基于流式细胞仪检测下输血前后外周血T淋巴细胞亚群的水平变化

赵振广 沈阳爱尔眼视光医院 （辽宁 沈阳 110002）

内容提要： 目的：研究基于流式细胞仪检测下红细胞输注无效患者输血前后外周血T淋巴细胞亚群的水平变化。方法：采用流式细胞仪分别检测40例红细胞输注无效患者输血前后外周血T淋巴细胞亚群的水平。结果：红细胞输注无效组输血后的细胞百分比细胞百分比以及比值较输血前升高（P＜0.05），而细胞百分比无改变（P＞0.05），水平较输血前下降（P＜0.05）；红细胞输注有效组细胞百分比、细胞百分比细胞百分比以及比值无变化（P＞0.05），水平较输血前升高（P＜0.05）。结论：红细胞输注无效者免疫功能明显异常细胞减少导致T细胞异常活化，可能是红细胞输注无效的原因之一。

成分输血是临床抢救及治疗的重要方法。其中红细胞悬液输注是成分输血中最常用的且不可替代的方法，但在输注红细胞悬液治疗期间，会出现输注无效的现象，现已引起临床专家的关注。血红蛋白的升高是临床衡量输血效果的重要指标，因此，将血容量正常的成年贫血患者作为评价对象，若此患者输注400mL全血或由其制备的红细胞后，患者的血红蛋白大约可提高10g/L，或者提高红细胞容积0.03，若患者经输注后达不到以上的升高标准，则认为患者输注无效或者效果欠佳[1]。一旦患者输注无效，患者的淋巴细胞免疫功能就会受到影响，本研究通过采用流式细胞分析仪对输血患者进行外周血T淋巴细胞亚群细胞的水平检测，观察评估输血前后T细胞的指标变化，并对输注无效及输血有效的患者变化进行分析，探讨T淋巴细胞亚群CD4+CD25+Treg细胞的水平对红细胞输注效果的影响和机制，现报道如下。

1.材料与方法

1.1 临床资料

本研究收集2017年1月～2018年6月在本院反复输血患者80例，每例至少输注5次，红细胞输注量不低于10U。再次输注红细胞2U后，根据24h内血红蛋白量检测结果分为无效组40例和有效输血组40例；除外继续失血、血液渗透血管外、脱水、大量补液血液稀释及红细胞体外循环丢失患者；且两组排除性别、年龄、患者的疾病种类分布影响。输血前后检测外周血T淋巴细胞亚群细胞的水平。

仪器试剂：血细胞分析仪稀释剂，FFS，FBA，4-DL，CL-50，SLS，鞘液（Sysmex公司，批号：G1011）；流式细胞仪及淋巴细胞亚群试剂盒均选自美国BD公司：淋巴细胞亚群试剂盒批号51961，流式细胞仪型号FACSCalibur。

1.2 方法

1.2.2 检测时间。输血前后全部样本检测。

1.2.3 检测方法。按照试剂盒说明书进行操作。

1.3 统计学分析

所得研究数据通过SPSS 17.0系统软件进行统计，±s表示计量资料，通过t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.结果

表1.输血前后T淋巴细胞亚群变化情况(n=30,±s,%)

表1.输血前后T淋巴细胞亚群变化情况(n=30,±s,%)

组别 CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+CD4+CD25+无效组 输注前 52.73±4.76 25.53±5.46 23.21±3.69 1.39±0.09 11.79±2.39输注后 58.59±6.54 33.19±6.38 22.76±4.34 2.12±0.18 10.61±1.10有效组 输注前 54.69±3.78 23.43±2.36 23.21±3.20 1.61±0.21 10.70±1.31输注后 52.65±4.66 23.10±2.40 23.80±2.87 1.37±0.19 18.81±3.19

3.讨论

大量文献研究报道：输血中的红细胞悬液具有较多免疫相关物质种类，若患者多次输血可导致患者接收外来刺激增加，进而导致患者的免疫系统活化，而被活化的免疫系统可提高输入的红细胞反应，致使红细胞破坏增加，导致患者的输注无效或效果不佳[2]。

研究报道：异体输血主要抑制T细胞免疫[3]。而T细胞在自身免疫性疾病的发生、发展中起重要作用[4]。人体免疫应答的中心细胞为Th细胞，人体的免疫功能状况可通过细胞比值的变化来反应细胞比值升高或下降可反应患者的免疫功能的亢进或低下[5]。

本研究通过对输注无效患者进行外周T细胞的检测结果显示：红细胞输注无效患者淋巴细胞百分比淋巴细胞百分比比值等三项指标均高于输注有效组（P＜0.05），而有效组患者的输血后水平显示增多，无效组患者输血后水平显示减少，这一结果说明：无效组患者输血后由于水平降低，导致患者的免疫耐受平衡受到破坏，T细胞的活化抑制受到影响，致使患者的免疫系统活化过度，产生大量的活化T细胞，T细胞比例的失调致使细胞因子释放，红细胞破坏加速，致使输注效果不佳。

因此，本研究的结果显示，红细胞输注无效者免疫功能明显异常细胞减少导致T细胞异常活化，可能是红细胞输注无效的原因之一。