重组禽流感病毒( H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1Re-8株+H7N9 H7-Rel株)的不同免疫剂量对融水香 鸭免疫效果分析

韦钰 曾庆伦 蒙文娟 刘佳佳 谢艳林 蒋才淼 覃超林 陈息振 王敏

摘要：为研究重组禽流感病毒（ H5+H7）二价灭活疫苗（H5NI Re-8株+H7N9 H7-Rel株）的不同免疫剂量对融水香鸭免疫的效果。选取120只14日龄的商品融水香鸭，按照隨机原则将其划分为试验一组、试验二组以及对照组，试验一组和试验二组融水香鸭分别在14日龄进行首次免疫，试验一组首次免疫接种0.5 mL，颈部皮下注射，试验二组首次免疫接种1mL颈部皮下注射，分别在免疫接种后的第21、28、60和90天采集试验组和对照组融水香鸭新鲜血液进行H5NI Re-8株和H7N9 H7-Rel株抗体水平检测。检测结果显示，不同疫苗注射剂量抗体水平存在一定差异，其中试验二组的抗体水平比试验一组要好，但两者之间对比差异性不大。试验二组的融水香鸭在进行第1次免疫接种后所产生的副反应相对较高，因此，建议在进行首次免疫接种时，免疫注射剂量控制在0.5 mL。同时，试验二组的融水香鸭在免疫接种90 d后，抗体水平下降较为严重，要保证总体免疫效果需要对融水香鸭进行第2次强化免疫接种。

关键词：重组禽流感病毒二价灭活疫苗;不同免疫剂量;免疫效果

中图分类号：S858.31

文献标识码：B

doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.201 9.10.005

0 引言

为进一步研究重组禽流感病毒二价灭活疫苗对鸭子产生的免疫效果，选取了14日龄的商品融水香鸭，对其进行了不同剂量的疫苗免疫接种，现将具体研究内容介绍如下。

1 材料与方法

1.1 材料选取

采集鸭子的新鲜血液，进行禽流感病毒检测，不存在患病情况，母源抗体水平符合免疫接种标准[1]。疫苗为重组禽流感病毒（ H5+H7）二价灭活疫苗（H5NI Re-8株+H7N9 H7-Rel株），批准文号为兽药临字080012297，批号为2017028，生产企业为哈尔滨维科生物技术开发公司。试验于2017年4月13日进行。本次所选用的疫苗主要为预防H5亚型和H7亚型禽流感病毒引发的禽流感。疫苗需要在2-8℃环境下保存，有效期为12个月。

1.2 方法

按照随机原则将120只14日龄的商品融水香鸭划分为3个组别，分别为试验一组、试验二组以及对照组，试验一组和试验二组融水香鸭分别在14日龄进行首次免疫，试验一组首次免疫接种0.5 mL，颈部皮下注射，试验二组首次免疫接种1 mL，颈部皮下注射，27日龄后试验一组和试验二组融水香鸭分别颈部皮下注射重组禽流感病毒二价灭活疫苗1.5 mL，对照组不免疫接种重组禽流感病毒二价灭活疫苗。分别在免疫接种后的21、28、60和90 d采集试验组和对照组融水香鸭新鲜血液各20份进行H5NI Re-8株和H7N9 H7-Rel株抗体水平检测[2]。本次研究过程中H5亚型和H7亚型禽流感病毒抗体水平监测主要按照国家相关标准，采用血凝抑制试验开展检测。在检测中需要H5NI Re-8株抗原和阳性血清、H7N9 H7-Rel株抗原和阳性血清。检测中主要使用到的设备为900微型血凝板、微量移液器、微量振荡器、离心机。使用到的试剂主要包括O.OI moL/L的PBS缓冲稀释液、阿氏液1%的鸡红血细胞悬液。H5亚型和H7亚型禽流感病毒抗体水平HI>4 log2表示免疫合格[3]。

1.3 数据统计

选择使用SPSS17.0统计学软件进行数据分析，对免疫一组、免疫二组进行t检验差异分析。

2 结果

2.1 H5N1 Re-8株抗体水平检测

结合表1可知，对照组融水香鸭在21、28、60和90 dH5NI Re-8株抗体水平呈现下降趋势。试验一组融水香鸭在免疫接种21、28、60、90 d，平均抗体滴度呈现下降趋势，但均能维持在合格水平以上。由此可得，加大疫苗免疫剂量21 - 28 d能提高免疫效果，但随着免疫时间的增长，免疫效果逐步下降到90 d后低于合格水平。不同剂量重组禽流感二价灭活疫苗接种融水香鸭后，随着免疫时间的增加，抗体效价呈现下降趋势，第1次免疫接种90 d后试验一组和试验二组免疫效果普遍较差，需要引导养殖户重点做好第2次强化免疫接种。见表1。

2.2 H7N9 H7-Rel株抗体水平检测

结合表2数据可知，对照组融水香鸭在第21、28、60、90天H7N9 H7-Rel株抗体水平呈现下降趋势。试验一组融水香鸭在免疫接种21 - 28 d，抗体水平逐步提升，60 - 90d，抗体水平呈现下降趋势。试验二组融水香鸭同样存在上述发展趋势，免疫接种21 - 28 d，抗体水平呈现上升趋势，到第90天逐步下降到合格范围以内。试验一组和试验二组抗体水平合格率之间差异性不显著。由此可知，不同免疫剂量免疫接种融水香鸭后，不会对提高鸭子抗体水平产生多大影响，都会随着免疫时间的增长，抗体水平呈现下降趋势。而试验二组的融水香鸭在免疫接种大剂量的二价灭活疫苗后，会出现较多的不良反应。因此，为降低经济损失，减少不良反应发生率，建议第1次免疫接种量控制在0.5 mL。见表2。

3 讨论与结论

试验一组和试验二组分别免疫接种0.5、1mL，经过抗体水平检测，两者之间存在一定的差异，但差异性不大。试验二组融水香鸭免疫接种1 mL，所表现卅来的应激反应较为严重，不利于实现持续化生产，会对鸭子的健康生长造成一定影响，建议在进行第1次疫苗免疫接种时，将免疫剂量控制为0.5 mL。另外，通过抗体水平监测可以发现随着免疫时间的增长，试验一组和试验二组的融水香鸭抗体水平均呈现明显下降趋势，到90 d抗体水平已经达到合格范围警戒线。由此可知，只进行一次免疫接种免疫效果较差，建议在免疫接种21 d后进行第2次强化免疫接种，每只鸭子颈部皮下接种1.5 mL。

参考文献

[l]张秀环，林杰，刘彬.重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活 疫苗H7免疫效果实验[J].兽医导刊，2018（ ll）：70-71.

[2]李志贤，虞与理，禹婷婷.三黄鸡免疫重组禽流感病毒（ H5+H7）二价灭活疫苗血清抗体检测试验报告[J]兽医导刊，2018（ 19）：69-71.

[3]周柱辉，陈松春，潘杰，等鸡免疫重组禽流感（H5+H7）二价灭活疫苗效果评价[J].养禽与禽病防治，2018 （6）：13-15

作者简介：韦钰（1977-），女，壮族，广西融水人，大专，毕业于广西职业技术学院，研究方向：动物疫病预防和控制。909CD6B6-A185-48A6-A449-2EF3316EB799