血清GPC3检测对原发性肝癌诊断价值

郭浚 曹玉刚

[摘要]目的 探讨血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）在原发性肝癌中的诊断价值。方法 选取我院收治的原发性肝癌病人72例，以肝硬化病人70例和健康志愿者70例作为对照，检测各组血清GPC3水平。结果 原发性肝癌组血清GPC3水平明显高于肝硬化组和健康对照组，肝硬化组血清GPC3水平明显高于对照组（F=105.647，P<0.05）;肿瘤长径>5 cm病人血清GPC3水平明显高于肿瘤≤5 cm者（t=-2.771，P<0.05）;中低分化病人血清GPC3水平明显高于高分化者（t=-2.276，P<0.05）。血清GPC3水平诊断原发性肝癌的ROC曲线下面积为0.882，截断值为200 ng/L时，其原发性肝癌诊断灵敏度和特异度分别为81.40%和86.43%。结论 血清GPC3可用于原发性肝癌的诊断。

[关键词]磷脂酰肌醇蛋白聚糖类;肝肿瘤;血清;诊断

[中图分类号]R735.7

[文献标志码]A

[文章编号] 2096-5532（2019）05-0611-03

doi：10.11712/jms201905026

[开放科学（资源服务）标识码（OSID）]

流行病学研究显示，原发性肝癌的发病率和病死率均显著上升[1-2]。疾病的早期诊断对于改善肝癌病人的临床结局尤为重要。血清标志物检测在恶性肿瘤早期筛查中的价值已获共识。近年研究显示，磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）能够影响癌细胞间连接蛋白的合成，降低癌细胞间的黏附能力，为癌细胞的转移提供前提[3-4]，在促进癌细胞的增殖等方面发挥作用[5-6]。有研究认为，高表达的GPC3是促进肝癌病情进展的重要因素，但尚未见其对肝癌诊断学价值的分析。本研究通过对原发性肝癌病人血清GPC3水进行检测，探讨其与肝癌临床病理特征的关系及其在原发性肝癌诊断中的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

采用回顾性研究方法，选取2016年2月—2017年5月在我院治疗的原发性肝癌（C组）病人72例，纳入标准：①均经病理组织学诊断;②研究前未进行放疗、化疗等治疗;③临床资料保存完整。排除标准：①临床资料不完整;②合并有其他原发性恶性肿瘤者。同时选取肝硬化（B组）病人70例、健康志愿者（A组）70例作为对照。3组受试者性别、年龄等

一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

1.2 血清GPC3检测方法

采集各组受试者肘部静脉血3 mL，加入抗凝剂2 mL，1 000 r/min离心5 min，采用生物酶联免疫吸附试验方法检测血清GPC3水平。GPC3检测试剂盒购自罗氏生物检测应用公司，配套试剂及仪器购自南京伯斯金生物科技有限公司。

1.3 统计学处理

采用SPSS 19.0软件进行统计学分析。计量资料结果采用[AKx-D]±s表示，多组间比较采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验;两组间比较采用t检验。计数资料比较使用χ2检验;诊断价值采用ROC曲线进行分析。以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清GPC3水平比较

原发性肝癌组、肝硬化组、对照组血清GPC3水平分别为（189.06±48.22）、（70.41±20.03）、（5.01±1.03）ng/L，原发性肝癌组明显高于肝硬化组和对照组，肝硬化组明显高于对照组，差异有显著性（F=105.647，P<0.05）。

2.2 血清GPC3水平与原发性肝癌临床病理特征关系

血清GPC3水平与原发性肝癌肿瘤大小、分化程度有关（t=-2.771、-2.276，P<0.05），与病人年龄、性别、TNM分期、HBsAg阳性、包膜、微血管侵犯和淋巴结转移无关（P>0.05）。见表2。

2.3 血清GPC3水平诊断原发性肝癌的价值

血清GPC3水平诊断原发性肝癌的ROC曲线下面积为0.882，截断值为200 ng/L时，其诊断灵敏度和特异度分别为81.40%和86.43%。见图1。

3 讨论

原发性肝癌容易早期发生淋巴结或者血行转移，病情进展较为隐匿。长期临床随访研究发现，中晚期肝癌占到了肝癌发病人群的25%以上，多数原发性肝癌临床确诊时已处于疾病的中晚期，失去了手术机会[7]。现阶段临床上肝癌的总体诊断水平仍然较低，一项汇集了115例病人的临床回顾性分析的结果显示，原发性肝癌的早期诊断灵敏度不足35%，诊断的一致性较差，漏诊率较高[8]，导致高危人群的筛查效果明显下降。人甲胎蛋白（AFP）为肝癌诊断的主要特异性参考指标，其在肝癌的筛查过程中具有重要的参考价值，但AFP在肝硬化或者重度肝炎等疾病也存在一定程度的异常表达，其诊断原发性肝癌的特异度较低，检查的稳定程度较低。

GPC3主要影响细胞间的蛋白连接，其表达水平的改变能够干预锚合蛋白、成纤维蛋白等细胞間质成分的表达，加剧癌细胞间黏附能力的下降，促进癌细胞的转移[9-10]。GPC3结构上包含了多个磷酸基团结构，其能够在结合肝癌上皮细胞膜糖蛋白配体的基础上，促进细胞内信号通路或者第二信使等因子的改变，增加细胞信号转导的异常，增加癌细胞DNA异常扩增的风险，促进癌细胞对静脉血窦内皮细胞的黏附，增加癌细胞通过血行转移的风险[11]。同时，GPC3能够影响癌细胞的生物学特征，增加癌细胞的凋亡抑制，增加癌细胞对于邻近正常组织的浸润，导致临床分期的进展[12]。

本文研究结果显示，肝癌病人血清中GPC3浓度较健康对照组明显上升，提示GPC3可能参与到了原发性肝癌的发生发展过程中，GPC3的高表达能够通过影响肝癌细胞内的NOTCH信号通路或者AKT信号通路的激活，促进癌细胞DNA基因的高转录，最终促进肿瘤浸润病灶范围的增大。同时，过度表达的GPC3能够增强局部癌细胞氧化应激反应，维持肿瘤干细胞的活性。已有研究结果显示，肝癌病人血清及病灶组织中的GPC3浓度平均上升25%～55%，并且病人的临床分期进展越快，癌细胞的分化程度越低，其GPC3蛋白的异常表达越为明显[13-14]。但本文研究并未发现GPC3的异常表达与肝癌病人临床分期有关，考虑可能与检测方法、肝癌病人并发症及GPC3表达的个体化差异等有关。本文研究结果显示，病灶组织的范围越大、癌细胞的分化程度越差，血清中GPC3的水平越高，提示GPC3能够影响肝癌病人临床病理特征的进展。本次研究并未发现GPC3表达与微血管侵犯和淋巴结转移有关，提示GPC3并不会增加肝癌病人癌细胞对于血管内皮或者淋巴结内皮细胞的黏附能力。本文研究结果还显示，血清GPC3水平>200 ng/L时，其诊断肝癌的灵敏度和特异度均超过80%，提示通过随访病人血清GPC3水平可能为临床上肝癌病情的判断提供参考。

综上所述，血清GPC3可能用于原发性肝癌的诊断。

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（本文编辑 黄建乡）