液质联用检测猪肉中兽药残留技术研究

孙芳 宋金露

摘要：该次研究尝试使用液质连用检测猪肉中兽药残留情况，在充分借鉴前人研究文献的基础上，对相应的研究方法不断进行优化。该试验得出的检测限度为0.1～50.0μg/kg，平均加标回收率为77.5%～99.9%，整体的检测效果较好，能用于日常猪肉制品中兽药残留检测。在此基础上提出了使用液质连用检测猪肉中兽药残留技术的对策，希望通过本次研究，对广大同行有所帮助。

关键词：液质连用;猪肉;兽药残留;检测技术

中图分类号：0657.63;TS251.7

文献标识码：B

doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.23.002

0引言

兽药残留主要是指兽药蓄积在动物源制品中的含量多少，主要是指动物及动物制品以及可食用部分所所含兽药及其代谢产物以及兽药有关杂质的量。所以兽药残留包含的范围十分广泛，既包括了兽药本身又包括兽药在动物体内代谢所产生的各种代谢产物以及兽药中的各种杂质[1]。近年兽药的使用比例越来越大，使用种类越来越多。然而很多畜牧养殖从业者在进行兽药防控多种疾病中不能做到科学使用，也没有制定严格的休药期，甚至存在违法使用国家明令禁止的各种兽药添加剂，导致大量动物源食品中兽药残留超标，威胁到消费者身体健康。某些兽药通过饮食渠道还会进人人体，在人体中不断蓄积积累超过一定标准后，造成人类出现急性中毒，甚至会出现致癌、致畸、致突变。解决动物制品兽药残留问题，对保障畜牧养殖产业健康发展，维护消费者身心健康有着重大现实意义。

1试验过程

1.1仪器设备

本次研究中需要的仪器设备主要包括超高效液相色谱仪、串联质谱仪、配电喷雾，电离源分析天平、高速匀质机、氮吹仪、冷冻离心机、涡旋震荡器、超纯水系统、孔径为0.22μm的滤膜、有机相。

1.2材料选取

本次试验选择的猪肉不含有本次带检测的任何物质，并将其作为空白基质。在试验中应用到的试剂主要包括乙腈、甲醇、乙酸铵、甲酸、8：2配置的甲醇水混合液。25种磺胺类药物混标（100mg/L于色谱纯甲醇）、14种奎诺酮抗生素混标（100mg/L于LC-MS级甲醇）和四环素类抗生素混标（100mg/L于色谱纯甲醇）[2]。

1.3方法

使用电子天平精确的称量猪肉组织称量2.00g放置在离心管道中，然后向其中加入5mL甲醇+8：2配置的甲醇水混合液，将其放置在高速匀质机中，按照每分钟10000r作用1min，然后选择使用甲醇3mL+8：2配置的甲醇水混合液清洗刀头并转入到同一个离心管中，然后再使用8：2配置的甲醇水混合液定容到10mL，超声提取15min，然后将液体放人冷冻离心机中，按照5000r/min的速度，离心10min取上层清液经过孔径为0.22μm的滤膜，得到的溶液上机测定。同时争取6份空白新鲜猪肉每份2.00g，并向其中依次加入标准中间液。磺胺类药物和奎诺酮类抗生素的浓度分别控制为0、0.2、1、10、50、100μg/L，四环素类抗生素的浓度分别控制为零时20、50、100、500μg/L。然后按照相应的标准进行样品处理，得到基质标准工作曲线[3]。

2结果分析

2.1兽药残留检出限分析

取空白样品基质，在最低点磺胺类药物和奎诺酮类药物的浓度分别为1.0μg/kg，四环素类药物的浓度分别为50g/kg。在整个实验操作中，信噪比控制为50～870，根据相关标准，以3倍信噪比作为检出限，本次采用的检测方法得到的几类化合物的检出限能满足日常猪肉兽药残留剪除限要求。同时在操作中，由于定容溶剂中含有的有机相比例相对较高，初始流动相比例中水相比例相对较高，在满足最低检出限的基础上，应该尽量控制好进样的体积，这样能进一步减少溶剂对实验操作产生的不良影响，因为体积过大可能会进一步影响到峰值，进而导致信噪比下降。

2.2回收率分析

本次研究选取不含有待检测物质的空白猪肉作为检测基质，分别在磺胺类药物和奎诺酮类抗生素的浓度分别控制在0、0.2、1、10、50、100μg/L，四环素类抗生素的浓度分别控制为0、20、50、100、500μg/L时，所测得的各个化合物的平均回收率在77.5%～99.9%，回收率较高。

3兽药检测措施

3.1重点做好宣传教育工作

猪肉兽药残留检测工作开展中，应充分认识到检测质量中存在的多种问题，并寻找问题产生的关键原因。检测管理部门应该承担相应的责任，发挥自身职能，切实履行好质量监督管理的职责，联合生产管理部门不断加强检测方案的总结和完善，组成质量评审委员会，通过审核委员会的全面评价和审核通过后，才能进行下一步的宣传推廣工作，确保兽药检测质量管理工作在源头上不出现问题。在工作队伍建设中，一定要确保选用合理的人员，保证管理人员能严格按照确定的方案进行有效的宣传推广。在宣传中要创新工作理念，工作方式，避免社会大众对兽药残留检测工作产生误解，加强检测质量管理。

3.2注重做好人员培训

在猪肉兽药残留检测工作开展中，如果没有充分认识到管理工作对检测质量的关键作用和重要指导意义，就不能提起重视程度，切实做好相关工作人员的培训工作。如果一直保持这种局面，导致猪肉制品中兽药残留检测质量得不到有效的管理和控制，不管是对检测企业还是社会大众，都会产生较大的经济损失，造成的损失不可挽回。因此就要从兽药检测管理的实际工作出发，各项管理工作开展前，一定要构建完善的预定方案，要充分考虑现有工作人员的工作能力和专业水平。定期邀请高级讲师，专业技术人才对现有的管理人员进行专业培训，部门的领导人员也需要起到带头作用，积极参与到专业培训工作中，进而在整个部门内部能形成一种良好的学习氛围。每年应该确定年度培训计划和培训方案，并按照相关流程分步骤实施，确保各项工作能扎实推进。

3.3加强检测技术创新

近年，随着我国科学技术不断发展，猪肉兽药残留检测中，一系列先进的仪器设备和技术应用其中，极大缩短了检测周期，提高了检测精确度和精准性。为了更好的适应新时期对猪肉制品兽药残留检测提出的新要求，就需要在日常工作中不断加强技术创新，只有不断加强技术创新，转变传统工作理念，才能最大程度的减少经费投人，减少人员投入。为了切实达到上述要求，就要求部门的领导人员高度负责，发挥自身示范带动作用，认真组织好检测管理规划和设计工作，制定合理的设计方案。此外还应该不断加强对现有工作队伍的动员教育，引导广大工作人员全面参与其中。

4结束语

本次选择液质连用检测猪肉中兽药残留是在总结前人研究经验和研究文献的基础上，对相应的检测方法进行了进一步优化，进一步考量了影响检出含量的因素，并进一步论述了各个因素间的联系。最终检测结果可知，最低检出限平均为0.5μg/kg，平均加标回收率为77.5%～99%。

参考文献

[1]孟娟，石莹，张晶，等.超高压液相色谱-喷雾串联四极杆质谱法测定猪肉食品中8种β-受体激动剂[J].食品安全质量检测学报，2013，4（1）：129-134.

[2]高玲，张丹，曹军，等.高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中大环内酯类药物残留[J].中国兽药杂志，2012，4（4）：29-33.

[3]李春风，岳振峰，赵凤娟，等.液相色谱串联质谱测定水产品中吩噻嗪类药物残留的研究[J].中国兽医学报，2010，30（3）：384-387，392.