酶免法和胶体金法检测丙肝抗体的结果比较与分析
2019-09-09和秀梅
和秀梅
【摘 要】目的:比较酶免法和胶体金法进行丙肝抗体检测的不同结果。方法:选择疾控中心某哨点在2018年-2019年期间检测的丙肝高危群体人群,一共800人份,其中暗娼人群占40O份,吸毒人员占400份。分别对所有对象进行酶免法检测以及胶体金法检测。对比不同检测方法下两类人群的阳性率,同时对比不同方法的检测时间。结果:利用酶免法时,从吸毒人员中检测到丙肝阳性个体40人(10.0%),从暗娼中检测到阳性个体4人(1%);利用胶体金法时,从吸毒人员中检测到丙肝阳性率为36人(12.0%),从暗娼中检测到丙肝阳性率4人,占比1%。可以看出,使用不同方法进行HCV-Ab的检测,最终的检测结果相差不大(P>0.05)。使用酶免法时,检测时间为(98.24±5.37)min,利用胶体金法时为(5.58±3.19)min,可以看出在检测时间上两种方法有十分突出的差距(P<0.05)。结论:进行HCV-Ab的检测,酶免法和胶体金法都有比较准确的检出率,但从应用时间来看,胶体金法更胜一筹,检测速度很快,可优先作为丙肝的临床检测方法。
【关键词】丙肝抗体;酶免法;胶体金法
【中图分类号】R969.4 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2019)10-0020-02
1 引言
丙肝是世界范围内比较常见的传染性疾病,因为可能发展成肝硬化和肝癌,比较难治,所以很受疾控中心的关注。新时期,因为人们思想观念的改变,社会上嫖娼和吸毒的人群数量持续增加,使得丙肝的发生率也持续增加,带来更高的死亡率。丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)是机体内由于自身免疫细胞对HCV感染给出的反应性产物,对其进行检测是分析丙肝发病情况,进行丙肝筛查诊断的重要依据。
2资料与方法
2.1 材料:选择疾控中心某哨点在2018年-2019年期间检测的丙肝高危群体人群,一共800人份,其中暗娼人群占40O份,吸毒人员占400份。暗娼400份均是女性,吸毒人员中有男382例,女18例,年龄19-46岁,平均(34.25±10.17)岁。
2.2方法:收集所有检测对象的血液标本,采集方法为空腹静脉血采集,4mL,放入促凝管,凝集半小时,进行高速离心,吸取出血清,放入冰箱中低温保存。
分别对所有对象进行酶免法检测以及胶体金法检测。
(1)酶免法:选择华大基因提供的试剂盒,在室温中将试剂盒静置半小时,取出板条,设置好对照孔,阴性3孔,阳性3孔,按照微孔板的顺序对试剂样品进行编号。调节100μL的稀释液,加入到相应的孔中,然后加入阴阳对照以及待测样本;封板,37℃放置1小时,取出后进行清洗;在每个孔中加入酶标试剂100μL,再次封板,37℃放置半小时,取出后进行清洗;将显色剂A、B各50μL加入各个孔,混匀,避光显色,37℃放置半小时;在每个孔中加入50μL终止液,混匀,设置酶标仪,波长选择450/630nm,测定每个孔的A值,判定标准为:吸光度值≥1时,HCV-Ab为阳性。(2)胶体金法:选择华大基因提供的试剂盒。将标本温恢复至 25℃左右再使用,将试纸条取出,吸取受试者血清(50μL),滴入加样区。在半小时内,观察试纸条的变化,进行判断,阳性结果以质控线、反应线位置出现紫红色为主。
2.3观察指标:对比不同检测方法下两类人群的阳性率,同时对比不同方法的检测时间。
2.4统计学处理:利用SPSS处理数据,数据以%和`x±s表示,分别进行c2检验和t检验,以P<0.05表示差异有统计学意义。
3结果
3.1HCV-Ab阳性率对比:利用酶免法时,从吸毒人员中检测到丙肝阳性个体40人(10.0%),从暗娼中检测到阳性个体4人(1%);利用胶体金法时,从吸毒人员中检测到丙肝阳性率为36人(12.0%),从暗娼中检测到丙肝阳性率4人,占比1%。可以看出,使用不同方法进行HCV-Ab的检测,最终的检测结果相差不大(P>0.05)。
3.2不同方法检测时间对比:使用酶免法时,检测时间为(98.24±5.37)min,利用胶体金法时为(5.58±3.19)min,可以看出在检测时间上两种方法有十分突出的差距(P<0.05)。
4讨论
丙肝是由HCV引起的病毒性肝炎,具有传播途径明确、起病隐匿、慢性化程度高的特点,其传播途径主要是输血、针刺、吸毒等。该病属于全球性流行,并有可能发展成肝脏慢性炎症坏死或者纤维化,严重的可能发展成肝硬化和肝癌。近几年来,因丙肝导致的死亡率逐渐增加,已成为世界范围内的公共卫生问题。近期报告数据表明,HCV在全球大约有1.7亿人感染,而每年新发病例大概在3.5万左右。
基于此,社会上十分重视对于丙肝的检测和预防。而对于丙肝的防治,进行丙肝的检测十分重要,需要及早检测出丙肝的存在。在这里,我们提出HCV-Ab的检测,其是机体内由于自身免疫细胞对HCV感染给出的反应性产物,对其进行检测是分析丙肝发病情况,进行丙肝筛查诊断的重要依据。目前常用的检测方法有酶联免疫吸附分析法(ELISA)、放射免疫法等,其中ELISA是目前临床最常用的方法。在检测过程中,HCV-Ab呈阳性是HCV感染的标志。
本篇文章选择酶免法(ELISA)和胶体金法(GICA)进行HCV-Ab的检测。ELISA的检测原理是使用固相载体结合抗原、抗体,然后使用特殊的试剂,借助抗原抗体特异性结合反应进行检测。GICA的检测原理是利用还原剂将氯金酸聚合成金颗粒,然后通过静电作用形成胶体状态。其中带负电的疏水胶溶液由于靜电作用形成的稳定的胶体状态,被称为称胶体金。
在本次研究中,利用酶免法时,从吸毒人员中检测到丙肝阳性个体40人(10.0%),从暗娼中检测到阳性个体4人(1%);利用胶体金法时,从吸毒人员中检测到丙肝阳性率为36人(12.0%),从暗娼中检测到丙肝阳性率4人,占比1%。可以看出,使用不同方法进行HCV-Ab的检测,最终的检测结果相差不大(P>0.05)。使用酶免法时,检测时间为(98.24±5.37)min,利用胶体金法时为(5.58±3.19)min,可以看出在检测时间上两种方法有十分突出的差距(P<0.05)。这些数据说明,进行HCV-Ab的检测,酶免法和胶体金法都有比较准确的检出率,但从应用时间来看,胶体金法更胜一筹,检测速度很快,可优先作为丙肝的临床检测方法。
5结语
进行HCV-Ab的检测,酶免法和胶体金法都有比较准确的检出率,但从应用时间来看,胶体金法更胜一筹,检测速度很快,可优先作为丙肝的临床检测方法。
参考文献:
[1]魏利霞.酶免法和胶体金法检测丙肝抗体的结果比较[J].现代医用影像学,2018,27(4):1350+1354.
[2]贾慧霞.比较酶免法和胶体金法对丙肝抗体的检测结果[J].健康之友,2019,(19):4 4.