况，尽快制定有效措施进行疾病防控，减轻奶牛该传染病发生后所致的严重危害，其中虎红平板凝集试验法及酶联免疫吸附测定法要多进行应用，依托这两种检测方法可以对接种了疫苗的奶牛发病情況做出准确的判断，为奶牛场该牛病的良好防控提供数据依据，所以这两种实验室检查诊断方法需要在后续的免疫奶牛布鲁氏菌病的临床检测中多进行应用与推广，助推本地区奶牛养殖产业可以长远稳健发展。

参考文献：

[1]武燕. 靖边县奶牛结核病和布鲁氏菌病检测与分析[D].西北农林科技大学，2015.

[2]高明春，王君伟.布鲁氏菌病实验室诊断技术及其适用性评析[J].中国奶牛，2012（04）：35-38.