不同贮藏方法对金花茶花品质的影响

陈菁瑛 张武君 黄颖桢 刘保财 赵云青 邹福贤 陈莹 吴婷婷

摘 要：【目的】探讨不同贮藏方法对金花茶花品质的影响，为金花茶花产品的开发利用提供依据。【方法】以冷冻干燥的金花茶花为材料研究低温避光、室温曝光和室温避光3种贮藏方法对金花茶花品质的影响。每间隔3个月测定其总黄酮、总多糖、总皂苷和茶多酚4种生理活性成分及氨基酸、蛋白质和粗脂肪3种营养成分的动态变化，并进行主成分分析和多指标综合评价。【结果】生理活性成分和营养成分含量及其表面色泽的变化与贮藏方法及时间有关。相同贮藏条件下各贮藏方法的金花茶花总皂苷、茶多酚、蛋白质含量均下降，粗脂肪和总多糖含量升高;低温避光贮藏的总黄酮、总皂苷含量均较其他两种贮藏法的高，粗脂肪则较之低，花色保持不变;室温曝光下总黄酮和总皂苷较贮藏前降低，粗脂肪较贮藏前升高，花朵表面色泽加深变暗。【结论】总黄酮、总皂苷、总多糖、氨基酸总量可作为综合评价金花茶花品质的可选指标。低温和避光利于金花茶花贮藏。从金花茶花品质稳定、外观色泽变化及提高金花茶花等级和售价等方面综合考虑，金花茶花以室温避光贮藏不超过6个月、低温（5℃）避光贮藏不超过12 个月为宜。

关键词： 金花茶花;贮藏;质量评价;主成分分析

中图分类号：R 931.4文献标识码：A文章编号：1008-0384（2019）04-479-09

Abstract： 【Objective】Effects of method and duration of storage on the quality of Camellia nitidissima flowers were studied to provide reference for the pgoduct development of Camellia nitidissima flowers. 【Method】Freeze-dried camellias were stored in the dark at low temperature （DLT）， under light exposure at room temperature （LRT）， or in the dark at room temperature （DRT）. The changes on 4 functional ingredients （i.e.， flavonoids， polysaccharides， saponins， and polyphenols）， 3 nutrients （i.e.， amino acids， protein， and crude fat）， and exterior color of the flowers were determined every 3 months for a principal component analysis.【Result】 Under same storage conditions， the contents of saponin， tea polyphenol， and protein of the flowers decreased with time， but those of fat and polysaccharide increased. In a same sampling period， flavonoids and saponins were higher in the flowers under DLT than the other two treatments， but less on fat， and no significant changes on color. Under LRT， flavonoids and saponins in the stored flowers were lower than prior to the storage， whereas， fats higher， and the color intensified and darkened. 【Conclusion】The principal component analysis showed that total flavonoids， saponins， polysaccharides， and amino acids could be used as indicators for comprehensive quality evaluation on C. nitidissima flowers. Storage under DRT within 6 months or DLT at 5℃ for less than a year was considered adequate insofar as the stability， exterior color， flower grading， and market value of the freeze-dried camellias are concerned.

Key words： Camellia nitidissima flower; storage; quantitative analysis; principal component analysis

0 引言

【研究意義】金花茶是山茶科Theaceae山茶属Camellia金花茶组植物Camellia nitidissima Chi，是茶花家族中唯一花瓣金黄色的珍稀物种，其花金黄色，蜡质光泽，享有“茶族皇后”、“植物界大熊猫”的美誉，其花量少难求，被视为尊贵珍品，具有极高的观赏、食用及药用价值[1-3]。金花茶为广西传统壮药，收载于《广西壮族自治区壮药质量标准》[1]，用于咽喉炎、肾炎、痢疾、高血压、预防肿瘤和月经不调等症[4-5]。现代研究表明，金花茶含有黄酮、皂苷、多糖、植物多酚等多种生理活性成分和氨基酸、蛋白质等营养成分[5-6]，2010年被批准为国家新资源食品[7]，目前福建、广东、云南等地引种并规模化种植。【前人研究进展】迄今，国内外学者开展了金花茶种质资源、栽培技术、化学成分、指纹图谱和开发利用等方面[8-12]的研究。【本研究切入点】如何有效贮藏金花茶花、最大程度保障金花茶花的品质稳定的技术，尚未见深入的研究报道。因此，研究贮藏时间和储藏条件对金花茶花的品质变化的影响，可为金花茶花的贮藏提供科学指导。【拟解决的关键问题】比较3种不同贮藏条件（低温避光、室温避光、室温曝光）金花茶花中总黄酮、粗多糖、总皂苷、茶多酚、氨基酸、蛋白质和粗脂肪含量的变化趋势。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试的冷冻干燥金花茶花由福建世纪金花茶科技有限公司提供，经黄连冬高级工程师鉴定为山茶科防城金花茶Camellia chrysantha var. phaeopubisperma S.Y.Liang et Z.H.Tang。

1.2 仪器与试剂

KQ-400DE超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）;UV1600紫外可见分光系统（天津市拓普仪器有限公司）;R-210旋转蒸发仪，B-491水浴锅（瑞士BUCHI公司）;予华SHZ-D循环水式真空泵（巩义市予华仪器厂）;BP210十万分之一天平（Sartorius公司）;JSP-200高速多功能粉碎机（浙江省永康市金穗机械制造厂）;种子低温低湿储藏柜（浙江托普仪器有限公司）;离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司）;涡旋机（IKA）。

芦丁（中国食品药品检定研究所，纯度：92.4%，批号100080-201409）;人参皂苷Rg1（中国食品药品检定研究所，纯度：93.6%，批号110703-201530）;没食子酸（中国食品药品检定研究所，纯度：90.8%，批号110831-201605）;葡萄糖、乙醇、甲醇、正丁醇、福林酚、苯酚、冰醋酸、香草醛、无水碳酸钠、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、浓硫酸、高氯酸均为国药分析纯;试验用水均为蒸馏水。

1.3 贮藏方法

将冷冻干燥的金花茶花分成3组，分别置于低温避光（4～6℃避光）、室温曝光、室温避光贮藏9个月，每隔3个月随机取样用于检测，样品检测前经干燥后粉碎，过40目筛，备用。

1.4 茶多酚、总黄酮、总多糖、总皂苷含量测定

1.4.1 茶多酚 参照茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法GBT 8313-2008 [13]，得到茶多酚待测液（Ⅰ），按福林酚氧化法测定。

1.4.2 总黄酮 参考黄兴贤等[14]、韦秀芝等[15] 的方法，并稍作修改得提取流程：称取0.5 g 样品粉末于50 mL锥形瓶中，加75%乙醇40 mL，20℃下超声提取0.5 h，过滤，用75%乙醇洗涤残渣，合并滤液定容于50 mL容量瓶中，得总黄酮待测液（Ⅱ），按亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色法[15]测定。

1.4.3 总多糖 参考韦璐等[16]的方法，稍作修改，在总多糖的提取基础上，将提取总多糖后的残渣加45 mL水于75℃超声提取1 h，过滤，用水洗涤滤渣，合并滤液定容于50 mL容量瓶中，得多糖待测液（Ⅲ），按苯酚-硫酸法[17]测定。

1.4.4 总皂苷 参考高丽萍等[18] 的方法，并优化提取方法，称取样品粉末0.5 g 于锥形瓶中，加入50 mL 75%乙醇，20℃下超声0.5 h，过滤，滤液旋蒸至無醇味，转移至分液漏斗，加入适量水饱和正丁醇萃取两次，合并正丁醇层，旋蒸至干，加入甲醇复溶并定容至10 mL容量瓶中，摇匀，作为皂苷待测液（Ⅳ）。按唐昭领等[19]优化的香草醛-冰醋酸-高氯酸法测定。

1.5 氨基酸、蛋白质、脂肪含量测定

分别采用食品国家安全标准GB5009.124-2016氨基酸测定法、GB 5009.5-2016蛋白质测定法、GB 5009.6-2016脂肪测定法，测定不同贮藏方法处理金花茶花在不同贮藏期的氨基酸、蛋白质、粗脂肪含量。

1.6 数据分析

每组样品平行测定3次，数据采用SPSS 20.0软件和 DPS 14.50数据处理软件进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 贮藏方法与贮藏时间对金花茶花主要生理活性成分的影响

金花茶花在低温避光、室温曝光、室温避光3种贮藏条件下的主要生理活性成分含量变化（表1、图1）表明，贮藏方法及贮藏时间不同，生理活性成分含量的变化幅度及样品的色泽不同。低温避光贮藏的总黄酮含量变化为先降后升的趋势，3个月时降至最低值后逐渐升高并保持较高的水平，可能原因是金花茶花总黄酮包括黄酮及其苷类化合物[20]，而黄酮苷类化合物随着贮藏期的延长可能发生水解转化为更稳定的黄酮化合物并保持一定水平，使总黄酮含量呈现降低后升高的趋势;室温下曝光和避光贮藏的总黄酮含量变化趋势相同，均表现为降、升再缓降的趋势，9个月时总黄酮含量均低于贮藏前和低温避光贮藏的样品。3种贮藏条件下的总皂苷、总多糖和茶多酚含量的变化趋势分别相同，总皂苷表现为先升后降，以低温避光的降幅最小，表明低温利于总皂苷保存，已有对西洋参的贮藏期皂苷含量变化研究表明，其酸性皂苷在贮藏过程中先升高后降低[21]，与金花茶花总皂苷含量变化结果相似，而西洋参碱性皂苷含量不断下降，说明总皂苷贮藏期间酸性和碱性皂苷可能发生转化[21];总多糖与茶多酚含量的变化均表现为降、升、降的趋势，低温避光、室温曝光和室温避光3种贮藏法的总多糖含量均较藏前分别增加了21.0%、27.9%、29.3%，可能与金花茶花自由水的减少有关，与甜高粱茎秆贮存期内糖分随着样品水分和汁液含量的降低而逐渐升高的研究结果一致[22];茶多酚含量均较藏前略有下降，可能与茶多酚发生氧化有关。由表1和图1可知，低温避光贮藏下的总黄酮、总皂苷含量在贮藏过程中均较其他两种贮藏方法的高，且花色保持亮黄色不变;室温曝光下总黄酮和总皂苷较贮藏前分别下降11.43%和6.04%，花朵表面颜色加深变暗为棕色，室温避光贮藏的总黄酮和总皂苷分别下降10.29%和6.67%，花朵表面颜色加深变为黄棕色，光照强度可能影响花朵的抗氧化能力[23]，避光保存有助于金花茶花维持原有的色泽。此外，温度和光照对金花茶总黄酮和总皂苷含量影响较大，低温和避光利于金花茶贮藏。

2.2 贮藏方法与贮藏时间对金花茶花营养成分的影响

贮藏方法与贮藏时间不同金花茶花各营养成分变化趋势不同。本研究共检测了金花茶花中17种氨基酸（表2），其中包括7种人体必需氨基酸和9种药效氨基酸（天门冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、精氨酸），药效氨基酸中天门冬氨酸、谷氨酸含量较高，均在0.4%以上;必需氨基酸含量大小为亮氨酸>赖氨酸>缬氨酸≈苯丙氨酸>苏氨酸≈异亮氨酸>蛋氨酸，金花茶花中必需氨基酸占氨基酸总量的37%～40%。氨基酸总量与药效氨基酸含量的变化趋势一致（图2-A、B），均表现为先缓升后下降再汇聚的趋势，贮藏9个月时3种贮藏法的总氨基酸与药效氨基酸含量变化均呈汇聚趋势，含量分别相近。3种贮藏法的蛋白质和粗脂肪含量变化趋势分别一致，蛋白质含量在贮藏前6个月变化不明显，6个月后迅速下降，至9个月时3种贮藏法的含量接近，下降幅度达30%以上，说明贮藏时间对蛋白质含量影响大，蛋白质在贮藏期发生降解，与贮藏时间呈正相关。粗脂肪含量的变化均表现为前6个月快速下降，后升高，贮藏至9个月时室温下曝光和避光两种贮藏法的含量接近，分别高于低温避光贮藏的15.7%和21.1%，其可能原因是粗脂肪中不饱和脂肪酸发生氧化，使粗脂肪含量在贮藏6个月前缓慢下降，而低温条件下，粗脂肪含量下降较室温少，可能与低温抑制脂肪酶活性有关;随着贮藏期的延长，不饱和脂肪酸逐渐转化为更稳定的饱和脂肪酸[24]，并在贮藏9个月达到高值。此外，贮藏期间花朵表面颜色均加深变暗，可能与金花茶花脂肪酸等化合物的氧化酸败有关。

2.3 贮藏期金花茶花生理活性成分和营养成分含量的主成分分析

3 讨论与结论

金花茶以其花色金黄、具蜡质光泽著称，可见花朵表面颜色是评价金花茶商品品相好坏的重要指标之一[26]。现代研究表明，金花茶花含有黄酮、皂苷、多糖、茶多酚等多种生理活性成分和氨基酸、蛋白质等营养成分[6-7]，故本试验选择黄酮、皂苷、多糖、茶多酚、氨基酸、蛋白质和脂肪含量以及花朵表面颜色为指标，用于评价贮藏方法对金花茶品质的影响。

研究结果表明，贮藏方法及贮藏时间不同，生理活性成分和营养成分含量的变化幅度及金花茶花朵表面的色泽不同。低温避光贮藏的黄酮和皂苷含量在贮藏过程中均高于其他两种贮藏法，且花色保持不变;室温曝光下黄酮和皂苷较藏前分别下降11.43%和6.04%，脂肪含量则升高明显，涨幅15.7%，花朵表面颜色加深变暗，室温避光贮藏的黄酮和皂苷分别下降10.29%和6.67%，脂肪含量升高21.1%，花朵表面颜色变为棕色。可见，金花茶花的变色程度与光线、温度及黄酮、脂肪等成分变化有关，避光组温度越低，成分变化幅度小颜色变化小，这与马鹏等[27]、唐梅等[28]的研究结果相似;相同温度下光线越强成分变化幅度越大变色现象越严重，与周燕等[29]报道“金银花贮久色渐深”的现象类似。金银花、白菊[27，29-30]等花类中药材贮藏过程出现的变色现象均探讨其与化学成分变化的关系，未见分析脂肪含量的变化报道，本试验中脂肪含量升高与金花茶花色变深是否存在相关性有待进一步研究。

主成分分析表明不同贮藏期金花茶花生理与营养成分指标综合质量存在差异，同一贮藏期内不同贮藏法贮藏的金花茶样品间综合质量存在差异;总黄酮、皂苷、多糖、氨基酸总量等成分含量能全面反应金花茶花的品质，可作为金花茶花品质的综合评价指标。贮藏法与贮藏时间对金花茶花的内在质量（生理活性和营养成分含量） 和外观色泽（变黄、变暗、生霉、生虫等） 均有显著影响。从金花茶活性成分稳定性、外观色泽变化、节约贮藏成本及提高质量等级和售价等方面综合考虑，金花茶花以室温避光密封贮藏不超过6个月、低温避光密封贮藏不超过12个月为宜。

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（责任编辑：林海清）