毫火针联合自拟芪白汤对白癜风皮肤和外周血病理影响研究

柏志芳 丁小杰 蒋培 于瑞莲 马倩

摘要 目的：探討毫火针与自拟芪白汤联合应用于白癜风的治疗，对患者皮肤与外周血病理相关指标的影响。方法：选取2015年10月至2017年10月江苏省第二中医院收治的白癜风患者72例作为研究对象，按照治疗方案不同随机分对照组（n=35）和观察组（n=37），对照组单纯采取自拟芪白汤治疗，观察组采取毫火针结合自拟芪白汤治疗，比较2组治疗前后皮肤、外周血病理学相关指标变化情况。结果：观察组皮肤组织液病理指标IL-2（5.03±0.84）U/mL、T-AOC（5.13±1.08）U/mL、MDA（0.56±0.18）nmol/mL、ROS（0.61±0.25）U/L、IL-1β（5.22±1.39）pg/mL显著低于对照组，SOD（91.18±10.62）U/mL、GSH-Px（19.12±3.92）mg/mL显著高于对照组（P<0.05）;观察组在治疗3疗程后外周血病理指标IL-1β（16.22±3.46）pg/mL、MDA（3.26±0.46）nmol/mL、IL-2（188.50±9.16）U/mL、T-AOC（5.13±1.12）U/mL、ROS（0.74±0.25）U/L显著低于对照组，GSH-Px（35.12±4.25）mg/mL、SOD（171.18±12.67）U/mL显著高于对照组（P<0.05）。治疗后，观察组中医症状评分（3.55±1.56）分明显优于对照组（9.15±1.22）分P<0.05。结论：在自拟芪白汤治疗白癜风的基础上，增加毫火针能够有效调节患者氧化应激、免疫应答等病理学指标，对促进患者病情康复有积极意义。

关键词 毫火针;自拟芪白汤;白癜风;皮肤;外周血;病理;氧化应激;免疫应答

Study on the Changes of Skin and Peripheral Blood Pathology of Find Fire Needle Combined with Self-made Qibai Decoction in the Treatment of Vitiligo

Bai Zhifang1，Ding Xiaojie1，Jiang Pei1，Yu Ruilian2，Ma Qian3

（1 Department of Dermatology，The Second Traditional Chinese Medicine Hospital of Jiangsu，Nanjing 210017，China; 2 Pharmacy College，Nanjing University of Chinese Medicine，Nanjing 210023，China; 3 Department of Pathology，The Second Traditional Chinese Medicine Hospital of Jiangsu，Nanjing 210017，China）

Abstract Objective：To explore the effect of fine fire needle combined with self-made Qibai decoction on the changes of skin and peripheral blood pathology for the treatment of vitiligo.Methods：From October 2015 to October 2017，72 patients with vitiligo in The Second Traditional Chinese Medicine Hospital of Jiangsu were randomly divided into 2 groups according to the different schemes.The control group（n=35）were treated with self-made Qibai Decoction and the observation group（n=35）were treated with fine fire needle combined with self-made Qibai Decoction.The changes of skin and peripheral blood pathological indexes were compared before and after treatment between the 2 groups.Results：In the observation group，the pathological index of skin tissue fluid IL-2（5.03±0.84）U/mL，T-AOC（5.13±1.08）U/mL，MDA（0.56±0.18）nmol/mL，ROS（0.61±0.25）U/L，IL-1β（5.22±1.39）pg/mL were significant lower than those of control group.SOD（91.18±10.62）U/mL and GSH-Px（19.12±3.92）mg/mL were significant higher than those of control group（P<0.05）; In the observation group after the treatment for 3 courses，the pathological indexes of the peripheral blood IL-1β（16.22±3.46）pg/mL，MDA（3.26±0.46）nmol/mL，IL-2（188.50±9.16）U/mL，T-AOC（5.13±1.12）U/mL，ROS（0.74±0.25）U/L were significant lower than those of control group，GSH-Px（35.12±4.25）mg/mL，SOD（171.18±12.67）U/mL were significant higher than those of control group（P<0.05）.After treatment，in the observation group，the score of TCM symptom（3.55±1.56）was significantly better than that in the control group（9.15±1.22）（P<0.05）.Conclusion：On the basis of self-made Qibai Decoction for treatment of vitiligo，fine fire needle can effectively regulate the pathological indexes such as oxidative stress and immune response for the patients with vitiligo.It has a positive significance in promoting the recovery of patients.

Key Words Fine fire needle; Self-made Qibai Decoction; Vitiligo; Skin; Peripheral Blood; Pathology; Oxidative stress; Immune response

中图分类号：R275.9;R758.4+1文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2019.12.062

白癜风为一类色素脱失性损容性皮肤病，常具有原发性、局限性或泛发性，在全世界各种族中均可发生，具有易诊难治的特点。尽管不会造成致残致畸的后果，但对患者容貌与心理健康有一定危害。关于白癜风的发病机制目前尚不完善，以氧化应激学说、遗传学说、病毒学说、免疫学说等为主[1-2]。尽管临床上有多种治疗白癜风的方案，但疗效不一，仍缺乏统一定论[3]。本研究通过分析毫火针联合中药自拟芪白汤治疗白癜风的效果，旨在为本病治疗提供新依据，现将结果总结如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年10月至2017年10月在江苏省第二中医院接受治疗的72例白癜风患者作为研究对象，按照治疗方法不同对入选者进行进行随机分组，对照组（n=35）和观察组（n=37），2组一般资料无统计学差异（P>0.05）。见表1，表2。本次研究经过伦理委员会批准（伦理批件号：20150602）。

1.2 诊断标准 达到《中国临床皮肤病学》[4]以及《黄褐斑和白癜风的诊疗标准》[5]中关于白癜风的诊断准则：1）具有皮损处皮肤光滑、白斑边界清晰，周围颜色加深，患处颜色脱失，以白色或乳白色为主的特点;2）皮损面积低于体表面积的30%;3）年龄16～55岁;4）签署知情同意书。

1.3 排除標准 1）排除有晕针史者;2）排除4周内接受白癜风治疗者;3）排除孕期与哺乳期女性;4）排除资料不全或中途退出者;5）排除伴心、肝、肾等功能不全者。

1.4 治疗方法 对照组予以自拟芪白汤治疗，组方为：当归、黄芪各20 g，墨旱莲、女贞子各15 g，郁金、功劳叶、桑枝、川芎、蒺藜、赤芍、桃仁、制何首乌、白芷、补骨脂、红花、紫草各10 g，炙甘草6 g，（各种中药由江苏同仁药房提供）共制成7剂，每日1剂，用水煎煮成400 mL，口服。观察组基于对照组，在自拟芪白汤治疗期间，增加毫火针治疗：在患者卧位或坐位的体态下进行，充分显露皮损处，消毒，使用0.35 mm×25 mm（0.3×10 mm）的一次性无菌毫火针（由苏州市华伦医疗用品有限公司生产），左手持酒精灯，右手持2～3根毫火针，烧针尖至发红，按照由外缘环向中心的顺序，迅速在皮损部位内点刺，刺过表皮，至皮肤稍微潮红为止，烧1次点刺1次，针间距均匀，间距0.2～0.3 cm左右。每周进行1次治疗，持续治疗4周为1疗程，共治疗3疗程。

1.5 观察指标

于治疗前1 d和治疗3疗程后对2组皮肤和外周血氧化应激与炎性反应指标进行检测评价。

1.5.1 皮肤组织液采集 应用皮肤分离仪（厂家：绍兴市卫星医疗设备制造公司;型号：BFY型）对患者白癜风皮损部位和非皮损部位分别放置一个发疱盘，待水疱完全形成，进行负压吸疱，期间注意压力适中，以-30～-60 kPa为宜，防止产生血疱，以1 mL无菌注射器吸取1 mL组织液，去除纤维组织和血性疱液，进行标记后，置入-70 ℃冰箱保存。

1.5.2 外周血样本采集 取晨8：00-10：00空腹外周血5 mL，以低温高速离心机（德国艾本德股份公司，型号：5810R）分离血清，提取上清液，将其放置在-20 ℃冰箱中。

1.5.3 标本测定 电热恒温鼓风干燥箱由上海姚氏仪器设备厂提供，型号为YTG-9050A;立式压力蒸汽灭菌器由上海立德泰勀科学仪器公司提供，型号为LT-CPS38C;自动纯水蒸馏器由武汉格莱莫检测设备公司提供，型号为SZ-97A;三用恒温水箱由上海启前电子科技公司提供;本研究所用试剂盒均源自上海索桥生物科技公司，实验中所使用的双蒸水为实验室自制。本研究检测的指标为丙二醛（Malondialdehyde，MDA）（黄嘌呤氧化酶法）、白细胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）（酶联免疫吸附试验法）、定活性氧（Reactive Oxygen Species，ROS）（荧光探针检测法）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione Peroxidase，GSH-Px）（比色测定法）、超氧化物歧化酶（Superoxide Oxygen Dismutase，SOD）（硫代巴比妥酸法）、白细胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）（酶联免疫吸附试验法）、总抗氧化能力（Total Antioxidant Capacity，T-AOC）（比色测定法）。

1.5.4 中医症状评定标准 参照《中药新药临床研究指导原则》[6]及《中医诊断学术语规范研究中存在问题的探讨》[7]等拟定的白癜风症状量化表。根据症状的严重程度赋予不同分值，轻度计1分，中度计2分，重度计3分。计算各组治疗前、后的平均症状积分并比较。

1.6 统计学方法 采用2015年版统计学工具CHISS分析本实验数据，计数资料以率（%）表示，使用χ2检验，计量资料以（±s）表示，组间以成组t检验，组内以配对t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组患者皮肤组织液病理指标比较 用药前，2组皮肤组织液GSH-Px、IL-1β、ROS、SOD、T-AOC、MDA、IL-2差异不显著（P>0.05），用药后，2组各项皮肤组织液病理指标均变化显著变化，观察组IL-2、T-AOC、ROS、IL-1β、MDA显著低于对照组，GSH-Px、SOD显著高于对照组，（P<0.05）。见表3。

2.2 2组患者外周血病理指标比较 用药前，2组外周血GSH-Px、MDA、IL-2、IL-1β、ROS、SOD、T-AOC表达水平比较，差异无统计学意义（P>0.05），用药后，2组各项病理指标均产生显著变化，观察组GSH-Px、SOD显著高于对照组，IL-2、T-AOC、IL-1β、MDA、ROS显著低于对照组（P<0.05）。见表4。

2.3 中医症状评定比较 治疗后，观察组中医症状评分明显优于对照组P<0.05。见表5。

3 讨论

现代医学认为，白癜风的发病机制可能是患者具有本病的遗传素质，并在受到多种外在原因或内在原因刺激的影响下，产生免疫功能紊乱，或诱发氧化应激反应，或受到神经精神症状影响，改变了内分泌、代谢功能，使酶系统黑素细胞破坏或受到抑制，形成黑化过程障碍，最终造成色素脱失的病情[8]。目前有研究指出[9]，皮肤组织液及外周血IL-1β和IL-2等细胞因子与白癜风病情形成和发展过程中的免疫机制有密切关联。IL-1β为一种内皮细胞、单核细胞等细胞在应答感染过程中释放出来的细胞因子，能够和免疫球蛋白超家族受体结合，在刺激血小板生长因子，或者是刺激集落刺激因子后，促成辅助性T淋巴细胞中IL-2的产生，具有修复组织和参与免疫应答的作用。IL-2主要是辅助性T淋巴细胞生成的，在诱导T细胞增殖，形成B细胞抗体，促成Lak细胞产生等方面均有一定作用，是一种重要的免疫调节因子[10-11]。本研究中，观察组在治疗后，皮肤组织液和外周血IL-2、IL-1β表达量均显著降低，且显著低于对照组（P<0.05），提示观察组在促进白癜风患者免疫应答方面有明显效果。

一般情况下，人体处于正常抗氧化状态，具有抵抗外源性及内源性氧化侵害的能力，当白癜风患者处于病理状态下，其抗氧化与氧化水平会处于紊乱的狀态[12-13]。有多份研究报道显示[14-16]，白癜风患者机体氧化应激能力会产生变化，表现为血液和皮肤内的氧化物质明显增加，抗氧化物质明显降低，由此造成大量活性自由基积聚在皮肤，导致黑色素细胞功能减退，甚至丧失，形成白癜风。在本研究中，我们选取了氧化应激指标GSH-Px、SOD、MDA、ROS、T-AOC作为观察指标。其中GSH-Px为过氧化物分解酶，具有将有毒的过氧化物进行还原反应，生成无毒羟基化合物的作用，以此达到保护细胞膜结构，降低其受过氧化物损伤的目的;SOD为一类酶制剂，由生命体活性物质产生并释放，具有消解人体新陈代谢中有害物质的作用，可达到一定抗衰老的效果;MDA为一类重要的膜脂过氧化物，通过链式或链式支链反应，加剧活性氧作用，攻击膜中不饱和脂肪酸，能够造成膜损伤，形成细胞损伤;ROS为氧代谢中的副产物，能够传导细胞信号，维持人体恒常性;T-AOC为反映人体抗氧化能力的重要指标，具有保护皮肤的作用。本研究结果显示，观察组治疗后在降低皮肤及外周血IL-2、T-AOC、IL-1β、MDA、ROS，提高GSH-Px、SOD浓度方面有显著效果，且和对照组比较差异有统计学意义（P<0.05），提示观察组具有调节患者氧化应激水平，恢复机体微循环的明显效果。

中医学将白癜风称之为“白驳风”“白癜”“白驳”。《诸病源候论》中首次记载了白癜风的病名由来，“白癜风者，面及颈项身体皮肉色变白，与肉色不同，亦不痒痛，谓之白癜”。有关本病的病因、病机古代亦有很多论述，《诸病源候论》谓之本病是由“风邪搏于皮肤，血气不和所生也”。清代王清任在《医林改错》提到白癜风由“血瘀于皮里”所致，现代著名许多中医学家均提出本病根本在于“肝肾不足”，并以此为依据，采用滋补肝肾、养血祛风法治疗白癜风取得了较好疗效。白癜风主要因先天禀赋不足，肝肾亏虚，荣卫无畅达之机，皮肤腠理失养，加之后天劳恐伤肾、郁怒伤肝，以致气血耗伤，肝肾精血更加亏虚肝气郁结，气机不畅，复受风邪，毛窍闭塞阻滞经脉，使局部气血瘀滞，均可致局部气血失和，精血不能滋养肌肤而发病。总之本病以肝肾亏虚为本，皮肤损害为标，感受风邪所引起的气血不调，阴阳失合，血不荣肤的外在表现。此外，还有精神因素、化学污染及饮食所伤也会影响机体免疫功能，造成气滞血瘀，毛窍闭塞，皮肤失于营养而发病。因此，在治疗上则应以补益肝肾，养血祛风，活血化瘀为主要治疗方法[18-19]。

本研究采取了毫火针辅助自拟芪白汤的治疗方法。自拟芪白汤主要采用了紫草、川芎、墨旱莲、女贞子、赤芍、蒺藜、当归、黄芪、桃仁、制何首乌、白芷、郁金、功劳叶、补骨脂、红花等多味名贵药材精制而成。方中当归、红花、赤芍、川芎、桃仁具有补血和血、活血行气之功效;黄芪具有脱毒生肌、益气固表之功效;墨旱莲、补骨脂、蒺藜、女贞子、制何首乌具有补肝肾、润五脏之功效;桑枝、郁金具有凉血止血、行气祛瘀之功效;紫草、功劳叶具有益气敛汗、养阴清热之功效;白芷具有活血排脓，生肌止痛之功效;炙甘草具有和中缓急、调和诸药之功效[20]。全方具有益气固表、清热解毒、活血化瘀、健脾除湿之功效，因而对白癜风的治疗发挥了良好辅助作用。

综上所述，对于白癜风的治疗，在自拟芪白汤基础上，使用毫火针治疗，对促进患者病理学免疫指标和氧化应激指标恢复有良好效果，毫火针结合自拟芪白汤能够有效促进白癜风病情的恢复。

参考文献

[1]李君，王茂生，杨淑莲，等.验方参芪杀白汤联合化疗治疗急性髓细胞白血病临床观察[J].中国中医急症，2016，25（3）：531-533.

[2]Rafa Czajkowski K M.Current aspects of vitiligo genetics[J].Postepy Dermatologii I Alergologii，2014，31（4）：247-255.

[3]Wang K Y，Wang K H，Zhang Z P.Health-related quality of life and marital quality of vitiligo patients in China[J].Journal of the European Academy of Dermatology Venereology，2015，25（4）：429-435.

[4]盛国荣，丁晓云，刘海琴，等.退白汤联合NB-UVB对寻常型白癜风患者IL-6和TGF-β表达水平的影响[J].中药药理与临床，2015，31（4）：207-211.

[5]李新爱.自拟驱白汤联合卡介菌多糖核酸治疗白癜风疗效观察[J].皮肤病与性病，2017，39（1）：53-54.

[6]周贝，刘亚琳，唐健元.我国中药新药临床研究技术指导原则体系发布概况[J].中国临床药理学杂志，2017，33（18）：1850-1852.

[7]郭小青，郝保华.中医诊断学术语规范研究中存在问题的探讨[J].陕西中医，2006，27（1）：70-72.

[8]章海涛.他克莫司联合糠酸莫米松治疗儿童白癜风的疗效观察[J].实用临床医药杂志，2015，19（21）：176-177.

[9]俞春娣，严炯.毫火针联合308 nm准分子光治疗白癜风疗效观察与护理[J].中医临床研究，2017，9（15）：96-98.

[10]Teulings H E，Limpens J，Jansen S N，et al.Vitiligo-like depigmentation in patients with stage III-IV melanoma receiving immunotherapy and its association with survival：a systematic review and meta-analysis[J].Journal of Clinical Oncology Official Journal of the American Society of Clinical Oncology，2015，33（7）：773-781.

[11]曾洲平，林宝珠，葛天华，等.白癜风患者血清和皮膚提取液中氧化与抗氧化能力的比较研究[J].皮肤病与性病，2015，37（3）：140-142.

[12]尚智伟，冯海瑕，王为平，等.准分子激光联合自拟消白方剂治疗白癜风的疗效及机制初探[J].中国皮肤性病学杂志，2017，31（11）：1252-1256.

[13]程校衔，何渊民，张倩，等.白癜风患者缺铁性贫血流行病学调查及危险因素分析[J].中国麻风皮肤病杂志，2016，32（8）：453-455.

[14]赵晓菲，刘国艳.白癜风氧化应激发病机制的研究进展[J].中国麻风皮肤病杂志，2016，32（3）：189-191.

[15]Mohan G C，Silverberg J I.Association of Vitiligo and Alopecia Areata With Atopic Dermatitis：A Systematic Review and Meta-analysis[J].Jama Dermatology，2015，151（5）：522-528.

[16]常毓倩，李舒丽，坚哲，等.辛伐他汀对白癜风氧化应激模型中角质形成细胞趋化因子分泌的影响[J].中国麻风皮肤病杂志，2017，33（2）：79-82.

[17]陈体高，许传勤，相勇，等.毫火针联合中药口服治疗气滞血瘀型带状疱疹后遗神经痛的临床研究[J].中国当代医药，2016，23（24）：139-141.

[18]姚卫锋，李士颖.中医毫火针疗法的研究进展[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志，2016，15（4）：258-260.

[19]贾文霞，张春雨.毫火针联合放血拔罐治疗老年性皮肤瘙痒症疗效观察[J].中医临床研究，2016，8（28）：36-38.

[20]张宗保，曹萍.芪归祛白胶囊治疗小鼠白癜风的实验研究[J].中国麻风皮肤病杂志，2014，30（11）：676-678.

（2019-01-21收稿 责任编辑：苍宁）