青岛地区儿童血液源性疾病病人EB病毒感染调查

王中军 任立晟 张海平 李永欣 戚慧阳 徐龙强

[摘要] 目的 調查青岛地区儿童血液源性疾病病人EB病毒（EBV）的感染状况。

方法收集2013年1月—2017年11月在我院就诊的456例≤16岁血液系统源性疾病病人（血液病组）外周全血EBV DNA检测资料，同时随机选取485例健康儿童作为对照，对两组检测结果及相关疾病进行分析。

结果血液病组EBV DNA检出率为19.7%（90/456），明显高于健康对照组（13.4%，65/485），差异有统计学意义（χ2=6.85，P<0.05）;血液病组5～7岁年龄段EBV的检出率最高，为28.8%。血液病组各疾病EBV DNA检出率依次为骨髓增生异常综合征50.0%（3/6）和霍奇金淋巴瘤50.0%（4/8）、急性淋巴细胞白血病34.3%（24/70）以及组织细胞增生症26.7%（4/15），与健康对照组比较，差异均有统计学意义（χ2=3.36～19.81，P<0.05）。

结论青岛地区儿童血液源性疾病病人EBV感染普遍，而且EBV感染与病儿年龄有关。与EBV感染相关的疾病以骨髓增生异常综合征、急性淋巴细胞白血病及霍奇金淋巴瘤为主。

[关键词] 疱疹病毒4型，人;儿童;血液病

[中图分类号] R725.52;R373.4

[文献标志码] A

[文章编号]  2096-5532（2019）01-0085-04

AN INVESTIGATION OF EPSTEIN-BARR VIRUS INFECTION IN CHILDREN WITH HEMATOLOGIC DISEASES IN QINGDAO， CHINA

WANG Zhongjun， REN Lisheng， ZHANG Haiping， LI Yongxin， QI Huiyang， XU Longqiang

（Department of Clinical Laboratory， Affiliated Hospital of Qingdao University， Qingdao 266071， China）

[ABSTRACT]ObjectiveTo investigate the status of Epstein-Barr virus （EBV） infection in children with hematologic diseases in Qingdao， China.

MethodsA total of 456 patients with hematologic diseases， aged ≤16 years， who visited our hospital from January 2013 to November 2017 were enrolled as hematologic disease group， and peripheral blood samples were collected to detect EBV DNA. A total of 485 healthy children were enrolled as control group. Related detection results and diseases were analyzed for both groups.

ResultsThe hematologic disease group had a significantly higher detection rate of EBV DNA than the control group （19.7% （90/456） vs 13.4% （65/485）; χ2=6.85，P<0.05）. The children aged 5-7 years in the hematologic disease group had the highest EBV DNA detection rate of 28.8%. In the hematologic disease group， the children with myelodysplastic syndrome had an EBV DNA detection rate of 50.0% （3/6）， those with Hodgkin’s lymphoma had an EBV DNA detection rate of 50.0% （4/8）， those with acute lymphoblastic leukemia had an EBV DNA detection rate of 34.3% （24/70）， and those with histiocytosis had an EBV DNA detection rate of 26.7% （4/15）; there were significant differences in these detection rates between the hematologic disease group and the control group （χ2=3.36-19.81，P<0.05）.

ConclusionEBV infection is commonly seen in children with hematologic diseases in Qingdao and is associated with age. Myelodysplastic syndrome， acute lymphoblastic leukemia， and Hodgkin’s lymphoma are associated with EBV infection.

[KEY WORDS]herpesvirus 4， human; child; hematologic diseases

EB病毒（EBV）是一种嗜B淋巴细胞的疱疹病毒，是传染性单核细胞增多症的病原体[1]。90%以上人群存在EBV隐性感染，该病毒还可潜伏感染B淋巴细胞和上皮细胞，并刺激细胞增生及致癌[2-3]。业已证实，鼻咽癌和淋巴组织增生性疾病等多种疾病均与EBV感染密切相关[4-6]。EBV感染与血液系统恶性肿瘤的关系一直是研究的热点，而EBV感染与儿童血液系统恶性肿瘤相关性的报道却少见。本文对2013年1月—2017年11月于我院就诊儿童血液病病人EBV感染情况进行检测，分析青岛地区儿童血液病病人EBV感染情况以及各种血液源性疾病与EBV感染的相关性。

1 资料与方法

1.1 研究对象

2013年1月—2017年11月，采集在我院就诊的青岛地区≤16岁的血液系统源性疾病病人456例（血液病组）外周全血，其中男233例，女223例。同时选取青岛地区健康查体儿童485例外周全血作为对照（健康对照组）。

1.2 EBV DNA检测方法

1.2.1标本采集 用一次性无菌注射器采集受检者静脉血2 mL，注入含EDTA抗凝剂的玻璃管，立即缓慢颠倒玻璃管混合5～10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀。标本采集后立即检测EBV DNA。

1.2.2PCR扩增 采用EBV核酸扩增荧光定量检测试剂盒（中山大学达安基因股份公司）和SLAN型实时荧光定量PCR检测系统（上海宏石医疗科技有限公司）检测各样本中的EBV DNA。检测方法参照相关文献方法[7]。PCR反应条件为：93 ℃预变性2 min;93 ℃、45 s，55 ℃、60 s，10个循环;93 ℃、30 s，55 ℃、45 s，共30个循环。检测系统自动显示EBV DNA核酸扩增的动力学曲线和标准曲线，阳性判定标准为EBV DNA含量≥106 copies/L。

1.3 统计学处理

采用SPSS 19软件进行统计学分析，各组间率的比较采用卡方检验或Fisher精确检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结  果

2.1 血液病组和健康对照组EBV检出情况比较

血液病组EBV检出率为19.7%（90/456），明显高于健康对照组的13.4%（65/485），差异有统计学意义（χ2=6.85，P<0.05）。血液病组病人EBV检出率在5～7岁年龄段最高，为28.8%，随着年龄的增加EBV检出率逐渐降低，但是14～16岁年龄段检出率高达24.0%。血液病组EBV检出率男性略低于女性，但差异无统计学意义（P=0.91）。见表1。

2.2 血液病EBV检出率和各疾病的相关性

本文研究结果表明，血液病组EBV检出率最高的疾病为骨髓增生异常综合征50.0%（3/6）和霍奇金淋巴瘤50.0%（4/8），其次为急性淋巴细胞白血病34.3%（24/70）和组织细胞增生症26.7%（4/15），以上疾病EBV检出率与健康对照组比较差异均有统计学意义（χ2=3.36～19.81，P<0.05）。血液病组特发性血小板减少性紫癜和非霍奇金淋巴瘤等疾病EBV检出率与健康对照组比较差异均无显著意义（P>0.05）。见表2。

3 讨  论

EBV不僅可以感染B细胞，而且还可以感染人体T细胞、NK细胞、单核巨噬细胞等，EBV编码抗原VCA、EA及EBNAs等也可进一步激活T淋巴细胞[8-9]。体内EBV感染的B细胞和细胞毒性T细胞大量存在，引起一系列复杂的体液免疫和细胞免疫反应，从而引起不同的EBV相关疾病[6，10]。不同地区、性别、年龄及不同疾病人群EBV的检出率存在差异[11-14]。本研究对青岛地区儿童血液病病人EBV感染情况以及各种血液源性疾病与EBV的相关性进行检测分析。

本文结果显示，血液病病人EBV检出率明显高于健康对照组，且5～7岁病儿感染EBV的风险更高。有研究表明，儿童EBV感染率随着年龄的增加而升高[2，15-16]，本文健康对照组EBV感染的年龄分布也基本符合这一特点;但血液病病人中，2～7岁年龄段病儿EBV检出率最高，可能与该阶段病儿免疫系统相对不成熟，而又生活在幼托机构等人员密集场所，更易感染有关[17-18]。袁轶群等[19]在超过50%的霍奇金淋巴瘤Reed-Sternlerg细胞（RS细胞）中检出EBV DNA。EBV感染的RS细胞和病毒潜伏蛋白（LMP-1、LMP-2）相互作用导致霍奇金淋巴瘤的发生[19-21]。孙文文等[22]的一项研究显示，非霍奇金淋巴瘤病人EBV感染率很低。本文研究结果显示，EBV感染与霍奇金淋巴瘤发生有关，而与非霍奇金淋巴瘤无相关性，与孙文文等的报道一致，而与其他报道结果不同[2，23]。可能与本文淋巴瘤病人数量较少有关。因此，EBV感染与儿童非霍奇金淋巴瘤的相关性需要进一步研究。

EBV感染与白血病的相关性还存在争议。张慧等[24]对158例血液病病人外周血EBV DNA检测结果分析显示，EBV感染与淋巴瘤有关，而与白血病无关。苗红霞等[7]研究认为，EBV与急性淋巴细胞白血病的发生有一定相关性。桂瑞瑞等[25]的研究显示，EBV感染与恶性淋巴系统疾病关系密切，与髓系白血病无显著相关性。本文研究结果显示，急性淋巴细胞白血病组EBV DNA检出率明显高于健康对照组，而粒细胞白血病组EBV DNA检出率与健康对照组比较差异无显著性，提示EBV感染与淋巴细胞白血病发生有关，而与粒系白血病无相关性。EBV首先通过入侵人体淋巴细胞引起淋巴细胞增殖性疾病，这在一定程度上可以解释为什么淋巴细胞白血病的发病与EBV感染存在一定关系。国外有研究显示，母亲妊娠期间感染EBV与儿童急性淋巴细胞白血病的发生有关[26]。我们在调查过程中发现，很多急性淋巴细胞白血病病儿母亲孕期EBV IgG抗体呈阳性，但没有进行病儿母亲EBV活动性感染的筛查，不能判断急性淋巴细胞白血病病儿母亲怀孕期间EBV活动性感染情况，因此青岛地区孕妇妊娠期间EBV活动性感染与子女急性淋巴细胞白血病的相关性需要进一步的研究。

已有研究结果显示，EBV感染与儿童特发性血小板减少性紫癜[27]、噬血细胞综合征[28]及贫血性疾病[29]有一定的相关性。本文结果显示，EBV感染与儿童紫癜及贫血性疾病无关。这可能与检测方法不同、研究对象生活及饮食习惯不同有关。

综上所述，青岛地区儿童血液病病人EBV感染非常普遍，且EBV感染与年龄有关。与EBV感染相关的疾病以骨髓增生异常综合征、霍奇金淋巴瘤及急性淋巴细胞白血病为主，因此，临床医生需要重视EBV感染及其相关疾病的诊断和治疗。

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