IL-33在结直肠癌中的表达及其临床意义

赵学勤 王东明 朴纪颖 段旭峰

[摘要]目的：探讨在结直肠癌中白细胞介素-33（IL-33）的表达与临床意义，旨在为结直肠癌诊断与治疗提供参考依据。方法：选取本院于2017年12月-2019年2月期间收治的120例患者的结直肠组织标本作为研究对象，包括35例癌旁组织，44例结直肠腺瘤，41例结直肠腺癌，均予以结直肠癌根治术予以治疗。采用免疫组织化学染色法对上述患者IL-33表达情况进行检测，并探讨其表达状况与患者临床特征之间的关系。结果：在癌旁组织中IL-33表达量最低，在结直肠腺瘤中则主要在表面上皮予以分布，与癌旁黏膜组织无显著差异（P>0.05）。而IL-33在结直肠腺癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁黏膜与结直肠腺瘤组织，差异具有统计学意义（P<0.05）：结直肠癌患者中性别与IL-33表达无显著差异（P>O 05）;与浸润程度、淋巴结转移以及临床分期具有显著关系，差异具有统计学意义（P<0.05）。讨论：IL-33表达与结直肠癌临床分期、浸润程度以及淋巴结转移等恶性程度因素具有显著相关性，在结直肠癌早期诊断中IL-33可作为标志物与治疗靶点。

[关键词]结直肠癌;白细胞介素;IL-33;表达水平

[中图分类号]R735.24[文献标识码]A [文章编号]2096-5249（2019）07-012-02

结直肠癌作为第三位高发癌症，属于最为常见的消化系统肿瘤，具有较高的发病率及死亡率。患者在临床上早期症状不明显，大部分患者在确诊时就已经发生肝脏远处转移，而该类患者平均生存时间不到2年。同时由于大部分结直肠患者发病于中老年人群，通常这部分人群会伴有其他基础疾病，因而在临床治疗中容易产生精神异常、肠道调节功能不良等一系列不良反应的发生，即便近年来临床治疗手段得到提高，但仍未显著提高患者的总生存率。白细胞介素在免疫反应调节与细胞活化增殖等环节中发挥着重要作用，其中白细胞介素-33（IL-33）主要于如炎性细胞、间叶细胞以及上皮细胞等多种类型细胞中表达，因而在自然免疫中具有重要位置。鉴于此，本次以本院收治的120例患者的结直肠组织标本作为研究对象，采用免疫组织化学染色法对患者IL-33表达情况进行检测，并探讨其表达状况与患者临床特征之间的关系。现将研究结果分析如下：

1 资料与方法

1.1一般资料：选取本院于2017年12月-20195F2月期间收治的120例患者的结直肠组织标本作为研究对象，其中包括35例癌旁组织，44例结直肠腺瘤，41例结直肠腺癌，患者及其家属均签署知情同意书，且经医院伦理委员会批准。男性患者74例，女性患者46例;年龄36-82岁，平均年龄（65.12±9.22）岁。

1.2仪器与试剂：试剂包括兔抗人IL-33单克隆抗体，EDTA抗原修复液，PBS缓冲液，鼠/兔通用型二抗，酶底物显色剂（DAB），3%HO溶液，苏木素染色液，牛血清白蛋白。仪器包括-80℃低温冰箱，4℃冰箱，振荡器，通风橱，载玻片，盖玻片，孵育盒，电子天平，冷冻离心机，显微镜DM-2500，不锈钢压力锅，耐高温塑料病理切片架，不锈钢病理切片架。

1.3试验方法：于85℃烘烤结直肠癌组织芯片lh后，采用100%二甲苯脱蜡3次，15min/次，梯度酒精水化（100%无水乙醇5min x 2次、95%乙醇溶液5min x 2次、75%乙醇溶液5min x1次），置于清水中进行10min浸泡，再于蒸馏水中浸洗10min。将20ml的EDTA抗原修复液于不锈钢压力锅中采用去离子水稀释，至1000ml后加热至沸腾，将组织芯片采用耐高温塑料病理切片架固定后放置于其中进行5min抗原修复。自然冷却至室温，置于清水中进行10min浸泡与10min蒸馏水中浸洗。于室温下降组织芯片室温下于3%过氧化氢溶液中浸泡30min，然后在组织芯片表面上滴加0.3%牛血清白蛋白，并在37℃温度下的孵育盒中进行30min孵育，去除表面液体后采用PBS液体进行3次浸洗，5min/次。组织芯片表面滴加一抗后置于孵育盒内，并将其放置于4℃冰箱中进行14h左右的孵育。取出芯片后采用PBS液体进行3次浸洗，5min/次。加入辣根过氧化物酶（HRP）标记后的鼠/兔通用型二抗，置于温度为37℃的孵育盒中进行30min孵育。去除表面液体后采用PBS液体进行3次浸洗，5min/次，滴加DAB显色剂约10min后于清水中浸洗10min。将组织芯片浸润于苏木素染色液中0.5min后采用清水中浸洗5min，然后组织芯片经梯度酒精脱水，风干后采用中性树脂与盖玻片封片。

1.3观察指标：均经两位病理医师采用双盲法进行判定，阳性判定标准为组织中染色为棕黄色或棕褐色部位，且每个芯点中阳性面积>50%，反之为阴性。

1.4统计学分析：本次研究所得数据均经SPSS20.O软件予以统计学计算。计量指标以（%）形式展开，x检验;计数指标以（x±s）形式展开，t值检验。P<0.05表明数据比较具有统计学意义。

2 结果

2.1IL-33在组织中表达情况分析：在癌旁组织、结直肠腺癌与结直肠腺瘤中经免疫组织化学检验表明其均有表达，且阳性信号主要定位于细胞浆与表面上皮。其中在癌旁组织中IL-33表达量最低，在结直肠腺瘤中则主要在表面上皮予以分布，与癌旁黏膜组织无显著差异（P>0.05）。而IL-33在结直肠腺癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁黏膜与结直肠腺瘤组织，差异具有统计学意义（P<0.05）;且陽性信号主要集中于细胞浆以及表面上皮。见表1：

2.2比较41例结直肠癌病理指标与IL-33表达相关性：结直肠癌患者中性别与IL-33表达无显著差异（P>0.05）;与浸润程度、淋巴结转移以及临床分期具有显著关系，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表2。

3 讨论

结直肠癌作为临床上较为常见的胃肠道恶性肿瘤，通常情况下，腺瘤转变为散发性结直肠癌中不断地激活强烈的炎症反应，进而便会引发一系列基因突变及相关细胞因子改变，最终促使结直肠腺瘤转变为结直肠腺癌。IL-33属于炎症因子白细胞介素细胞因子家族中的促炎症细胞因子之一，在本次研究中，癌旁组织中IL-33表达量最低，IL-33在结直肠腺癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁黏膜与结直肠腺瘤组织，差异具有统计学意义（P<0.05）。这说明在构建结直肠癌细胞微环境中IL-33具有非常重要作用。除此之外，结直肠癌患者中性别与IL-33表达无显著差异（P>0.05）;与浸润程度、淋巴结转移以及临床分期具有显著关系，差异具有统计学意义（P<0.05）。这说明IL-33可能会促进疾病等级发展，对结直肠癌预后具有密切联系。

综上所述，IL-33表达与结直肠癌临床分期、浸润程度以及淋巴结转移等恶性程度因素具有显著相关性，是促进疾病等级发展的重要因素。因此，在结直肠癌早期诊断中IL-33可作为标志物与治疗靶点。