刺五加提取物有效成分含量及改善睡眠功能研究

关雪晶

摘要：刺五加又名刺拐棒、老虎镣子，为多年生草本植物，富含丰富的有效药用成份，比如总黄酮类、原儿茶酸及苯丙素类等，具有数十种药理作用。近年来，刺五加提取物作为保健食品原料，具有广泛的市场开发前景。本文是针对刺五加提取物（紫丁香苷为0.5%），研究其是否具有改善睡眠作用。

关键词：刺五加提取物：三种有效成份含量;改善睡眠功能

本文的目的是研究刺五加提取物有效成分含量，及刺五加提取物对小鼠睡眠是否具有改善。方法是：采用中国药典一部刺五加浸膏项下梯度的方法测定含量。睡眠研究在安静、恒温、恒湿的条件下，通过刺五加醇提物对小鼠直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验、巴比妥钠睡眠潜伏期实验来检测是否具有改善睡眠作用。结果显示：刺五加提取物中紫丁香苷、刺五加皂苷E高达0.5%、异嗪皮啶高达1.6%，刺五加提取物通过四项动物实验证明其对小鼠睡眠具用改善作用。

一、紫丁香苷、异嗪皮啶、刺五加皂苷E有效成分含量测定

实验材料及仪器。刺五加皂苷B、E及异嗪皮啶标准品，均来源于中检院。高效液相色谱仪：Agilent1260。分析天平：梅特乐托力多XSE205。

供试品处理。称取刺五加提取物0.2g置50mL容量瓶中，加甲醇超声处理30min，定容，摇匀，过0.22“m滤膜，弃去初滤液，取续滤液即为供试品溶液。

刺五加提取物含量测定结果：紫丁香苷为0.5%、刺五加皂苷E为0.5%、异嗪皮啶为1.6%。

二、刺五加提取物改善睡眠研究

受试样品。刺五加提取物（紫丁香苷0.5%），灰分9.0%，水分6.1%，性状为棕黄色粉末，置干燥、通风、阴凉处保存。人体日食用推荐量为0.3g（以60kg体重计）。

实验动物。SPF级雄性健康成年小鼠，体重18-22g。将实验动物分成三组，第一组进行直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验;第二组进行戊巴比妥钠（或巴比妥钠）阈下剂量催眠实验;第三组进行巴比妥钠睡眠潜伏期实验。将160只小鼠随机分配，分成四组，每组40只，再按体重随机分成4小组，每个小组10只动物，命名为高、中、低三个剂量小组和阴性对照小组。高到低三个剂量小组分别为人体日食用量的5倍、10倍、30倍，受试样品经口腔给药，周期为30天。

实验方法及结果。直接睡眠实验。小鼠末次给药后，是否有睡眠现象出现，如果30-60秒内翻正反射消失，即为小鼠进入睡眠状态。记录不同剂量小组与阴性对照小组入睡的动物数量及入睡时间。

延长戊巴比妥钠睡眠时间实验：在戊巴比妥钠催眠的基础上，观察受试样品是否能够延长动物睡眠时间。 （注戊比妥钠现用现配）

戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验：各剂量组动物连续灌胃一个月，在末次给药15min后，各組动物按3Smg/kg'bw剂量腹腔注射戊巴比妥钠，注射量为lOmL/kg'bw，以小鼠翻正消失1min为睡眠指标，记录给戊巴比妥钠30min内各组入睡动物数。

巴比妥钠睡眠潜伏期的影响：经口给予小鼠不同剂量的刺五加提取物一个月，腹腔注射巴比妥钠，观察小鼠的睡眠潜伏期。

结论。刺五加提取物对小鼠直接睡眠无影响，0.15g/kg.bw/d组小鼠睡眠时间显著长于Og/kg'bw/d组（P<0.05）。对戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验无统计学意义。0.15g/kg.bw/d组小鼠睡眠潜伏期明显短于Og/kg'bw/d组（P<0.05）。刺五加提取物（紫丁香苷0.5%）具有改善小鼠睡眠作用。

现代人由于各方面压力导致睡眠质量较差，严重影响日常生活和工作，国家中医药管理局、科技部重点鼓励四类功能保健食品加速研发申报，其中一个功能就是改善睡眠。本文针对刺五加提取物改善睡眠的研究，希望可以用到保健食品研发中，提高人们的睡眠质量。