宫颈细胞DNA定量分析在筛查宫颈病变中价值

孙煜昀

厦门麦克奥迪医学检验所，福建厦门 361006

作为一种女性常见恶性肿瘤，病因明确的宫颈癌需要一个漫长地发展过程，一般是从宫颈上皮内瘤变开始，在十数年间逐渐发展至宫颈癌，而这个发展过程实际上是可逆的，若能在上皮内瘤变期进行准确的筛查并及时为患者进行治疗，宫颈癌治愈率将可以提升至98%[1]。目前，可用于诊断宫颈病变的检查技术有常规细胞学、液基细胞学、阴道镜、细胞DNA定量分析等，这些技术可以观察和分析细胞的形态变化、DNA指数改变等，实现对宫颈癌及宫颈病变的准确诊断。该文选择2015年3月—2018年3月期间接受宫颈病变筛查的1 620例受检者，试探究宫颈细胞DNA定量分析在宫颈病变筛查中具有的价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取接受宫颈病变筛查的1 620例受检者，回顾分析其临床资料，具体包括：①性别构成：均为女性；②年龄分布：最小 20 岁，最大 64 岁，平均（42.52±11.12）岁。注：所有受检者均无盆腔放疗史与子宫切除史[2]。

1.2 方法

使用窥阴器将患者宫颈暴露，于宫颈外口插入宫颈刷，直至宫颈管内，将毛刷呈顺或逆时针旋转5～6周后取出，放入含有固定液的瓶中轻摇，留待检验。实验室人员取采集到的标本制成薄层细胞片2张，一张行巴氏染色，一张行Feulgen染色，分别以液基薄层细胞检测仪滑检测，以细胞肿瘤筛查分析仪及配套试剂进行DNA定量分析[3]。

1.3 观察指标

基于病理诊断结果这一金标准，对比液基细胞学、DNA定量分析两种方法的阳性检出率。其中阳性检出率的标准分别为：①液基细胞学：基于TBS标准可以分为ASCUS-不明意义的非典型鳞状上皮细胞、LSIL-低度的鳞状上皮内病变、HSIL-高度的鳞状上皮内病变、CIS-原位癌、SCC-鳞状细胞癌，若达到上述标准则结果为阳性[4]；②DNA定量分析：若DNA指数高于2.5的细胞、异倍体细胞峰不可见，则结果为阴性；若是发现DNA指数高于2.5的细胞、异倍体细胞峰，则结果为阳性[5]。对于有1～2个DNA指数高于2.5的细胞并伴有ASCUS或有异倍体细胞峰的患者、LSIL及以上者、有3个以上DNA指数高于2.5的细胞者，应使用阴道镜进行4点以上的多点组织活检[6]。

1.4 统计方法

参与研究的宫颈病变患者的所有数据使用SPSS 19.0统计学软件检验。计数资料使用[n(%)]形式表示，行χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 阳性检出率

共有115例患者确诊有宫颈病变。液基细胞学检查结果为：ASCUS患者7例，LSIL患者33例，HSIL患者 19例，SCC患者1例，共有60例患者出现阳性检查结果，总阳性检出率为3.70%。

宫颈细胞DNA定量分析结果为：18例患者有1～2个DNA指数高于2.5的细胞，94例患者有3个以上DNA指数高于2.5的细胞），共有112例患者出现阳性结果，总阳性检出率为6.91%。

就阳性检出率而言，宫颈细胞DNA定量分析高于液基细胞学检查，差异有统计学意义 （χ2=62.342，P=0.000＜0.05）。

2.2 具体检查结果

这些受检者结合液基细胞学与DNA定量分析进行联合检测，行多点组织活检，其中液基细胞学检查结果为阳性者60例，液基细胞学检查结果为阴性但DNA定量分析结果依然呈阳性者47例，这47例受检者中有35例显示组织活检结果为阳性，其中CIN I有30例，CIN II有5例，CIN III有0例。为定量分析结果为阳性的患者行组织病理检查，115例患者中仅有3例患者因为DNA细胞正常、液基细胞学结果呈阳性而进行组织活检，这意味着DNA含量的改变要早于形态学改变。见表1。

表1 液基细胞学与DNA定量分析结果[n(%)]

3 讨论

宫颈癌是一种对女性健康乃至生命有着极大威胁的恶性肿瘤，其发病率在女性恶性肿瘤中居于次位，仅低于乳腺癌[7]。宫颈癌的高发群体为中老年女性，其中原位癌高发群体为30～35岁的女性，而浸润癌的高发群体为45～55岁的女性，但是近年来受生活习惯、社会环境、饮食结构变化的影响，乳腺癌也呈现出越来越年轻的发病趋势[8-9]。事实上，宫颈癌是目前唯一病因明确，可以通过医学干预手段来显著降低发病率与死亡率的恶性肿瘤，而对于宫颈癌患者，治疗的关键在于尽早给予准确的筛查，我国的宫颈癌发病率与死亡率均远远高于欧美发达国家，原因便在于缺少对适龄女性的癌前病变筛查，无法及时发现其癌前病变，不能在早期给予针对性干预，便无法及时逆转宫颈癌的发展[10]。及至确诊患者已经进入中晚期，此时常规干预手段已经难以发挥其效果，因此患者只能通过放化疗等措施来延长生存期限。

液基细胞学检查是受检者宫颈上皮细胞形态进行观察，这种检查方法虽然有较高的准确性，但是细胞形态学检查有着一定的局限，检测者长时间阅片带来的视觉疲劳也会影响该项检查的敏感性，薄层细胞片的重复性较差，基于TBS标准判片容易出现组多意义不明的结果[11]。而不明意义的非典型鳞状上皮细胞（ASCUS）在TBS报告中是最为常见的，其既可能是良性炎症，也可能是CIN I、CIN II、CIN III，甚至也有可能是早期浸润癌，然而浸润癌的检出率较低，但病变的转归差异较为明显，若进行细胞学随访，可能出现部分病历丢失或假阴性诊断结果；并且，由于液基细胞学的薄层细胞片缺乏重复性，ASCUS检查结果也具有检查结果重复性差的问题，因此液基细胞学方法的准确性受到了一定限制。

而与液基细胞学方法相比，DNA定量分析具有更加明显的优势，其对癌前病变的早期诊断及宫颈癌的筛查有着更高的准确性，其可以避免细胞学方法中因人工阅片主观经验、技术有限、视觉疲劳所带来的假性结论，可以避免漏诊或误诊问题的出现。事实上，DNA定量分析针对病变细胞DNA异倍体来判断染色体异常与否，在这种方法中，DNA异倍体代表了染色异常，可以作为细胞癌变及癌前病变的一种特征指标[12]。刘国生等人[13]在其研究中指出，在细胞恶变的过程中，DNA含量改变要明显早于形态学改变，故DNA定量分析在识别出宫颈细胞中的DNA异倍体细胞的同时还可以识别出异常增生的细胞。通过这种方法甚至可以掌握肿瘤细胞遗传基因变异过程，即使是肉芽无法观察到的宫颈细胞发生的极其微小的改变——通常为癌前病变表现，其也可以通过检测结果分析得知，因此临床可以根据这种方法的检查结果开展早期治疗[14]。

该文选择液基细胞学检查与DNA定量分析两种方法为宫颈病变患者进行筛查，从结果可知，两种方法的阳性检出率分别为3.70%、6.91%，与潘秀荣等人[15]5.62%、9.72%的研究结果相近。由此可见，具有上文提及优势的DNA定量分析具有更高的临床价值。

综上所述，宫颈细胞DNA定量分析具有非常显著的应用价值，其阳性检出要高于常规液基细胞学检查，临床可以使用宫颈细胞DNA定量分析来加强对宫颈癌及癌前病变的筛查效果。