P16蛋白在胃癌组织中的异常表达及其意义

李旭峰 白勇 周娟 倪鹏飞

（1 贵阳护理职业学院卫生管理系 贵州 贵阳 550081）

（2 新疆医科大学第二附属医院肿瘤科 新疆 乌鲁木齐 830002）

（3 贵阳护理职业学院文基部 贵州 贵阳 550081）

P16是一种抑癌基因，有研究表明癌症的形成与发展和P16的表达异常存在一定关联[1]，

这是因为P16为能够抑制细胞周期分化依赖激酶（CDK），和CDK产生结合反应，使其失活，从而阻止细胞进一步增殖。因此当P16表达异常时，可导致细胞增殖失控，诱发恶性肿瘤。基于P16在抑制癌症过程中对细胞增殖发生的作用，推断P16的异常表达和胃癌存在一定关系。为进一步验证此种推断，明确P16蛋白在胃癌组织中异常表达的特征，以此为胃癌的临床症状及预后判断提供参考，本次选取新疆医科大学第二附属医院近年收治的70例胃癌患者为观察组，另选取同期于新疆医科大学第二附属医院健康体检的70例正常人群为对照组，观察不同类型人群P16的检测结果并比较，现报道如下。

1.资料和方法

1.1 一般资料

选取2017年12月-2018年12月新疆医科大学第二附属医院收治的70例胃癌患者为观察组，另选取同期于新疆医科大学第二附属医院健康体检的70例正常人群归为对照组。其中观察组男性52例，女性18例。年龄42-77岁，平均（54.26±2.74）岁。对照组男性49例，女性21例。年龄41-76岁，平均（53.87±3.19）岁。两组在年龄、性别等一般资料方面没有统计学差异，P＞0.05，具可比性。

1.2 方法

取检验标本后，在半小时内通过10%的福尔马林固定[2]，经24h后，通过乙醇脱水，以及二甲苯透明处理2次，之后浸泡包埋，并制作成厚度为4μm的切片。之后分别通过免疫组织化学SP法两组组织标本切片进行P16检测，检测试剂由武汉博士德公司制造，严格根据检测试剂说明进行操作。

1.3 判定标准

P16阳性染色细胞表达呈胞核型，并为清晰的棕黄色。阳性分级：（-）切片中没有阳性细胞。（+）切片中的阳性细胞在25%以下。（++）切片中的阳性细胞在25%-50%之间。（+++）切片中的阳性细胞超过50%。以（+）、（++）、（+++）为阳性。阴性即为P16异常表达。

1.4 统计学分析

本次实验数据采用SPSS20.0软件进行统计学分析，其中计量资料用t检验，计数资料用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 组间对比

对照组P16阳性例数为70例，阳性率为100%，观察组P16的阳性例数为30例，阳性率为42.86%，对照组阳性率显著高于观察组，P＜0.05。

2.2 组内对比

胃癌组织分化程度低的患者P16阳性率显著低于分化程度高的患者，发生淋巴结转移的患者P16阳性率显著低于未发生淋巴结转移的患者，TNM分期为Ⅲ-Ⅳ级的患者P16阳性率显著低于TNM分期为I-Ⅱ级的患者，P＜0.05。但在性别和浸润程度方面，P16的阳性率没有差异，P＞0.05，见表。

表 不同类型胃癌组织的P16表达情况

3.讨论

P16蛋白是近年来所发现可抑制癌症的基因[3]，由2个内含子以及3个外显子所构成，在人类9号位染色体上的p21位置，长度约为8.5kb。之所以认为P16为抑癌基因，是因为P16能够调节细胞的分化周期，组织细胞的异常分化与增生，达到抑制肿瘤的目的[4]，这一功能的实现是因为P16为一种能够抑制细胞周期分化依赖激酶（CDK）的蛋白，P16能够和CDK产生结合反应，使其失活，从而阻止细胞进一步增殖。

如果P16蛋白出现异常，不能有效起到CDK的一直作用，就无法阻止细胞的分化增殖，导致细胞出现非正常性的增殖，将衍变为恶性肿瘤[5]。胃癌的发病机理尚不明确，开展胃癌和细胞增殖周期相关的基因研究，有助于明确胃癌的发病机制，并为胃癌的资料提供新思路。目前已发现食管癌、肺癌、食管癌、卵巢癌等多种原发恶性肿瘤疾病患者中存在高频率的异常表达[6]。但鲜有对于P16异常表达和胃癌关系的相关研究[7]。但经P16参与抑制细胞非正常增殖的原理，推断胃癌的发生也和P16表达异常存在一定关联[8]。为进一步验证这种推断，明确P16蛋白在胃癌组织中异常表达的特征，以此为胃癌的临床症状及预后判断提供参考，本次研究就选取新疆医科大学第二附属医院近年来收治的70例胃癌患者作为研究对象，通过免疫化学SP法对患者的胃癌组织进行检测。检测结果显示，胃癌患者的P16阳性率要显著低于正常人群，P＜0.05。此外胃癌组织分化程度低的患者P16阳性率显著低于分化程度高的患者，发生淋巴结转移的患者P16阳性率显著低于未发生淋巴结转移的患者，TNM分期为Ⅲ-Ⅳ级的患者P16阳性率显著低于TNM分期为I-Ⅱ级的患者，P＜0.05。可见癌症的恶化程度越高，P16的阳性率也就越低，即P16异常表达。在性别和浸润程度方面，P16的阳性率没有差异，P＞0.05。可见没有胃癌的人群其胃黏膜组织中的P16均为正常表达。而进展到不同阶段的胃癌组织，其P16表达存在差异，胃癌恶化程度越高，异常表达的频率也随之升高，表明P16蛋白基因的异常表达可能和胃癌癌变以及进展存在关联，促进了胃癌病情的发展。

综上，P16异常表达和胃癌存在相关性，胃癌患者的P16异常表达发生率高，而健康人群的P16没有异常表达。且TNM分期越高、发生淋巴结转移、癌症组织分化程度越低的胃癌患者期P16基因更容易为异常表达，故可通过P16对胃癌进行辅助检测并判断预后，具有临床参考意义。