Treg和IL-10在肝癌组织的表达及评估预后的价值

姚本来 李晓明 李芳飘 姚立鹏

肝癌是临床发病率较高的恶性肿瘤之一，统计显示其发病率有日益增加并年轻化的趋势，对公众健康造成严重威胁肿瘤的发生和发展与患者自身的免疫功能紧密相关。当肿瘤患者外周血中CD4+T细胞含量增加而CD8+T细胞含量减少时，患者自身免疫功能被抑制，而免疫抑制程度和患者的临床预后息息相关，Treg(调节性 T细胞)可以借助细胞细胞与细胞间的直接接触或者通过分泌免疫抑制性细胞因子来发挥对T细胞功能的抑制作用抑。

资料与方法

一、一般资料

通过抽签的方法从2016年3月至2018年3月在我院治疗的肝癌患者和健康体检人员中分别选取86例和67例作为研究对象并分别列为观察组和对照组。观察组86例患者包括42例男性患者和44例女性患者；患者年龄在36～70岁，平均(48.3±6.2)岁。对照组67名人员包括36例男性和31例女性；年龄在38～71岁，平均(48.4±6.3) 岁。观察组患者均通过术中病理明确诊断，本院伦理委员会讨论通过了此次研究且观察组和对照组人员一般资料类似，组间统计学比较差异无意义P>0.05。

二、仪器与方法

肝癌组织中Treg含量检测：术中选取一标本并将其制成细胞悬浮，借助密度梯度离心法将悬浮液中的淋巴细胞去除，然后用PBS溶液清洗并加入对应的单克隆抗体，置于室温中半小时，1小时内通过美国贝克尔曼公司生产的Epics XL型流式细胞仪对Treg、CD4+、CD8+等含量进行检测。

三、统计学方法

将此次两组患者的研究资料通过SPSS 21.0统计学软件进行处理，用均数±标准差表示计量资料，用t检验比较组间差异，用卡方检验计数资料，当P<0.05表示比较差异有统计学意义。通过Cox回归模型确立影响两组患者预后的危险因素，P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、观察组和对照组Treg细胞百分率比较

经过数据分析发现，和对照组相比，观察组患者CD4+CD25+Treg细胞、CD8+T细胞、CD3+等所占的百分比更具优势且组间统计学差异比较有意义(P<0.05)(见表1)。

表1 观观察组和对照组Treg细胞百分率比较(%)

二、Treg细胞水平在评估患者预后中的价值

借助Cox回归模型分析外周血中调节性T细胞含量、IL-10含量以及各种可能影响患者预后的病理指标(如癌细胞分化程度、肿瘤直径等)对预后的影响。通过多因素分析发现，肝癌患者预后和Treg细胞以及肿瘤细胞细胞分化程度密切相关，是影响患者预后的独立危险因素(见表2)。

表2 Treg细胞水平在评估患者预后中的价值

结 论

研究表明，患者自身的免疫功能特别是调节性 T细胞在肝癌组织中的高表达，和肝癌的发生、发展密切相关[1]。本次研究结果显示，与对照组相比，观察组患者CD4+CD25+Treg细胞、CD8+T细胞、CD3+等所占的百分比更具优势且组间统计学差异比较有意义(P<0.05)，这和多数研究报道相一致[2]。国外有研究发现，转移性肝癌患者的组织中调节性 T细胞水平明显增加，且和患者预后密切相关[3]。同时报道中指出，随着患者外周血中调节性T细胞水平的增加，患者的生存期显著降低[4]。调节性 T细胞含量的增加对免疫系统的杀伤肿瘤细胞作用有显著的抑制作用，这样可以在一定程度上肿瘤细胞的生长和繁殖，因此降低机体的调节性 T细胞含量能够在一定程度上增强机体机体的抗肿瘤效果，减少术后复发可能性。结肠癌患者肿瘤组织中调节性T细胞含量较高，在随访期间，术后复发患者的调节性T细胞和CD4+T细胞的含量都明显增加，而且随着白介素-10含量的增加，IL-17和干扰素的含量降低。调节性 T细胞是机体控制自身免疫反应的T细胞亚群，其可以生成包括白介素-10在内的多种免疫抑制因素，因此可以对IL-17和干扰素等的产生发挥抑制作用[5]。此次研究通过多因素分析发现，肝癌患者预后和Treg细胞以及肿瘤细胞细胞分化程度密切相关，是影响患者预后的独立危险因素。肝癌患者组织中的调节性T细胞含量明显增加，这样会对患者自身免疫系统产生抑制作用，从而增加肿瘤发生、发展几率。大量报道指出，减少肿瘤组织中的调节性 T细胞水平，能够防止肿瘤术后复发，改善患者预后。有研究证实，Treg细胞既能够抑制肿瘤杀伤细胞的数量，还能够凭借抑制其迁徙至肿瘤组织而实现肿瘤细胞对免疫系统的免疫耐受。国外研究证实，在部分肿瘤的小鼠模型中，降低调节性 T细胞水平能够明显增加机体对肿瘤细胞的杀伤效果，在一定程度上有助于改善预后[6]。由于患者术后的复发和患者体内Treg细胞含量密切相关，因此进行免疫干预对改善患者生存质量和延长生存期具有重要意义。过度表达的调节性 T细胞在肝癌的发生、发展中发挥重要作用，通过手术治疗有助于降低调节性 T细胞水平，提高患者自身免疫系统的的抗肿瘤能力[7-8]。

总之，肝癌患者的预后和调节性 T细胞的水平密切相关，临床可以将Treg细胞水平评估肿瘤患者自身免疫状态的重要参考指标，这对正确评估患者病情和判断患者预后具有重要意义。