强冷凝集对血常规检测结果的影响及处理措施

刘巍

（成都市新都区第三人民医院检验科 四川 成都 610000）

在临床检验工作中，血常规是应用最广泛且最基础的检查项目之一，而在该项目检查中，各医院几乎均实现了自动化检测，这使得血常规检验准确度和效率等有了较大提升[1]。但血常规检测结果在部分因素的影响下，导致了血细胞分析检测难以达到理想的准确性，而常见的感染因素即为冷凝集[2]。作为一种自身免疫性抗体，冷凝集素主要为IgM抗体，当温度＜31℃时该抗体可对自身红细胞抗原产生作用，使之发生细胞凝集，但具有一定可逆性[3]。在血常规检测中，冷凝集会影响检测结果，导致红细胞结果出现假性降低，还会导致红细胞平均血红蛋白浓度、红细胞平均血红蛋白含量、红细胞平均容积等假性升高，因此需采取有效的方法加以处理，以保证检测结果的准确性[4]。本文随机选取我院强冷凝集血常规检测标本30例为对象，分析其相关临床资料，采用3种方法处理标本，即样本1：7预稀释法、血浆置换法、37℃水浴法，然后对强冷凝集对血常规检测结果的影响及处理措施做了分析，旨在筛选出最佳的措施处理强冷凝集标本，以保障检测结果的准确行和可靠性。现报道如下.

1.资料与方法

1.1 一般资料

随机选取我院强冷凝集血常规检测标本30例为对象，分析其相关临床资料，其中男性17例，女13例，年龄为6～68岁，平均年龄为（45.32±14.57）岁。疾病类型：系统性红斑狼疮、多发性骨髓瘤、自身免疫性溶血性贫血、肝硬化、白血病、肺炎支原体感染等。所有标本均为强阳性（1：1024以上阳性）。本组30例标本初次检验时均存在明显异常的结果，且红细胞发生凝集，均经血涂片证实。

1.2 方法

采用3种方法处理标本，即样本1：7预稀释法、血浆置换法、37℃水浴法，然后采用血细胞分析仪常规监测，仪器型号SYSMEX-XN1000，并行手工涂片染色。具体为：（1）试剂与仪器：XN-1000全自动血细胞分析仪及配套质控品、试剂（产自日本SYSMEX公司）；由珠海贝索生物技术有限公司提供的瑞氏染色液；由美国BD公司提供的真空采血管。（2）实验分组及处理。对每位患者采集外周血标本2管，采用EGTA-K2（乙二胺四乙酸二钾）真空抗凝采血管采集，混合充分。经不同方法进行处理后进行检测：①直接上机：即直接上机测定2管标本，取两次平均值作为检测结果。②37℃水浴法：即在37℃水浴箱中对其中一管标本温育30min后立即检测，然后获取检测结果。③样本1：7预稀释法：即采用本次所用仪器的原装稀释液240μL，另取含抗凝剂的EP管，置于37℃水浴箱温育30mmin，将经温育的稀释液吸取未经处理的外周血40μL混合后进行检测，调整仪器模式为1：7预稀释。④血浆置换法：即将一管标本血经离心处理，时间为5min，转速为3000r/min，吸取上层血浆，采用仪器原装稀释液等量加入血浆中充分混合，反复3次后上机检测。⑤采用上述各方案对冷凝集标本进行检测的同时，采用瑞士染色液分别进行涂片染色镜检，观察是否完全解除红细胞凝集。

1.3 观察指标

观察分析检测结果，包括血小板、红细胞、血红蛋白、白细胞、MCHC（红细胞平均血红蛋白浓度）、MCH（红细胞平均血红蛋白含量）、MCV（红细胞平均容积）、HCT（红细胞和血细胞比容）等。

1.4 统计学分析

数据采用SPSS20.0统计软件进行统计学分析，计数资料采用率（%）表示，进行χ2检验，计量资料采用（±s）表示，进行t检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2.结果

本组30例标本直接上机检测时，MCHC、MCH、MCV等异常增高，HCT明显降低，且P＜0.05；且存在红细胞凝集相关报警。标本经30min 37℃水浴法加热处理后立即检测，MCHC、MCH稍高（P＜0.05）；其余指标均完全恢复正常。经血浆置换法处理后，血小板结果显著降低（P＜0.05），而红细胞相关指标检测结果均恢复正常。经1：7预稀释法处理后，所有指标检测结果均趋于正常。经37℃水浴法处理后的标本在涂片染色镜下显示红细胞轻度凝集，而1：7预稀释法、血浆置换法等处理后涂片显示无红细胞凝集。具体见表。

表 不同方法处理后血常规检测结果对比（±s）

表 不同方法处理后血常规检测结果对比（±s）

注：与其余三种方法相比，*P＜0.05；与预稀释法和血浆置换法相比，#P＜0.05；与其他方法相比，经血浆置换法处理后PCT显著降低，&P＜0.05。

相关指标 直接上机 37℃水浴法 血浆置换法 预稀释法红细胞（×1012/L） 0.92±0.21* 3.54±0.94 4.94±1.29 5.15±1.50血红蛋白（g/L） 121±15 114±15 124±12 131±17 HCT（%） 7.5±1.3* 27.4±2.9 34.5±3.8 35.5±3.7 MCV（fL） 83.4±8.9 77.8±7.0 69.5±5.9 68.8±7.4 MCH（pg） 131.4±10.4* 32.4±4.8# 25.4±3.8 25.6±4.3 MCHC（g/L） 1577±98* 417±57# 362±38 372±41白细胞（×109/L） 9.35±1.06 9.15±1.25 8.72±1.46 9.55±1.77血小板（×109/L） 231±29 242±26 92±11& 244±36

3.讨论

在临床上，冷凝集素综合征是一种以微循环血栓、慢性溶血性贫血为特征的一组疾病，主要由外界温度降低和自身反应性红细胞凝集等诱导因素所致。冷凝集素存在于大部分人的血清中，其具有较低的效价，且通常不会造成自身红细胞凝集，但在支原体肺炎、多发性骨髓瘤、自身免疫性溶血性贫血等情况下，其效价可异常增高[5]。血液离体后若含有较高效价的冷凝集素，则红细胞抗原可结合冷凝集素，从而发生红细胞凝集，其存在一定可逆性，即升温至一定程度后其可自动解聚[6]。在对冷凝集血液标本进行检测的过程中，采用全自动血细胞分析仪检测时，红细胞聚集导致其无法从红细胞通道单个通过，因而会大大降低红细胞计数结果，但会增加单个红细胞平均体积，而红细胞经溶解后采用比色法检测所得为血红蛋白，所以其结果不会受影响。因此MCHC、MCH等指标会异常升高。通过对强冷凝集的标本采用不同的措施加以处理，即可有效完全解离红细胞凝集，从而保障检测结果的准确性，但不同的处理方法获取的检测结果存在一定差异[7]。本组30例标本直接上机检测时，MCHC、MCH、MCV（红细胞平均容积）等异常增高，HCT明显降低，P＜0.05；且存在红细胞凝集相关报警。标本经30min 37℃水浴法加热处理后立即检测，MCHC、MCH稍高（P＜0.05）；其余指标均完全恢复正常。经血浆置换法处理后，血小板结果显著降低（P＜0.05），而红细胞相关指标检测结果均恢复正常。经1：7预稀释法处理后，所有指标检测结果均趋于正常。经37℃水浴法处理后的标本在涂片染色镜下显示红细胞轻度凝集，而1：7预稀释法、血浆置换法等处理后涂片显示无红细胞凝集。因此可见，强冷凝集标本对血常规检测结果存在不利影响，而采取相应措施加以处理后，即可显著提升检测结果的准确性。

综上所述，强冷凝集标本对血常规检测结果存在一定影响，而采用1∶7预稀释法处理强冷凝集标本后，其效果显著优于血浆置换法和37℃水浴法，可确保检测结果的准确性，且操作简便，因此值得临床应用推广。