血清ASMase水平对非酒精性脂肪性肝病患者肝纤维化程度的预测价值

高峻 郭旭升 韩利杰

近年来非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)成为近年来患病增加最为明显的疾病之一，其属于一种获得性代谢应激肝损伤。而NAFLD是导致肝纤维化的原因之一[1]。目前对于该疾病尚无特异的临床诊断手段[2-3]。酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase，ASMase)是一种水解鞘磷脂产生酰胺的重要溶酶体酶，有研究指出其在NAFLD的表达水平明显高于正常肝组织[4]，提示其可能成为NAFLD诊断的生物标志物。因此本文通过回顾性分析探讨血清中ASMase水平对NAFLD患者肝纤维化程度的预测作用，现报道如下。

资料与方法

一、 一般资料

选取2015年1月至2018年6月间我院收治87例确诊的非酒精性脂肪性肝病患者为研究对象，男性48例，女性39例，患者年龄32～65岁，平均(43.98±6.67)岁；其中男性身高162～187 cm，平均(173.39±6.42)cm，体重72～89 kg，平均(76.25±2.44)kg；女性身高155～178 cm，平均(163.25±4.49)cm，体重48～69 kg，平均(53.67±2.54)kg。

二、 纳入排除标准

纳入标准：(1)入选患者符合《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南》[5]诊断标准；(2)患者熟知该课题研究，签署知情同意书。排除标准：(1)因酒精、药物、病毒、免疫等疾病引起的脂肪性肝病(2)甲状腺急性病、库欣综合征患者；(3)存在肝肾功能不全或严重感染患者；(4)3个月内使用保护肝脏，或服用副作用能够引起肝损伤药物治疗者；(5)凝血功能异常，有严重心血管疾病患者。

三、 指标分析

(一) 体质指数(BIM)检测：由专人使用同一设备精确测量患者的身高、体质量，计算公式：BIM=体质量(kg)/身高2(m2)。

(二) 血清指标检测 入选患者在接受穿刺检测前3d于清晨空腹状态抽取患者外周血4 mL于一次性采血管，室温静置30 min，3000 r·min-1离心8 min分离血清，-80℃保存，由专门人员管理并检测患者血清中，采用全自动生化仪检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、 天冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)水平。采用酶联免疫吸附法检测血清中酸性鞘磷脂酶(ASMase)水平，试剂盒购于上海北沪生物科技有限公司。

(三) 病理学检测 所有入选患者住院后依照检测要求进行肝脏穿刺超声定位，签署知情同意书，肝组织标本长度1.5～2.0 cm，会管区数量不小于6个，标本经10%多聚甲醛固定、石蜡包埋，制备成组织切片用HE、Masson和网织纤维染色，依据《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南》肝组织病理学诊断标准，由两位病理医师分别进行，进行肝纤维化结果诊断；如结果不一致由病理科主任医师进行结果确定。根据肝组织活检结果将入选患者分为肝脏非显著纤维组(S0～S2)和肝脏显著纤维组(S3～S4)。

四、 统计学分析

结 果

一、不同肝纤维化阶段患者一般资料分析

显著肝纤维化患者的年龄、BMI指数明显高于无显著肝纤维化组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 不同肝纤维化阶段患者一般资料分析(±s)

与非显著肝纤维化组相比较：①P<0.001

二、 不同肝纤维化阶段患者肝功能指标和血清ASMase水平分析

两组患者血清中AST、GGT、ALP水平差异无统计学意义(P>0.05)，显著肝纤维化组患者血清中ALT水平明显高于非显著肝纤维化，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 不同肝纤维化阶段患者肝功能指标和血清ASMase水平分析(±s)

注：与非显著肝纤维化组相比较：①P<0.001

三、显著肝纤维化危险因素Logistic分析

以NAFLD肝纤维化为因变量，以上述单因素分析有统计学意义项年龄、BMI、ASMase、ALT为自变量，进行Logistic回归分析，结果显示上述指标均为显著肝纤维化的危险因素，见表3。

表3 显著肝纤维化危险因素Logistic分析

四、ROC曲线分析AMSase对NAFLD患者肝纤维化程度的预测研究

绘制NAFLD患者血清中AMSase相对表达水平值数据输入SPSS.20软件进行ROC曲线分析，根据输出结果显示AMSase最佳相对表达水平临界值为88.090 nmol/L，灵敏度80.56%，特异性75.86%，AUC为0.820，见图1。

图1 ROC曲线分析

肝纤维化主要是肝星状细胞(HSC)参与肝细胞的损伤修复过程中，大量活化后的细胞会转化为肌成纤维细胞，导致肝纤维化[6]。ASMase是一种水解鞘磷脂产生酰胺的重要溶酶体酶[7]，能够促进神经酰胺和磷脂酰胆碱生成，引起肝细胞的凋亡及囊性纤维化；也可以通过调节组蛋白酶B/D蛋白水解过程，促进HSC增殖加剧肝纤维化程度[8]，因此血清中ASMase水平可能成为NAFLD患者肝纤维化程度的诊断标志物。

本文依据NAFLD患者肝组织病理学诊断结果，将其分为肝脏非显著纤维组和肝脏显著纤维组。分析显示，显著肝纤维化组患者血清中AMSase水平明显高于无显著肝纤维化(P<0.05)。这可能与肝脏慢性损伤激活肝星状细胞的活化及增殖有关，Haines等[9]研究也证实AMSase的高表达，能够促进成肌纤维细胞的活化。Logistic结果显示血清中AMSase水平是NAFLD患者肝纤维化的危险因素之一；ROC曲线分析显示AUC值为0.82，灵敏度80.56%，特异性75.86%，表明NAFLD患者血清中AMSase水平能够作为预测肝纤维程度指标。

综上所述，血清中ASMase水平对非酒精性脂肪性肝病患者肝纤维化程度具有一定的预测价值，但对于该指标能否用于其他疾病引起的肝纤维化程度是否具有预测价值，是本文研究不足之处，也是值得后期继续探讨的研究方向。